一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑及其制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，通過鮑魚內(nèi)臟特含的褐藻酸酶和外加蛋白酶分別對(duì)廢棄海帶和鮑魚內(nèi)臟分步酶解，工藝簡(jiǎn)單、合理，變廢為寶，節(jié)能減排，并且無廢棄酸堿產(chǎn)生，有利于保護(hù)環(huán)境和可持續(xù)發(fā)展；得到的低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑，具有很好的抗氧化功能，同時(shí)人體易于吸收，可用作保健食品；利用鮑魚內(nèi)臟特有的褐藻酸酶這一天然資源，有效解決了褐藻酸不易降解為低聚糖醛酸的問題。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及食品添加劑和保健品領(lǐng)域，尤其涉及一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑及其制備方法。
技術(shù)介紹
低聚糖醛酸和多肽類物質(zhì)因其具有獨(dú)特的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，成為近年來食品添加劑和保健品領(lǐng)域十分活躍的研究課題。海帶是一種典型的低熱量、低脂肪、高礦物質(zhì)、高纖維的天然保健食品，在日常飲食中適量攝食，對(duì)人體健康十分有益。但在海帶加工過程中，大量的邊梢和根部無法利用，通常作為廢物丟棄，既浪費(fèi)資源，又造成環(huán)境污染。海帶中含有豐富的褐藻酸，其組成為甘露糖醛酸和古羅糖醛酸，當(dāng)其降解為低分子量的低聚糖醛酸時(shí)，顯示出較高的抗氧化性。鮑魚是海洋中的單殼軟體動(dòng)物，它肉質(zhì)鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富，是珍貴的海味。但在鮑魚加工過程中，大約有鮑肉1/3體積的內(nèi)臟因無法充分利用而被丟棄，導(dǎo)致資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。據(jù)報(bào)道，鮑魚胰腺是褐藻酸酶的獨(dú)特來源，褐藻酸酶能將褐藻酸降解為低聚糖醛酸，并且鮑魚內(nèi)臟降解后得到的多肽也具有較強(qiáng)的抗氧化性。胡博旸、聶瑩、孫路等(酸降解法制備褐藻寡糖抗氧化性的研究。中國(guó)釀造，2016，(9):51-05)從褐藻膠中提取出聚甘露糖醛酸和聚古羅糖醛酸，利用鹽酸降解聚甘露糖醛酸和聚古羅糖醛酸1h、2h和6h，分別制備了甘露糖醛酸組分(M1、M2和M3)以及古羅糖醛酸組分(G1、G2和G3)，并且以肌肽和甘露糖為對(duì)照，評(píng)估寡糖對(duì)于DPPH自由基、超氧自由基和羥自由基的清除作用。結(jié)果表明，甘露糖醛酸以及古羅糖醛酸對(duì)于DPPH自由基、超氧自由基具有良好的清除作用，且清除作用隨著寡糖中還原糖含量的增加而增加。在DPPH體系中，M3的清除效果要好于肌肽，G3的清除效果與肌肽相近。在超氧自由基體系中，M3的清除作用高于M2和M1，而G3的清除作用于略低于肌肽。
在羥自由基體系中，甘露糖醛酸和古羅糖醛酸的清除效果低于肌肽和甘露醇。實(shí)驗(yàn)表明，酸法制備的褐藻寡糖具有較強(qiáng)的抗氧化能力，且抗氧化效果與寡糖的平均聚合度含量有關(guān)。楊慧萍、童圣英、王子臣(皺紋盤鮑淀粉酶和褐藻酸酶的研究。水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1998，2(4)：345-351)利用分光光度計(jì)比色法測(cè)定了2-3cm的皺紋盤鮑的淀粉酶和褐藻酸酶的最適溫度和最適pH以及11種金屬離子對(duì)其的影響。結(jié)果表明：最適溫度分別為30℃和35℃，最適pH分別為6.24和7.19，皺紋盤鮑的三種主要消化酶的活性依次為：褐藻酸酶＞蛋白酶＞淀粉酶。Cu2+、Hg2+、Ag+、Pb2+對(duì)淀粉酶活性具有顯著的抑制作用，其他離子則具有促進(jìn)作用，其中又以Mn2+、Ba2+、Ca2+三種金屬離子尤為突出，其促進(jìn)作用比對(duì)照組高一倍以上；而對(duì)褐藻酸酶，Zn2+、Ag+、Hg2+、Li+、Ba2+具顯著的抑制作用，其他離子則沒有作用。吳永沛、何碧煙(九孔鮑褐藻酸酶、瓊脂酶及纖維素酶的提取純化。海洋科學(xué)，2002，26(3)：4-7)采用(NH4)2SO4分段鹽析和葡聚糖凝膠SephadexG-100柱層析純化技術(shù)，從九孔鮑內(nèi)臟器官中提取純化褐藻酸酶、瓊脂酶及纖維素酶。結(jié)果表明，在(NH4)2SO4分段鹽析純化中，褐藻酸酶和纖維素酶的最適分離飽和度為60％，而瓊脂酶為70％。分段鹽析的提純倍數(shù)為(以粗酶提取液為參照)褐藻酸酶13.3，瓊脂酶8.7和纖維素酶10.9。葡聚糖凝膠SephadexG-100層析分離過程中，褐藻酸酶、瓊脂酶和纖維素酶的比活力高峰分別出現(xiàn)在洗脫液的64,48和80ml處，提純倍數(shù)分別為褐藻酸酶80.9，瓊脂酶68.0及纖維素酶15.2。李瀟(褐藻酸寡糖的分離分析及其抗氧化活性的研究。西北大學(xué)碩士論文，2011)以褐藻酸多糖為原料，首先通過不完全酸水解和分級(jí)分離的方法獲得聚甘露糖醛酸和聚古羅糖醛酸兩個(gè)獨(dú)立的片段，并對(duì)其分別進(jìn)行酶解獲得均一的甘露糖醛酸寡糖混合物和均一的古羅糖醛酸寡糖混合物。采用強(qiáng)陰離子交換柱結(jié)合梯度洗脫裝置對(duì)寡糖混合物進(jìn)行分離，制備了相應(yīng)的寡糖單體。對(duì)得到的不同聚合度的單體進(jìn)行了分析，并對(duì)活性進(jìn)行了初步探究。中國(guó)專利技術(shù)專利ZL201110405288.7公開了一種鮑魚臟器自溶的處理方法。該方法得到的成品氨基態(tài)氮含量較高，提高了生產(chǎn)效率；而且成品腥苦味較弱，色澤好。它包括以下步驟：①將洗凈的鮑魚臟器斬拌攪碎為勻漿。②將鮑魚臟
器漿在常溫下進(jìn)行高壓脈沖電場(chǎng)處理。③加入少量食鹽，攪拌混勻。④采用紫外照射法對(duì)鮑魚臟器漿進(jìn)行處理。⑤采用高溫法使鮑魚臟器進(jìn)行自溶水解。中國(guó)專利技術(shù)專利ZL200510047409.X公開了一種鮑魚多糖的提取方法，將鮑魚去殼取肉(包括內(nèi)臟)，用組織搗碎機(jī)破壁，加水混合均勻于20-80℃浸提2-6h，離心分離，不溶物再次加水重復(fù)提取1-2次，上清液合并。濃縮提取液至含糖1.5-3.0％，加3-4倍體積的95％乙醇，0-4℃下醇沉12-16h，離心后真空法或噴霧法干燥得產(chǎn)品。提取還可以用加堿提取、超聲波提取、酶提取。酶提取可以用單一酶、雙酶、復(fù)合酶、自溶酶和復(fù)合法提取。酶為胃蛋白酶、胰蛋白酶等。中國(guó)專利技術(shù)專利ZL201110123164.X公開了一種鮑魚多糖的制備工藝，它包括以下步驟：①將洗凈的鮑魚肉或臟器打漿得到鮑魚預(yù)處理液，常溫下采用高壓脈沖電場(chǎng)處理；②采用殼聚糖對(duì)PEF處理后的鮑魚料液進(jìn)行絮凝除去粗蛋白，以提高多糖純度；③采用電滲析技術(shù)對(duì)預(yù)處理液進(jìn)行處理，有效脫去重金屬；④采用乙醇沉淀制備鮑魚多糖。中國(guó)專利技術(shù)專利ZL201110123172.4公開了一種分離純化鮑魚蛋白的方法，它的步驟是：①將洗凈后的鮑魚臟器，打漿后經(jīng)高壓脈沖電場(chǎng)處理，離心去除含有多糖和脂肪的上清液后得到鮑魚蛋白質(zhì)沉淀；②將從鮑魚臟器中分離出的蛋白，在食用酒精中洗滌后,離心取沉淀，重復(fù)洗脫多次。所采用的PEF細(xì)胞膜電穿孔技術(shù)結(jié)合乙醇脫色技術(shù)可有效提高蛋白質(zhì)得率和純度，并使所得到的蛋白質(zhì)不變性，質(zhì)量好。該蛋白可進(jìn)一步水解制備調(diào)味品或功能性保健品。吳靖娜(鮑內(nèi)臟肽粉的抗氧化活性研究。海南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2015，(2)：152-156)建立了酒精誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激小鼠模型，通過檢測(cè)模型組、對(duì)照組和各給藥組的小鼠血清和肝臟組織中的丙二醛(MDA)、蛋白質(zhì)羰基含量(PCO)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的變化來評(píng)價(jià)鮑魚內(nèi)臟肽粉(AVPP)的抗氧化活性。結(jié)果表明，長(zhǎng)期低濃度的酒精攝入可顯著提高小鼠的MDA和PCO含量，降低T-SOD和T-AOC活力(P<0.05)，對(duì)小鼠具有一定的氧化損傷作用，建模方式可行。AVPP可顯著降低模型小鼠的MDA和PCO含量，提高T-SOD、T-AOC、GSH和GSH-PX活力，對(duì)小鼠的氧化損傷可起到保護(hù)作用，具有較好的抗氧化
活性。目前這些關(guān)于降解褐藻酸或者分離純化鮑魚蛋白的報(bào)道，其制備過程復(fù)雜且制作成本較高。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)所要解決的技術(shù)問題是：提供一種簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)的技術(shù)方法，從廢棄海帶和鮑魚內(nèi)臟中有效提取出一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑。為了解決上述技術(shù)問題，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案為：一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，包括如下步驟：(1)將鮑魚內(nèi)臟加3-20倍體積的水，在勻漿機(jī)中于0-20℃條件下勻漿1-30min，使其呈漿狀；(2)將加工剩下的海帶根莖和碎屑粉碎，放入帶攪拌裝置本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：(1)將鮑魚內(nèi)臟加3?20倍體積的水，在勻漿機(jī)中于0?20℃條件下勻漿1?30min，使其呈漿狀；(2)將加工剩下的海帶根莖和碎屑粉碎，放入帶攪拌裝置的容器中，加入海帶原料1％?20％重量分?jǐn)?shù)的堿性物質(zhì)和5?80倍體積的水，浸泡10?90min，于40?90℃下攪拌0.5?3h，使其呈漿狀，冷卻至室溫；(3)將步驟(1)和(2)中所述的勻漿按1:10?1:100的體積比加入容器中混合，調(diào)節(jié)pH至6?8，升溫至30?50℃，反應(yīng)0.5?12h；(4)在步驟(3)反應(yīng)完成后的混合物中加入0.01％?1％重量分?jǐn)?shù)的蛋白酶，于20?70℃條件下繼續(xù)酶解0.5?12h；(5)去除殘?jiān)?，得到酶解液，并將酶解液濃縮干燥，得到粉末狀產(chǎn)物。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：(1)將鮑魚內(nèi)臟加3-20倍體積的水，在勻漿機(jī)中于0-20℃條件下勻漿1-30min，使其呈漿狀；(2)將加工剩下的海帶根莖和碎屑粉碎，放入帶攪拌裝置的容器中，加入海帶原料1％-20％重量分?jǐn)?shù)的堿性物質(zhì)和5-80倍體積的水，浸泡10-90min，于40-90℃下攪拌0.5-3h，使其呈漿狀，冷卻至室溫；(3)將步驟(1)和(2)中所述的勻漿按1:10-1:100的體積比加入容器中混合，調(diào)節(jié)pH至6-8，升溫至30-50℃，反應(yīng)0.5-12h；(4)在步驟(3)反應(yīng)完成后的混合物中加入0.01％-1％重量分?jǐn)?shù)的蛋白酶，于20-70℃條件下繼續(xù)酶解0.5-12h；(5)去除殘?jiān)?，得到酶解液，并將酶解液濃縮干燥，得到粉末狀產(chǎn)物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中海帶粉碎后的粒徑小于等于5mm。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)中的堿性物質(zhì)為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫銨中的一種或多種。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(3)中加入酸性物質(zhì)調(diào)節(jié)pH，所述酸性物質(zhì)為鹽酸、醋酸、檸檬酸、乳酸、蘋果酸中的一種或多種。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述的蛋白酶為胰蛋白酶、復(fù)合蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶中的一種或多種。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，其特征在于，所述步驟(5)中去殘?jiān)椒檫^濾或離心，濃縮方法為直接加熱濃縮、真空加熱濃縮、膜濃縮，干燥方法為冷凍干燥或噴霧干燥。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑的制備方法，其特征在于，所述低聚糖醛酸與多肽復(fù)合劑通過以下方法制備：(1)以鮑魚加工過程中產(chǎn)生的廢棄內(nèi)臟，加5倍體積水，加入勻漿機(jī)中，
\t于4℃下勻漿10min，使其呈漿狀；(2)將海帶加工過程中產(chǎn)生的碎屑粉碎成粒度≤5mm的顆粒，加入帶攪拌器的容器中，加入海帶原料質(zhì)量1％氫氧化鈉和10倍體積的水，浸泡30min...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：林斐，林麗欽，羅玉芳，陳益婷，林凱，林恒貴，陳麗華，王建偉，甘純璣，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：福建省恒祥漁業(yè)有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：福建;35