荸薺皮提取西黃松黃酮的方法技術

本發明專利技術的荸薺皮提取西黃松黃酮的方法，屬于天然有機化學領域，其特征在于，以丙酮水溶液為提取溶劑，提取荸薺皮中的西黃松黃酮，提取物用乙酸乙酯萃取后，萃取物經中壓MCI和聚酰胺柱色譜分離，然后用Sephadex?LH-20凝膠色譜反復純化，獲得含量在95％以上的西黃松黃酮產品。本發明專利技術開辟了從天然植物中提取分離西黃松黃酮的新途徑，分離效果好，產品純度高，使一貫被視為廢棄物的荸薺皮變廢為寶，所選用的MCI樹脂、聚酰胺和凝膠均可反復使用，原料易得，資源豐富，生產成本低，可進行規模化生產，具有較好的應用前景。

【技術實現步驟摘要】
荸薺皮提取西黃松黃酮的方法
本專利技術屬于天然有機化學領域，涉及一種西黃松黃酮的提取分離方法，特別是涉及一種從荸薺皮中提取分離西黃松黃酮的方法。
技術介紹
西黃松黃酮(Pinoquercetin)，化學名為6-甲基-3,5,7,3′,4′-五羥基黃酮，也稱6-甲基槲皮素，黃色針狀晶體，存在莎草科植物香附子、美國黃松的樹皮中。該化合物為槲皮素衍生物，該類衍生物具有良好的抗氧化、抗腫瘤、抗炎、抗菌等生物活性。西黃松黃酮為C-甲基化黃酮，結構特別，該類黃酮在植物中的存在不多且含量不高。因此，目前沒有發現有關植物中提取分離西黃松黃酮的工藝技術文獻。荸薺(Eleocharistuberosa)，又稱馬蹄，屬莎草科多年生淺水草本植物荸薺的地下球莖，我國大部分地區都有栽培。其中，廣西荸薺產量占全國70％，賀州荸薺產量占廣西70％。據文獻報道，荸薺有抗菌、抗腫瘤、防治呼吸道疾病、利腸通便和利尿排淋等作用；臨床上可用于治療咽喉疼痛、痰熱咳嗽、熱病煩渴、小便不利、痢疾等癥。研究表明，荸薺的活性物質主要富集在果皮和果肉之間。在荸薺加工過程中，被丟棄的荸薺皮質量約占新鮮荸薺質量的25％，資源非常豐富。我們在研究中發現荸薺皮中含有西黃松黃酮，但目前未見從荸薺皮中提取分離該化合物的文獻報道。
技術實現思路
本專利技術的目的在于：提出一種荸薺皮提取西黃松黃酮的方法。本專利技術的荸薺皮提取西黃松黃酮的方法，應用常規提取法和MCI、聚酰胺及凝膠柱色譜技術從荸薺皮中提取分離西黃松黃酮，具體步驟如下：(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用；以重量計，取荸薺皮粉末1份，加入提取罐中，每次加入4-10份70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。(2)以重量計，將提取物1份，分散在5份水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，以40-100％體積百分比的甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為70-90％體積百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A。(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為1:1-0:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。(5)以重量計，將粗品B1份，溶于4-8份甲醇中，加入等甲醇體積的水制成懸濁液，用SephadexLH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C。將所得粗品C再次用SephadexLH-20凝膠色譜純化，用甲醇水溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量達95％以上的西黃松黃酮產品。所述步驟(3)中的所述的MCI柱規格為70×460mm，填充材料為MCI-gelCHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動相流速為50mL/min，檢測波長為245nm；所述的流動相為40-100％體積百分比的甲醇水溶液。所述步驟(4)中所述的聚酰胺，規格為200-300目；所用洗脫液為體積比為1:1-0:1的氯仿-甲醇溶液。本專利技術與現有技術相比其有益效果是：設計科學合理，開辟了從天然植物中提取分離西黃松黃酮的途徑，分離效果好，產品純度高，使一貫被視為廢棄物的荸薺皮變廢為寶，所選用的層析材料MCI、聚酰胺和凝膠均可反復使用，原料易得，資源豐富，生產成本低，可進行規模化生產，具有較好的應用前景。具體實施方式下面結合實施例對本專利技術作進一步說明，但本專利技術的實施方式不限于此。本專利技術的荸薺皮提取西黃松黃酮的方法，應用常規提取法和MCI、聚酰胺及凝膠柱色譜技術從荸薺皮中提取分離西黃松黃酮，具體步驟如下：(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用。稱取一定質量(g)的荸薺皮粉末加入提取罐中，再加入4-10倍體積(mL)的70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。(2)將提取物(g)分散在5倍體積(mL)的水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，柱規格為70mm×460mm，填充材料為日本三菱化學公司生產的MCI-gelCHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動相流速為50mL/min，檢測波長為254nm，以40-100％體積百分比的甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，根據檢測峰變化情況調節洗脫液濃度，按每份500mL收集，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為70-90％體積百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A。(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為1:1-0:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。(5)將粗品B(g)溶于4-8倍體積(mL)的甲醇中，加入等甲醇體積的水制成懸濁液，用瑞典AmershamPharmaciaBiotech公司生產的SephadexLH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C。將所得粗品C再次用SephadexLH-20凝膠色譜純化，用甲醇水溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量達95％以上的西黃松黃酮產品。實施例1將8kg新鮮荸薺皮粉末加入在提取罐中，加入32L70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，共浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮膏狀，獲得提取物1.05kg。將提取物加入5.0L水中制成渾濁液，用5.0L乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮，獲得萃取物120g。往萃取物中加入300mL甲醇溶解，用260g聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，用40-100％體積百分比的甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，按每份500mL收集，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為70-90％體積百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A31g。將粗品A溶于90mL甲醇中，加入60g聚酰胺拌樣，將甲醇揮發干，轉入聚酰胺柱進行分離，用甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B1.5g。將粗品B溶于6.0mL的甲醇中，加入6.0mL水制成懸濁液，用SephadexLH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C0.15g。所得粗品C再次用SephadexLH-20凝膠色譜純化，用68％體積百分比甲醇洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量為96.2％的西黃松黃酮20.0mg。實施例2將8kg新鮮荸薺皮粉末加入在提取罐中，加入32L70％體積百本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種荸薺皮提取西黃松黃酮的方法，其具體步驟如下：(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用；以重量計，取荸薺皮粉末1份，加入提取罐中，每次加入4?10份70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物。(2)以重量計，將提取物1份，分散在5份水中制成懸濁液，用1?2倍水體積的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物。(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2?4倍萃取物質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，以40?100％體積百分比的甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為70?90％體積百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A。(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2?4倍質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為1:1?0:1的氯仿?甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品B。(5)以重量計，將粗品B1份，溶于4?8份甲醇中，加入等甲醇體積的水制成懸濁液，用Sephadex?LH?20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品C。將所得粗品C再次用Sephadex?LH?20凝膠色譜純化，用甲醇水溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃酮的洗脫液，減壓濃縮，干燥，獲得含量達95％以上的西黃松黃酮產品。...

【技術特征摘要】
1.一種荸薺皮提取西黃松黃酮的方法，其具體步驟如下：(1)將新鮮的荸薺皮風干，粉碎，備用；以重量計，取荸薺皮粉末1份，加入提取罐中，每次加入4-10份70％體積百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次，過濾，合并濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物；(2)以重量計，將提取物1份，分散在5份水中制成懸濁液，用1-2倍水體積的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，獲得萃取物；(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，裝柱，連接MCI柱進行中壓分離，以40-100％體積百分比的甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并流動相濃度為70-90％體積百分比的洗脫液，減壓濃縮，獲得粗品A；(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍質量的聚酰胺拌樣，將甲醇揮發至干，轉入聚酰胺色譜柱進行分離，用體積比為1:1-0:1的氯仿-甲醇溶液洗脫，薄層色譜法檢測，收集合并含有西黃松黃...

【專利技術屬性】
技術研發人員：何星存，羅楊合，李行任，馬璐，莫陽姣，
申請(專利權)人：賀州學院，
類型：發明
國別省市：廣西;45