二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法，所述方法利用結(jié)合紫外檢測器的高效液相色譜法進行，其中，采用五氟苯基色譜柱；流動相由流動相A和流動相B組成；采用醋酸銨緩沖液作為所述流動相A；采用甲醇作為所述流動相B；洗脫方式為梯度洗脫。采用該方法，可以很好地分離二對甲苯磺酸拉帕替尼的同分異構(gòu)體雜質(zhì)，靈敏度高，專屬性強，分離度達到要求。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及藥物分析
，具體地，涉及二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法。
技術(shù)介紹
二對甲苯磺酸拉帕替尼具有式1所示的結(jié)構(gòu)：拉帕替尼，是一種能夠同時靶向人表皮生長因子受體(EGFR)和人表皮生長因子受體-2(HER2)的小分子激酶抑制劑，藥用為二對甲苯磺酸拉帕替尼，由英國葛蘭素史克公司開發(fā)，于2007年3月獲得美國FDA批準，用于聯(lián)合用藥：合用卡培他濱治療過度表達HER2的晚期或轉(zhuǎn)移性乳腺癌，合用來曲唑治療過度表達HER2、激素受體陽性的轉(zhuǎn)移性乳腺癌絕經(jīng)期婦女。然而，目前二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法仍有待改進。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問題之一。為此，本專利技術(shù)的一個目的在于提出一種分離度好、分離效率高的二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法。二對甲苯磺酸拉帕替尼中通常含有雜質(zhì)，本專利技術(shù)的專利技術(shù)人發(fā)現(xiàn)分別具有式2、式3所示結(jié)構(gòu)的兩個二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體是主要雜質(zhì)，而含有同分異構(gòu)體雜質(zhì)會影響二對甲苯磺酸拉帕替尼的質(zhì)量和穩(wěn)定性。本專利技術(shù)的專利技術(shù)人經(jīng)過不斷探索和反復實驗，提出了一種分離度好、分離效率高的二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法。因此，本專利技術(shù)提供了一種二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法。根據(jù)本專利技術(shù)的實施例，該方法利用結(jié)合紫外檢測器的高效液相色譜法進行，其中，采用五氟苯基柱；流動相由流動相A和流動相B組成；采用醋酸銨緩沖液作為所述流動相A；采用甲醇作為所述流動相B；洗脫方式為梯度洗脫。采用本專利技術(shù)的方法，可以很好地分離二對甲苯磺酸拉帕替尼的同分異構(gòu)體雜質(zhì)，靈敏度高，專屬性強，分離度達到要求。根據(jù)本專利技術(shù)實施例的二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法還可以具有以下附加技術(shù)特征：根據(jù)本專利技術(shù)的實施例，所述紫外檢測器的檢測波長為261±2nm。專利技術(shù)人將二對甲苯磺酸拉帕替尼的供試品溶液，應(yīng)用紫外-可見分光光度計在190nm～400nm進行全掃描，發(fā)現(xiàn)二對甲苯磺酸拉帕替尼的最大吸收波長為261nm，故選擇261±2nm作為檢測波長。根據(jù)本專利技術(shù)的實施例，所述高效液相色譜法的柱溫為35攝氏度～40攝氏度。由此，有利于二對甲苯磺酸拉帕替尼和其同分異構(gòu)體雜質(zhì)進行分離，如果溫度過高或過低，分離效果均不理想。根據(jù)本專利技術(shù)的實施例，所述高效液相色譜法的流速為0.8～1.2ml/min。由此，有利于二對甲苯磺酸拉帕替尼和其同分異構(gòu)體雜質(zhì)進行分離，且分離度好，分離效果佳，如果流速過快或過慢，分離效果均不理想。根據(jù)本專利技術(shù)的實施例，在所述醋酸銨緩沖液中，醋酸銨的濃度為40～60mmol/L時，二對甲苯磺酸拉帕替尼和其同分異構(gòu)體雜質(zhì)進行分離的效果理想，且分離度復合要求，專屬性好。根據(jù)本專利技術(shù)的實施例，所述醋酸銨緩沖液用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至4.0～5.0。由此，有利于二對甲苯磺酸拉帕替尼和其同分異構(gòu)體雜質(zhì)進行分離，分離效果理想，分離效率高。如果pH過高或過低，分離效果均不理想。根據(jù)本專利技術(shù)的實施例，所述線性梯度洗脫的條件為：時間(分鐘)流動相A(％)流動相B(％)06832306337403070503070526832606832。由此，有利于二對甲苯磺酸拉帕替尼和其同分異構(gòu)體雜質(zhì)進行分離，能夠獲得較理想的分離效果。專利技術(shù)人發(fā)現(xiàn)，利用本專利技術(shù)所述的二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析方法，能夠快速有效地將二對甲苯磺酸拉帕替尼和其同分異構(gòu)體雜質(zhì)分離，且用時短、分離度好、分離效率高、專屬性強。根據(jù)本專利技術(shù)的實施例，所述方法包括以下步驟：(1)取二對甲苯磺酸拉帕替尼原料藥，用體積比為4：1的乙腈-水混合溶劑超聲溶解，配制成二對甲苯磺酸拉帕替尼濃度為0.1mg/ml的供試品溶液；(2)色譜條件：儀器采用高效液相色譜儀配備紫外檢測器；采用五氟苯基色譜柱，以用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至4.0～5.0的濃度為40～60mmol/L的醋酸銨緩沖液為所述流動相A，以甲醇為所述流動相B，洗脫方式為等度洗脫，檢測波長為261±2nm，流速為0.8～1.2ml/min，柱溫為35攝氏度～40攝氏度，按下表所示條件進行所述線性梯度洗脫，所述線性梯度洗脫的條件為：時間(分鐘)流動相A(％)流動相B(％)06832306337403070503070526832606832。(3)取所述供試品溶液5μl，按照上述色譜條件，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果顯示：式2、以及式3所示結(jié)構(gòu)的化合物雜質(zhì)與二對甲苯磺酸拉帕替尼的主峰可以實現(xiàn)良好的分離。根據(jù)本專利技術(shù)的一個具體示例，二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析方法包括以下步驟：(a-1)取二對甲苯磺酸拉帕替尼原料藥，用體積比為4：1的乙腈-水混合溶劑超聲溶解，配制成二對甲苯磺酸拉帕替尼濃度為0.1mg/ml的供試品溶液；(a-2)色譜條件：采用五氟苯基柱，以用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至4.5的濃度為50mmol/L的醋酸銨緩沖液為所述流動相A，以甲醇為所述流動相B，檢測波長為261nm，流速為1.2ml/min，柱溫為40攝氏度，按下表所示條件進行所述線性梯度洗脫，時間(分鐘)流動相A(％)流動相B(％)06832306337403070503070526832606832，(a-3)取所述供試品溶液5μl，按照上述色譜條件，注入配備紫外檢測器的高效液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果顯示，式2、以及式3所示結(jié)構(gòu)的化合物雜質(zhì)與二對甲苯磺酸拉帕替尼的主峰可以實現(xiàn)良好的分離，且分離度好、分離時間短、分離效率效率高、專屬性強。根據(jù)本專利技術(shù)的一個具體示例，二對甲苯磺酸拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析方法包括以下步驟：(b-1)取二對甲苯磺酸拉帕替尼原料藥，用體積比為4：1的乙腈-水混合溶劑超聲溶解，配制成二對甲苯磺酸拉帕替尼濃度為0.1mg/ml的供試品溶液；(b-2)色譜條件：采用五氟苯基柱，以用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至5.0的濃度為本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法，其特征在于，所述方法利用結(jié)合紫外檢測器的高效液相色譜法進行，其中，色譜柱采用五氟苯基柱；流動相由流動相A和流動相B組成；采用醋酸銨緩沖液作為所述流動相A；采用甲醇作為所述流動相B；洗脫方式為梯度洗脫。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種拉帕替尼同分異構(gòu)體雜質(zhì)的分析檢測方法，其特征在于，所述方法利用結(jié)合紫
外檢測器的高效液相色譜法進行，其中，
色譜柱采用五氟苯基柱；
流動相由流動相A和流動相B組成；
采用醋酸銨緩沖液作為所述流動相A；
采用甲醇作為所述流動相B；
洗脫方式為梯度洗脫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述紫外檢測器的檢測波長為261±2nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的柱溫為35～40攝
氏度。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的流速為0.8～1.2
ml/min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述醋酸銨緩沖液中，醋酸銨的濃度
為40～60mmol/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述醋酸銨緩沖液用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至
4.0～6.0。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述線性梯度洗脫的條件為：
時間(分鐘)
流動相A(％)
流動相B(％)
0
68
32
30
63
37
40
30
70
50
30
70
52
68
32
60
68
32
。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)取二對甲苯磺酸拉帕替尼原料藥，用體積比為4：1的乙腈-水混合溶劑超聲溶解，
配制成二對甲苯磺酸拉帕替尼濃度為0.1mg/ml的供試品溶液；
(2)色譜條件：采用五氟苯基柱，以用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至4.0～6.0的濃度為40～60mmol/L
的醋酸銨緩沖液為所述流動相A，以甲醇為所述流動相B，檢測波長為261±2nm，流速為
0.8～1.2ml/min，柱溫為35～40攝氏度，按下表所示條件進行所述線性梯度洗脫，
時間(分鐘)
流動相A(％)
流動相B(％)
0
68
32
30
63
37
40
30
70
50
30
70
52
68
32
60
68
32
，
(3)取所述供試品溶液5μl，按照上述色譜條件，注入配備紫外檢測器的高效液相色
譜儀，記錄色譜圖。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，包括下列之一：
(a-1)取二對甲苯磺酸拉帕替尼原料藥，用體積比為4：1的乙腈-水混合溶劑超聲溶
解，配制成二對甲苯磺酸拉帕替尼濃度為0.1mg/ml的供試品溶液；
(a-2)色譜條件：采用五氟苯基柱，以用冰醋酸調(diào)節(jié)pH至4.5的濃度為50m...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王學海，許勇，李莉娥，夏亞子，郭滌亮，樂洋，黃璐，楊仲文，余艷平，胡斌，胡虹，田華，馮權(quán)武，朱壘，肖強，黃松，于靜，
申請(專利權(quán))人：人福醫(yī)藥集團股份公司，
類型：發(fā)明
國別省市：湖北;42