線蟲的生物控制制造技術

提供了用于控制植物、植物部分和/或植物生長的場所中或其上的線蟲的方法，所述方法包括給需要防護所述線蟲的植物、植物部分或植物生長的場所施用有效量的短小芽胞桿菌、短小芽胞桿菌的突變體或短小芽胞桿菌的至少一種代謝物。具體地，所述短小芽胞桿菌可以是菌株QST2808。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】線蟲的生物控制專利技術背景植物寄生線蟲引起對多種農作物的嚴重損害，每年導致據估計從5%至12%的全球農作物產率損失。線蟲對根的損傷是非常普遍的，導致具有較小的根系、在它們的葉中顯示礦物質不足的癥狀以及容易枯萎的矮化植物。線蟲造成的損害也使植物易受多種植物致病性真菌和細菌引起的感染。為了抵 抗和控制線蟲，農民通常使用化學殺線蟲劑。這些殺線蟲劑從氣體和液體熏煙消毒法(例如甲基溴化物和氯化苦)到有機磷酸鹽和氨基甲酸酯例如硫磷嗪和草氨酰的施用。這些化學殺線蟲劑的使用已進行了數十年。盡管化學殺線蟲劑在控制目標線蟲中具有有效性，但存在對這些方法的嚴重限制。一個限制是化學殺線蟲劑不能作用于已穿透根的線蟲。另一個限制是與化學殺線蟲劑的生產和使用相關的危害。化學殺線蟲劑是高度毒性的，并且可導致人中毒和死亡。因此，許多國家已限制和有時禁用某些殺蟲劑。例如，甲基溴化物因其臭氧耗損效應而在大多數國家被禁用。由于這些限制和禁止，缺乏切實可行的線蟲解決方案。本公開內容提供了安全和有效的替代化學殺蟲劑的使用或減少其使用的工具。本公開內容在提供抑制線蟲至植物根內的穿透和阻止最終克服該最初屏障的那些線蟲成熟的解決方案中也是獨特的。專利技術概述本公開內容提供了用于控制植物寄生線蟲的方法和組合物。本公開內容提供了用于控制線蟲的方法，包括給植物、植物部分或植物的場所施用有效量的短小芽胞桿菌(Bacillus pumilus)、短小芽胞桿菌的突變體、短小芽胞桿菌的孢子或短小芽胞桿菌的代謝物和特別地短小芽胞桿菌QST2808、短小芽胞桿菌QST2808的突變體、短小芽胞桿菌QST2808的孢子或短小芽胞桿菌QST2808的代謝物。在一些實施方案中，將短小芽胞桿菌(例如，短小芽胞桿菌QST2808)作為包括短小芽胞桿菌、其代謝物和任選地殘留發酵液的發酵產物來施用。在一些實施方案中，目標線蟲是引起疾病的根結線蟲。在某些情況下，線蟲來自根結線蟲屬(Meloidogyne)的種類。本專利技術的組合物殺死根結線蟲的卵、減少根結線蟲植物穿透和/或抑制穿透植物的根結線蟲的成熟。在其它實施方案中，目標線蟲是孢囊線蟲。在某些情況下，線蟲來自異皮線蟲屬(Heterodera)的種。在其它情況下，線蟲來自胞囊線蟲屬(Globodera)的種。在一些實施方案中，將上述組合物與至少一種其它殺蟲劑例如殺真菌劑、殺昆蟲劑、殺線蟲劑或除草劑混合。在一個實施方案中，殺蟲劑是殺線蟲劑。在某些實施方案中，將基于短小芽胞桿菌QST2808的殺線蟲劑與商購可得的配制的殺線蟲劑混合于罐中。在其它實施方案中，將基于短小芽胞桿菌的組合物(例如，短小芽胞桿菌QST2808)與至少一種其它殺蟲劑混合，隨后配制，以便多種活性物形成一種產物。本公開內容還提供了本公開內容的任何組合物，所述組合物還包含配制惰性物或其它配制成分例如多糖(淀粉、麥芽糊精、甲基纖維素、蛋白質例如乳清蛋白、肽、樹脂)、糖(乳糖、海藻糖、蔗糖)、脂質(卵磷脂、植物油、礦物油)、鹽(氯化鈉、碳酸鈣、檸檬酸鈉)和硅酸鹽(粘土、無定形硅、煙霧/沉淀硅酸鹽、硅酸鹽)。在一些實施方案，例如其中將組合物用于土壤的那些實施方案中，本公開內容的組合物包含載體，例如水或礦物質或有機材料例如促進組合物至土壤的摻入的泥炭(peat)。在一些實施方案，例如其中將組合物用于種子處理或用作根浸潰的那些實施方案中，載體是促進組合物至種子或根的粘附的粘合劑或粘著劑。在其中將組合物用作種子處理的另一個實施方案中，配制成分是著色劑。在其它組合物中，配制成分是防腐劑。在一些實施方案中，在種植之前，將組合物施用于植物、植物部分或植物的場所例如土壤。在其它實施方案中，在種植時施用組合物。在其它實施方案中，在種植后施用組合物。在某些實施方案中，在施用組合物之前，進行下列步驟，包括鑒定植物或用于生長的植物場所需要處理。在一些實施方案中，鑒定包括確定:用于植物生長的場所超過線蟲侵染的經濟閾值(economic threshold)。在一些實施方案中，本公開內容涉及包括短小芽胞桿菌及其用作殺線蟲劑的使用說明書的試劑盒。優選地，所述短小芽胞桿菌為短小芽胞桿菌QST2808。在一些實施方案中，這些說明書是產品標簽。在一些實施方案中，這些說明書是關于短小芽胞桿菌QST2808作為殺線蟲劑與化學殺線蟲劑組合使用的。在某些情況下，說明書指導用戶以低于化學殺線蟲劑的產品標簽所推薦的比率(當用作獨立的處理時)使用所述化學殺線蟲劑。專利技術詳述所有公開物、專利和專利申請，包括本文中的任何附圖和附錄通過引用并入，其引用程度就如同將每一個個別公開物或專利申請明確且個別地通過引用并入一樣。下列描述包括可用于理解本公開內容的信息。其不是對本文中提供的任何信息是現有技術或與目前要求保護的專利技術相關的承認，或不是對明確或隱含地參考的任何公開物是現有技術的承認。短小芽胞桿菌QST2808、其突變體、上清液和它們用于控制植物病原體和昆蟲的方法詳盡地描述于美國專利號6，245，551和6，586，231中；所述專利的每一個對于其教導的每件事明確且完整地通過引用并入本文。在這些美國專利中，菌株稱為NRRL N0.B-30087,其與QST2808同義。短小芽胞桿菌QST2808于1999年I月14日在國際承認用于專利程序的微生物保存布達佩斯協議的條款下在登錄號B-30087下保藏在NRRL中。本說明書中對QST2808的任何提及是指短小芽胞桿菌QST2808。術語“突變體”是指來源于短小芽胞桿菌的遺傳變體。在一個實施方案中，突變體具有短小芽胞桿菌的一個或多個或全部鑒定(功能)特征。在另一個實施方案中，突變體具有短小芽胞桿菌菌株QST2808的一個或多個或全部鑒定(功能)特征。在具體情況下，突變體或其發酵產物控制(作為鑒定功能特征)至少線蟲以及親代短小芽胞桿菌(例如，親代短小芽胞桿菌QST2808菌株)。這樣的突變體可以是具有與短小芽胞桿菌、特別是與短小芽胞桿菌菌株QST2808具有大于約85%，大于約90%，大于約95%，大于約98%或大于約99%的序列同一性的基因組序列的遺傳變體。突變體可通過如下方式獲得:利用化學藥品或輻射處理短小芽胞桿菌細胞，特別地短小芽胞桿菌菌株QST2808細胞，或通過從一群這樣的細胞(例如具有噬菌體抗性或抗生素抗性的突變體)選擇自發突變體，或通過本領域技術人員公知的其它方法。在一些實施方案中，術語突變體不包括在swrA基因中具有功能突變的丟失的短小芽胞桿菌細胞。本公開內容的組合物可通過按照本領域公知的方法(包括美國專利號6，245，551中描述的培養基和其它方法的使用)培養短小芽胞桿菌，具體地短小芽胞桿菌菌株QST2808來獲得。常規大規模微生物培養法包括深層發酵、固態發酵或液體表面培養。朝向發酵的終點，當營養物被耗盡時，短小芽胞桿菌細胞開始從生長期轉換成孢子形成期，以便發酵的終產物主要為孢子、代謝物和殘留發酵介質。孢子形成為短小芽胞桿菌的自然壽命周期的部分，并且通常被響應于營養物限制的細胞引發。發酵被構造來獲得高水平的短小芽胞桿菌的菌落形成單位(“cfu”)和促進孢子形成。可直接使用由發酵產生的培養基中的細菌細胞、孢子和代謝物或通過常規工業方法例如離心、切向流過濾、深度過濾和蒸發來濃縮本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種方法，其用于控制植物、植物部分和/或植物生長的場所中或其上的線蟲，包括給需要防護所述線蟲的植物、植物部分或植物生長的場所施用有效量的短小芽胞桿菌QST2808、短小芽胞桿菌QST2808的突變體或短小芽胞桿菌QST2808的至少一種代謝物。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】2011.11.04 US 61/556,0011.一種方法，其用于控制植物、植物部分和/或植物生長的場所中或其上的線蟲，包括給需要防護所述線蟲的植物、植物部分或植物生長的場所施用有效量的短小芽胞桿菌QST2808、短小芽胞桿菌QST2808的突變體或短小芽胞桿菌QST2808的至少一種代謝物。2.權利要求1的方法，其中在所述施用之前進行鑒定需要防護所述線蟲的植物、植物部分或植物生長的場所的步驟。3.權利要求2的方法，其中所述鑒定包括確定:植物生長的場所超過線蟲侵染的經濟閾值。4.權利要求1的方法，其中所述場所為土壤。5.權利要求4的方法，其中在種植前施用所述短小芽胞桿菌QST2808。6.權利要求4的方法，其中在種植時施用所述短小芽胞桿菌QST2808。7.權利要求4的方法，其中在種植后施用所述短小芽胞桿菌QST2808。8.權利要求1的方法,其中以約4xl07至約8xl014cfu/英畝的比率施用所述短小芽胞桿菌 QST2808。9.權利要求1的方法，其中將所述短小芽胞桿菌QST2808施用至種子。10.權利要求1的方法，其中所述短小芽胞桿菌QST2808為發酵產物。11.權利要求1的方法， 其中所述發酵產物包含短小芽胞桿菌QST2808、代謝物和殘留發酵液。12.權利要求1的方法，還包括施用第二殺線蟲劑。13.權利要求12的方法，其中所述第二殺線蟲劑是選自氨基甲酸酯、有機磷酸鹽及其組合的化學殺線蟲劑...

【專利技術屬性】
技術研發人員：R·N·羅亞爾蒂，V·P·托馬斯，
申請(專利權)人：拜爾作物科學有限合伙公司，
類型：發明
國別省市：美國;US