人IL-23抗原結合蛋白制造技術

本發明專利技術提供與人IL-23蛋白結合的抗原結合蛋白。亦提供編碼所述抗原結合蛋白的核酸、編碼所述抗原結合蛋白的載體和細胞以及IL-23抗原結合蛋白用于診斷和治療目的的用途。

【技術實現步驟摘要】
【專利說明】人IL-23抗原結合蛋白 本申請為分案申請，原申請的申請日為2010年10月26日，申請號為 201080059062. X(PCT/US2010/054148)，專利技術名稱為"人 IL-23 抗原結合蛋白"。 相關申請的交叉引用 本申請依據35 U.S.C. 119(e)，要求保護于2009年10月26日提交的美國專利申請號 61/254, 982和于2010年9月9日提交的美國專利申請號61/381，287的權益，所述申請通 過引用并入本文中。 背景 白介素23 (IL-23)這種異二聚體細胞因子是促炎細胞因子的有效誘導物。IL-23與異 二聚體細胞因子白介素12 (IL-12)有關，二者都共有共同的p40亞基。在IL-23中，獨特 的pl9亞基與p40亞基共價結合。在IL-12中，獨特的亞基為p35 (Oppmann等，Immunity, 2000，13: 713-715)。IL-23異二聚體蛋白為分泌性的。象IL-12-樣，IL-23由抗原呈遞 細胞（例如樹突細胞和巨噬細胞）因響應激活刺激例如CD40連接、Toll樣受體激動劑和 病原體而表達。IL-23結合異二聚體受體，所述受體包含IL-12RM亞基（其與IL-12受 體共有）和獨特的受體亞基IL-23R。IL-12受體由IL-12R0 1和IL-12R0 2組成。IL-23 結合其異二聚體受體，并通過JAK2和Tyk2傳導信號以激活STAT1、3、4和5 (Parham等，J. Immunol. 2002，168:5699-708)。所述受體亞基主要在激活的或記憶T細胞和自然殺傷細 胞上共表達，在樹突細胞、單核細胞、巨噬細胞、小膠質細胞、角質形成細胞和滑膜成纖維細 胞上亦以較低水平表達。IL-23和IL-12對不同的T細胞亞群起作用，在體內起基本上不同 的作用。 IL-23對激活的和記憶T細胞起作用，并促進T細胞亞群Thl7的存活和擴增。Thl7 細胞產生包括11-6、幾-17、了即€1、幾-22和61^5?在內的促炎細胞因子。幾-23亦對自然 殺傷細胞、樹突細胞和巨噬細胞起作用，以誘導促炎細胞因子表達。不象IL-23, IL-12誘導 幼稚⑶4+ T細胞分化為成熟的產IFNy效應細胞Thl，并通過刺激IFNy生產誘導NK和細 胞毒性T細胞的功能。先前認為在很多自身免疫性疾病中由IL-12驅動的Thl細胞為病原 性T細胞亞群，然而，最近在炎性腸病、銀肩病、炎性關節炎和多發性硬化癥模型中的動物 研宄（其中評估了 IL-12與IL-23相比的單獨貢獻），堅定地確定在自身免疫/炎性疾病 中是 IL-23 而不是 IL-12 為關鍵驅動者（Ahern 等，Immun. Rev. 2008 226:147-159 ;Cua 等，Nature 2003 421:744-748 ;Yago 等，Arthritis Res and Ther. 2007 9(5): R96)。認 為IL-12在針對很多細胞內病原體和病毒的保護性先天免疫應答和適應性免疫應答發展 中及在腫瘤免疫監視中起關鍵作用。參見Kastelein等，Annual Review of Immunology, 2007，25: 221-42 ;Liu，等，Rheumatology, 2007，46(8): 1266-73 ;Bowman 等，Current Opinion Infectious Diseases, 2006 19:245-52 ;Fieschi 和 Casanova, Eur. J. Immunol. 2003 33:1461-4 ;Meeran 等，Mol. Cancer Ther. 2006 5: 825-32 ;Langowski 等，Nature 2006 442: 461-5。因此，與IL-12及IL-23雙重抑制相比，IL-23特異性抑制 (寬免IL-12或共享的p40亞基）應該具有潛在更優越的安全特性。 因此，抑制人IL-23而寬免IL-12的IL-23特異性拮抗劑（例如至少結合IL-23的 獨特的P19亞基或結合IL-23的pl9和p40亞基二者的抗體）的使用，應該提供等于或大 于IL-12拮抗劑或p40拮抗劑的效力而無與抑制IL-12關聯的可能風險。業已闡述了選擇 用于抑制重組IL-23的鼠、人源化和噬菌體展示抗體；參見例如美國專利7, 491，391、WIPO 簡述 提供結合IL-23尤其是天然人IL-23的抗原結合蛋白。人IL-23抗原結合蛋白可降低、 抑制、干擾和/或調節至少一種與IL-23相關的生物反應，如此，用于改善IL-23相關疾病 或病癥的影響。可例如將IL-23抗原結合蛋白用于降低、抑制、干擾和/或調節IL-23信號 傳導、IL-23對Thl7細胞的激活、IL-23對NK細胞的激活或誘導促炎細胞因子產生。 亦提供包括細胞系在內的表達系統用于生產IL-23抗原結合蛋白，并提供診斷和 治療與人IL-23相關疾病的方法。 提供的結合IL-23的一些抗原結合蛋白包含至少一個重鏈可變區并包含至少一 個輕鏈可變區，所述重鏈可變區包含選自以下的⑶RH1、⑶RH2和⑶RH3 :與表3中所示的 CDRH1相差不超過1個氨基酸取代、插入或缺失的CDRH1 ;與表3中所示的CDRH2相差不超 過3個、2個或1個氨基酸取代、插入和/或缺失的CDRH2 ;與表3中所示的CDRH3相差不超 過3個、2個或1個氨基酸取代、插入和/或缺失的⑶RH3 ;所述至少一個輕鏈可變區包含選 自以下的⑶RL1、⑶RL2和⑶RL3 :與表3中所示的⑶RL1相差不超過3個、2個或1個氨基 酸取代、插入和/或缺失的CDRL1;與表3中所示的CDRL2相差不超過1個氨基酸取代、插入 或缺失的CDRL2 ;與表3中所示的CDRL3相差不超過1個氨基酸取代、插入或缺失的CDRL3。 在一個實施方案中，提供分離的抗原結合蛋白，其包含：選自SEQ ID N0: 91、94、97、100和 103 的 CDRH1;選自 SEQ ID NO: 92、95、98、101、104、107和110的〇)冊2;選自5￡0 10勵： 93、96、99、102和105的〇)冊3;選自5￡010勵：62、65、68、71和74的〇)虬1 ;選自5￡010 N0: 63、66、69、72、75和78的〇)虬2;和選自5￡010勵：64、67、70和73的〇)虬3。在另一 實施方案中，提供分離的抗原結合蛋白，其包含：選自SEQ ID N0: 91、106、109、112和115 的 CDRH1;選自 SEQ ID N0: 113、116、118、120、121和122的〇)冊2;選自5￡0 10勵：108、 111、114、117 和 119 的 CDRH3;選自 SEQ ID NO: 77、80、83、85、86、87、88、89和90的〇)虬1; 為 SEQ ID NO: 81 的 CDRL2;和選自 SEQ ID NO: 76、79、82 和 84 的 CDRL3。在另一實施方 案中，提供包含至少一個重鏈可變區和至少一個輕鏈可變區的分離的抗原結合蛋白。在又 一實施方案中，提供如上所述的分離的本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種結合IL?23的分離的抗原結合蛋白，所述抗原結合蛋白包含至少一個重鏈可變區和至少一個輕鏈可變區，所述重鏈可變區包含選自以下的CDRH1、CDRH2和CDRH3：a)與表3中所示的CDRH1相差不超過1個氨基酸取代、插入或缺失的CDRH1；b)與表3中所示的CDRH2相差不超過3個氨基酸取代、插入和/或缺失的CDRH2；c)與表3中所示的CDRH3相差不超過3個氨基酸取代、插入和/或缺失的CDRH3；所述輕鏈可變區包含選自以下的CDRL1、CDRL2和CDRL3：d)與表3中所示的CDRL1相差不超過3個氨基酸取代、插入和/或缺失的CDRL1；e)與表3中所示的CDRL2相差不超過1個氨基酸取代、插入或缺失的CDRL2；f)與表3中所示的CDRL3相差不超過1個氨基酸取代、插入或缺失的CDRL3。

【技術特征摘要】
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【專利技術屬性】
技術研發人員：JE托恩，JD鄭，JC奧奈爾，張宇，孫雨，H塞爾恩，DE皮珀，RR克徹姆，
申請(專利權)人：安姆根有限公司，
類型：發明
國別省市：美國;US