一種蘿卜胞質雄性不育系選育的方法技術

本發(fā)明專利技術提供一種蘿卜胞質雄性不育系選育的方法，包括雜交產生F1；雜交產生BC1F1；雜交產生BC2F1；雜交產生BC3F1；不育系選育完成共五個步驟；用本發(fā)明專利技術選育蘿卜胞質雄性不育系具有如下優(yōu)點：(1)本方法在轉育過程中利用壁蜂等蟲媒節(jié)省了人工，擴大了轉育規(guī)模，能夠有效排除不穩(wěn)定保持型保持系。(2)本發(fā)明專利技術利用保持系混交的方式進行加代，能夠避免自交衰退現(xiàn)象，同時利用蟲媒授粉，減少人工。

【技術實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術涉及蘿卜雜種優(yōu)勢培育領域，特別涉及一種蘿卜胞質雄性不育系選育的方 法。
技術介紹
蘿卜（Raphanus sativus L.)又名萊菔、蘆菔，是十字花科蘿卜屬的常異花授粉植 物。蘿卜起源于中國，栽培歷史悠久，分布較廣，種質資源豐富，具有顯著的雜種優(yōu)勢。利用 雜種優(yōu)勢能大幅度提高產量和改善品質，雄性不育是利用雜種優(yōu)勢的重要途徑，具有種子 純度高、節(jié)省人力的優(yōu)點。培育新型不育系是利用雜種優(yōu)勢的前提和基礎。在育種實踐中， 轉育是改良原有不育系缺陷，獲得性狀優(yōu)異不育系的重要工作。傳統(tǒng)上蘿卜不育系轉育需 要人工進行大量的雜交、回交篩選工作?？焖?、準確建立不育系是蘿卜雜交育種工作中急需 解決的技術問題。 蘿卜雄性不育的遺傳背景復雜，不同種質具有不同的雄性不育基因，在轉育不育 系的過程中，不同種質對不育性的保持能力有差異，可分為4個類型一一完全保持型、易保 持型、不穩(wěn)定保持型和不易保持型。因此保持系篩選是轉育不育系能否取得成功的關鍵。蘿 卜作為常異花授粉植物，具有嚴重的自交衰退現(xiàn)象，保持系作為不育系轉育的輪回親本，隨 著轉育世代的增加，多代自交的保持系易出現(xiàn)嚴重退化，影響不育系的穩(wěn)定，降低不育系配 合力。 20世紀70年代以來，蘿卜雄性不育系轉育、利用、遺傳機制的研究等工作大量開 展，尤其是分子標記輔助選擇等現(xiàn)代生物技術的應用促進了保持系篩選工作的優(yōu)化，但通 過人工進行自交、雜交的傳統(tǒng)方式沒有得到改善，不育系轉育的田間工作沒有能夠優(yōu)化，因 此改進蘿卜不育系的田間轉育工作的操作方式十分迫切。
技術實現(xiàn)思路
有鑒于此，本專利技術的目的是針對目前蘿卜雄性不育系選育工作中消耗大量人工的 不足之處，提供一種省工、高效的選育方法。 本專利技術通過以下技術手段解決上述問題： 本專利技術的，包括以下步驟： 步驟1 :雜交產生F1 ; 步驟1. 1 :保持系選擇； 保持系選擇具有優(yōu)異性狀的自交系，要求種性純，一致性高，無明顯自交衰退，自 交結實率高；保持系種株符合種質特征，生長整齊一致； 步驟1.2:母本選擇； 選種圃選擇生長良好的具有不育性狀的植株作為母本； 步驟1.3:種株定植； 父本5株，母本5株連片定植，并與其它小區(qū)間隔1.5米； 步驟1.4:花期處理； 花期前種株用防蟲網罩進行隔離，開花后再次調查父本一致性，拔除不符合一致 性的雜株；母本調查育性，拔除可育株，調查完成之后所有種株去花，然后放熊蜂或壁蜂進 行授粉； 步驟1.5:收種； 保持系單株收種保存，匕雜交種混收保存； 步驟2 :雜交產生BC^; 步驟2. 1 :播種； 保持系選用步驟1. 5中保存的種子，母本為步驟1. 5中保存的匕雜交種； 步驟2. 2 :種株定植； 調查保持系純度，符合步驟1. 1的要求后，篩選種株10株；母本挑選生長良好種株 50株以上；保持系與母本連片種植，并與其它小區(qū)間隔1. 5米； 步驟2. 3 :花期處理； 開花前種株用防蟲網罩進行隔離，開花后再次調查父本一致性，拔除不符合一致 性的雜株；母本調查育性，拔除可育株并計算匕代不育率X。，調查完成之后所有種株去花， 然后放熊蜂或壁蜂進行授粉，\若為〇,保持系為不易保持型，此保持系淘汰； 步驟2. 4 :估算轉育世代； 根據(jù)X。估算蘿卜不育系轉育BC A的不育率，確定轉育代數(shù)并估算BC兄的不育 率； 步驟2. 5:收種； 與步驟1. 5中相同，保持系單株收種保存，BC^混收保存； 步驟3 :雜交產生BC2F1; 與步驟2相同，根據(jù)實際調查的BC^的不育率X i與估算的不育率進行比較，當實 際調查的不育率顯著低于估算的不育率時，保持系為不穩(wěn)定保持型可疑型，不育率受環(huán)境 等影響較大，此保持系淘汰； 步驟4 :雜交產生BC3F1; 與步驟3相同，淘汰不穩(wěn)定保持型可疑型的保持系；BCnFi代與輪回親本保持系遺 傳相似成分BCR與輪回保持系的遺傳相似成分達到93. 75%，則初步測定 配合力及試配雜交種； 步驟5 :不育系選育完成； BC3Fi代之后的回交轉育過程與步驟4相同，根據(jù)不育系的不育率確定轉育進程， 直至達到要求并穩(wěn)定，然后開展后續(xù)新品種選育工作。 進一步地，所述步驟1. 2中選種圃選擇生長良好的具有不育性狀的植株作為母本 中所述母本為商品種F1或穩(wěn)定不育系。 進一步地，所述步驟1. 3中的父本為保持系。 進一步地，所述步驟2. 4中根據(jù)X。估算蘿卜不育系轉育BC丸的不育率的公式為 Xn= ι-(ι-χ0)η+1。 本專利技術的具有以下有益效果： 本專利技術的目的是針對目前蘿卜雄性不育系選育工作中消耗大量人工的不足之處， 提供一種省工、高效的選育方法。 用本專利技術選育蘿卜胞質雄性不育系具有如下優(yōu)點： (1)蘿卜胞質雄性不育系的選育是蘿卜雜交育種的重要部分，但生產實踐表明蘿 卜雄性不育基因復雜，保持系篩選與不育系轉育的工作繁瑣。按照常規(guī)的雄性不育系轉育 手段，需要大量的人工進行轉育工作，而本方法在轉育過程中利用壁蜂等蟲媒節(jié)省了人工， 擴大了轉育規(guī)模，能夠有效排除不穩(wěn)定保持型保持系。 (2)按照常規(guī)的雄性不育系轉育手段，作為輪回親木的保持系隨著自交世代的增 加自交衰退的現(xiàn)象較為嚴重，不利于選擇優(yōu)良的雄性不育系。因此在轉育過程中需要增加 輪回親本的選擇工作，本專利技術利用保持系混交的方式進行加代，能夠避免自交衰退現(xiàn)象，同 時利用蟲媒授粉，減少人工?！揪唧w實施方式】 下面結合【具體實施方式】對本專利技術的
技術實現(xiàn)思路
作進一步說明。 (1)雜交產生F1 (1. 1)保持系選擇 選用自交系A1、A2、A3、A4作為保持系，四個自交系分別選育自地方品種揚州圓白 蘿卜（A1，南京理想種苗有限公司）、里外青蘿卜（A2,青縣鑫農蔬菜種苗育種中心）、特級紅 麗枇杷葉（A3,江西省豐城市蔬菜研究所）、南京紅（A4,南京沃蔬種業(yè)有限公司）。保持系 性狀優(yōu)異，種性純，一致性高，無明顯自交衰退，自交結實率高。種株符合地方品種特征，生 長整齊一致。 (1. 2)母本選擇 母本選擇商品種早熟紅小新櫻桃蘿卜，由香港高華種子有限公司生產。[0當前第1頁1 2 本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種蘿卜胞質雄性不育系選育的方法，其特征在于：包括以下步驟：步驟1：雜交產生F1；步驟1.1：保持系選擇；保持系選擇具有優(yōu)異性狀的自交系，要求種性純，一致性高，無明顯自交衰退，自交結實率高；保持系種株符合種質特征，生長整齊一致；步驟1.2：母本選擇；選種圃選擇生長良好的具有不育性狀的植株作為母本；步驟1.3：種株定植；父本5株，母本5株連片定植，并與其它小區(qū)間隔1.5米；步驟1.4：花期處理；花期前種株用防蟲網罩進行隔離，開花后再次調查父本一致性，拔除不符合一致性的雜株；母本調查育性，拔除可育株，調查完成之后所有種株去花，然后放熊蜂或壁蜂進行授粉；步驟1.5：收種；保持系單株收種保存，F(xiàn)1雜交種混收保存；步驟2：雜交產生BC1F1；步驟2.1：播種；保持系選用步驟1.5中保存的種子，母本為步驟1.5中保存的F1雜交種；步驟2.2：種株定植；調查保持系純度，符合步驟1.1的要求后，篩選種株10株；母本挑選生長良好種株50株以上；保持系與母本連片種植，并與其它小區(qū)間隔1.5米；步驟2.3：花期處理；開花前種株用防蟲網罩進行隔離，開花后再次調查父本一致性，拔除不符合一致性的雜株；母本調查育性，拔除可育株并計算F1代不育率X0，調查完成之后所有種株去花，然后放熊蜂或壁蜂進行授粉；X0若為0，保持系為不易保持型，此保持系淘汰；步驟2.4：估算轉育世代；根據(jù)X0估算蘿卜不育系轉育BCnF1的不育率，確定轉育代數(shù)并估算BC1F1的不育率；步驟2.5：收種；與步驟1.5中相同，保持系單株收種保存，BC1F1混收保存；步驟3：雜交產生BC2F1；與步驟2相同，根據(jù)實際調查的BC1F1的不育率X1與估算的不育率進行比較，當實際調查的不育率顯著低于估算的不育率時，保持系為不穩(wěn)定保持型可疑型，不育率受環(huán)境等影響較大，此保持系淘汰；步驟4：雜交產生BC3F1；與步驟3相同，淘汰不穩(wěn)定保持型可疑型的保持系；BCnF1代與輪回親本保持系遺傳相似成分BC3F1與輪回保持系的遺傳相似成分達到93.75％，則初步測定配合力及試配雜交種；步驟5：不育系選育完成；BC3F1代之后的回交轉育過程與步驟4相同，根據(jù)不育系的不育率確定轉育進程，直至達到要求并穩(wěn)定，然后開展后續(xù)新品種選育工作。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：孫菲菲，王夏，王強，王東升，
申請(專利權)人：南京市蔬菜科學研究所，
類型：發(fā)明
國別省市：江蘇;32