一種膠紅酵母及其發酵培養物和應用制造技術

本文公開了一種膠紅酵母及其發酵培養物和應用，所述的膠紅酵母為：膠紅酵母TZR2014，CCTCC　NO：M2015574。利用本發明專利技術提供的發酵培養基對其進行液態發酵，發酵液的生物量為18g/L，類胡蘿卜素的產量為36?mg/L。本發明專利技術的膠紅酵母具有抗金黃色葡萄球菌，耐胃酸和膽鹽的作用，其固態發酵物中還含有丙酮酸，而丙酮酸具有加速脂肪消耗、提高肌肉產量、吞噬體內自由基和抑制自由基的生成功能。因此本發明專利技術提供的膠紅酵母可用于畜禽水產動物的飼料添加劑，具備廣闊的應用前景。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及生物
，更具體涉及一種膠紅酵母及其發酵培養物和應用。技術背景膠紅酵母屬擔子菌，菌落為奶油色、粉紅色至紅色的粘液狀，是簡單的假菌絲，細胞形狀為圓形，為營養體細胞出芽生殖。富含蝦青素、類胡蘿卜素和β-葡聚糖。類胡蘿卜素是一種橘黃色脂溶性化合物，具有營養增補劑和食品著色劑的雙重功效。動物體內不能合成類胡蘿卜素，必須由食物提供，它是動物體內維生素A的重要來源，有補肝明目的作用，可治療夜盲癥。類胡蘿卜素也是一種抗氧化劑，進而防止老化和衰老引起的多種退化性疾病。同時，在抗癌、預防心腦血管疾病、白內障上有顯著的功效。類胡蘿卜素作為一種天然色素在畜牧業中越來越受到關注。類胡蘿卜素作在家禽沉積可以極大的提高屠體的外觀和蛋黃比色扇級數，改善蛋黃色澤。丙酮酸作為膳食補充劑，具有加速脂肪消耗、減輕體重、提高瘦肉率等功效；對心臟有特殊的保護作用，可增強心臟肌肉的效能，減少心臟病或心臟局部缺血造成的損傷；同時，丙酮酸具有吞噬體內自由基和抑制自由基的生成等顯著效果。利用膠紅酵母發酵生產蝦青素、類胡蘿卜素和β-葡聚糖具有營養價值簡單，培養周期短，成本低廉，菌體無毒且含有豐富的蛋白質的優點，具有重要的研究意義和開發前景。我國西南地區雨水充沛，空氣濕度大，氣候適宜環境微生物的生長，酵母菌種資源豐富，但紅酵母菌種資源挖掘有限。基于此，為了豐富膠紅酵母菌種資源庫，本專利技術旨在挖掘具有經濟價值的西南地區膠紅酵母菌種資源，研究其液體和固態發酵培養方法，將發酵產物應用于畜禽水產養殖業中。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種膠紅酵母TZR2014，該酵母富含氨基酸，可產類胡蘿卜素和丙酮酸，具有抗金黃色葡萄球菌，耐胃酸和膽鹽的作用，可應用于畜禽水產養殖。該菌株已于2015年9月24日送至中國典型培養物保藏中心保藏，分類命名：膠紅酵母(Rhodotorula muciladinosa)TZR2014，地址：中國武漢武漢大學，保藏編號：CCTCC NO：M 2015574。本專利技術的另一個目的在于提供了一種膠紅酵母TZR2014發酵液態培養物和固態培養物，本專利技術的發酵配方簡單，成本低廉。利用該發酵液發酵膠紅酵母TZR2014，可大量生產酵母菌種，培養物含高產量類胡蘿卜素和丙酮酸。本專利技術的最后一個目的在于提供了一種膠紅酵母TZR2014的應用，包括所述膠紅酵母的發酵液態培養物或固態培養物在畜牧水產養殖業中的應用。為了達到上述目的，本專利技術采取以下技術措施：膠紅酵母從重慶市柑橘研究所柚園的土壤中分離所得；該菌株已于2015年9月24日送至中國典型培養物保藏中心保藏，分類命名：膠紅酵母(Rhodotorula muciladinosa)TZR2014，保藏編號：CCTCC NO：M 2015574；地址：中國武漢武漢大學。菌落的形態特征：菌落呈圓形或卵圓形，粘稠狀，顏色為粉紅色，菌落大而厚，易于挑起，微光澤。膠紅酵母生理生化特征半乳糖蔗糖纖二糖棉籽糖山梨醇松三糖肌醇海藻糖++-+++-+乙酰胺甘露醇鼠李糖蜜二糖木糖核糖甘油阿拉糖-+--+++++：陽性；-：陰性一種膠紅酵母TZR2014液態發酵培養基，包括：葡萄糖3-5％，蛋白胨1-2％，酵母粉0.5-1.5％，pH6.0，其余為水，以上均為質量比。在以上所述方案中，優選的，液態發酵培養液的配方包括：葡萄糖5％，蛋白胨1％，酵母粉1.5％，其余為水，pH 6.0；此時膠紅酵母的生物量、丙酮酸和類胡蘿卜素產量達到最大。一種膠紅酵母TZR2014固態發酵培養基，包括：麩皮15-30％，豆粕6-8％，玉米粉1-3％，玉米漿3-5％，米糠2-4％，硫酸銨0.5-1％，磷酸氫二鉀0.03-0.08％，硫酸鎂0.08-0.12％，其余為自來水，以上均為質量比，所述的固態發酵培養基經121℃高溫蒸汽消毒20min，降溫至40℃即可接入膠紅酵母TZR2014。在以上所述方案中，優選的固態發酵培養基的配方包括：麩皮22.39％，豆粕7.31％，玉米粉2.32％，玉米漿4.00％，米糠3.12％，硫酸銨0.69％，磷酸氫二鉀0.053％，硫酸鎂0.103％，其余為自來水，pH6.0，以上均為質量比；在此配方下，膠紅酵母的生物量、丙酮酸和類胡蘿卜素產量達到最大。一種膠紅酵母TZR2014的應用，包括所述膠紅酵母的發酵液態培養物或固態培養物在畜牧水產養殖業中的應用，包括所述的膠紅酵母可用于制備抑制金黃色葡萄球菌的菌劑，用于畜禽類或水產類動物的飼料添加劑。與現有技術相比，本專利技術具有以下優點：1、已公布的膠紅酵母是從海洋中分所得，而本專利技術的膠紅酵母從柑橘研究所柑橘園土壤中分離所得，通過動物安全性試驗證實此種膠紅酵母無毒無副作用；2、本專利技術的膠紅酵母經發酵后，發酵液中類胡蘿卜素含量達36mg/L。3、本專利技術的膠紅酵母具有抗金黃色葡萄球菌，耐胃酸和膽鹽的作用。4、本專利技術固態發酵所得膠紅酵母還能產丙酮酸。而丙酮酸具有加速脂肪消耗、提高肌肉產量、吞噬體內自由基和抑制自由基的生成功能。5、固態發酵培養所用原料為畜禽水產飼料原料，成本低廉。培養物中含有豐富的必需氨基酸、類胡蘿卜素、丙酮酸，應用于動物產生能改善動物生長和產品品質。附圖說明圖1為實施例1中膠紅酵母菌落形態圖。圖2為實施例1中膠紅酵母細胞形態圖。具體實施方式本專利技術所述技術方案，如未特別說明，均為本領域的常規技術；所述試劑或材料如未特別說明，均來源于商業渠道。實施例1：菌種分離與鑒定菌株分離從重慶市柑橘研究所柑橘園采土壤100g，取10g的土樣于裝有100ml無菌水的250ml三角瓶中，在渦旋儀上振蕩后靜置片刻，取1ml的菌懸液與9ml的生理鹽水混勻，再取1ml的菌懸液與9ml的生理鹽水混勻，依次類推，設置不同的濃度梯度，梯度為10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，依次取200μl的菌懸液涂布接種于分離平板上，置于28℃培養2～3d，根據菌落形態挑取典型單菌落(菌落呈圓形或卵圓形，粘稠狀，顏色為粉紅色，菌落大而厚，易于挑起，微光澤)，通過鏡檢粗篩出膠紅酵母菌。PDA培養基：馬鈴薯20g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000ml，自然pH，115℃，滅菌20min。復篩及鑒定通過牛津杯抑菌試驗篩選對金黃色葡萄球菌(G+)致病菌生長抑制性能好的膠紅酵母，通過生理生化及26S rDNA D1/D2鑒定，最終篩選到一株產β-胡蘿卜素膠紅酵母菌，命名為RhodotorulamuciladinosaTZR2014。該細菌已于2015年9月24日送往中國典型培養物保藏中心進行保藏，分類命名：膠紅酵母(Rhodotorulamuciladinosa)TZR2014，地址：中國武漢武漢大學。TZR2014菌株具體有典型膠紅酵母的生理生化特征：該菌株在PDA培養基上繁殖生長形成的菌落為近圓形，粘稠狀，顏色為粉紅色，菌落大而厚，易于挑起，微光澤(圖1，圖2)。生理生化特征為：明膠液化。發酵半乳糖、蔗糖、葡萄糖、棉籽糖、山梨醇、松三糖、海藻糖、甘露醇、木糖、核糖、甘油和阿拉伯糖；果糖、和麥芽糖，不發酵纖二糖、肌醇、乙酰胺、鼠李糖和蜜二糖。最適溫度28～32℃，最高溫度50℃。至此，申請人或得了一株膠紅酵母，該菌株已于2015年9月24日送至中國典型培養物保藏中心保藏，本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種膠紅酵母，其特征在于：所述的膠紅酵母為：膠紅酵母（Rhodotorulamuciladinosa）TZR2014；保藏編號為：CCTCC?NO：M?2015574。

【技術特征摘要】
1.一種膠紅酵母，其特征在于：所述的膠紅酵母為：膠紅酵母（Rhodotorulamuciladinosa）TZR2014；保藏編號為：CCTCC NO：M 2015574。2.權利要求1所述膠紅酵母的液態發酵培養基，包括：葡萄糖3-5%，蛋白胨1-2%，酵母粉0.5 -1.5%，pH6.0，其余為水，以上均為質量比。3.權利要求1所述的的固態發酵培養基，包括：麩皮15-30%，豆粕6-8%，玉米粉1-3%，玉米漿3-5%，米糠2-4%，硫酸銨0.5-1%，磷酸氫二鉀0.03-0.08%，硫酸鎂0.08-0.12%，其余為自來水，...

【專利技術屬性】
技術研發人員：唐志如，毛俊霞，孫志洪，李貌，
申請(專利權)人：西南大學，
類型：發明
國別省市：重慶;50