一種普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)及其制備方法技術(shù)方案

本發(fā)明專利技術(shù)提供一種普魯蘭多糖?全反式維甲酸載藥系統(tǒng)及其制備方法，該方法包括如下步驟：1）將普魯蘭多糖?肼凍干材料用水溶解，制得第一溶液；2）將全反式視黃醛與第一溶液混合，再加入異丙醇或二甲亞砜進行反應(yīng)，制得第二溶液；3）將第二溶液除去雜質(zhì)，冷凍干燥，制得普魯蘭多糖?全反式維甲酸材料；4）將阿霉素?納米金剛石復(fù)合物用水溶解，制得第三溶液；5）將步驟3）制得的普魯蘭多糖?全反式維甲酸材料溶于水中，制得第四溶液，將第三溶液與第四溶液混合進行反應(yīng)，制得第五溶液；6）將第五溶液超濾，制得普魯蘭多糖?全反式維甲酸載藥系統(tǒng)。本發(fā)明專利技術(shù)不僅實現(xiàn)了對阿霉素和全反式維甲酸的雙載藥，而且提高了載藥系統(tǒng)的穩(wěn)定性。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及藥物載體領(lǐng)域，特別是涉及一種負載阿霉素-納米金剛石的普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)及其制備方法。
技術(shù)介紹
近年來，納米載藥系統(tǒng)在惡性腫瘤的治療方面取得了長足的進步。目前應(yīng)用于臨床的紫杉醇-脂質(zhì)體(力樸素)、紫杉醇-白蛋白納米粒子(Abraxane)、阿霉素-脂質(zhì)體(凱萊)、G-CSF-聚乙二醇納米粒子(Lonquex)以及氟尿嘧啶-聚乳酸納米粒子(中人氟安)等納米載藥系統(tǒng)可在一定程度上提高藥物療效，減輕毒副作用。但是，當(dāng)實施納米載藥系統(tǒng)治療以后，腫瘤暫時得到抑制，之后往往再次復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。造成這一現(xiàn)象的主要原因在于現(xiàn)有納米載藥系統(tǒng)治療腫瘤普遍存在下列問題：1、大多數(shù)納米載藥系統(tǒng)穩(wěn)定性不足，進入體內(nèi)后造成納米載藥系統(tǒng)團聚或分散，團聚后粒徑過大很快被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除(大于150nm)；分散后粒徑過小(小于10nm)則通過外滲作用從組織中清除，導(dǎo)致治療效果不理想。2、納米載藥系統(tǒng)單一載藥進入體內(nèi)后難以高效殺滅生命力頑強的腫瘤細胞。YaniCui等人研究了一種具有還原敏感性的聚酰胺胺-聚乙二醇-聚精氨酸納米載藥系統(tǒng)[見“ACSappliedmaterialsinterfaces”，8卷2193-2203頁，(2016年)]，該系統(tǒng)粒徑較小，具有很好的體內(nèi)靶向性，但只負載阿霉素一種藥物，降低了其療效。3、納米載藥系統(tǒng)在治療過程中存在著腫瘤細胞耐藥性，腫瘤細胞能夠?qū)⑺幬锉贸黾毎猓瑢?dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的問題。
技術(shù)實現(xiàn)思路
鑒于以上所述現(xiàn)有技術(shù)的缺點，本專利技術(shù)的目的在于提供一種普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)及其制備方法，用于解決現(xiàn)有技術(shù)中用于治療腫瘤的載藥系統(tǒng)穩(wěn)定性差、療效欠佳等問題。為實現(xiàn)上述目的及其他相關(guān)目的，本專利技術(shù)第一方面提供一種普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)的制備方法，包括如下步驟：1)將普魯蘭多糖-肼凍干材料用水溶解，制得第一溶液；2)將全反式視黃醛與第一溶液混合，再加入異丙醇或二甲亞砜進行反應(yīng)，制得第二溶液；3)將第二溶液除去雜質(zhì)，冷凍干燥，制得普魯蘭多糖-全反式維甲酸材料；4)將阿霉素-納米金剛石復(fù)合物用水溶解，制得第三溶液；5)將步驟3)制得的普魯蘭多糖-全反式維甲酸材料溶于水中，制得第四溶液，將第三溶液與第四溶液混合進行反應(yīng)，制得第五溶液；6)將第五溶液超濾，制得所述普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)。進一步地，步驟1)中，每10mg普魯蘭多糖-肼凍干材料中加入1-3mL水。進一步地，步驟2)中，全反式視黃醛與第一溶液中普魯蘭多糖-肼凍干材料的質(zhì)量之比為(1-3)：5。全反式視黃醛的英文名稱：all-trans-Retinal；別名：VitaminAAIdehyde、維他命A醛；CAS：116-31-4；化學(xué)式：C20H28O。進一步地，步驟2)中，每mL第一溶液中加入0.2-0.6mL異丙醇或二甲亞砜。異丙醇或二甲亞砜可增加全反式視黃醛在水溶液中的溶解度。其作用是溶解全反式視黃醛，全反式視黃醛的加入量會直接影響異丙醇的加入量。異丙醇或二甲亞砜的加入量以剛好溶解完全反式視黃醛為宜，如果加入的異丙醇或二甲亞砜過多，阿霉素-金剛石將會從溶液中析出來，如果加入的異丙醇量過少，那么全反式視黃醛部分沒有溶解，進而會影響載藥量。因此，異丙醇或二甲亞砜的加入量存在一個臨界點，多加或少加都會帶來負面影響。進一步地，步驟3)中，第二溶液除去雜質(zhì)的方式為透析。進一步地，步驟4)中，所述第三溶液中阿霉素-納米金剛石復(fù)合物的濃度為10-15mg/mL。阿霉素-納米金剛石復(fù)合物是指載有阿霉素的納米金剛石。進一步地，步驟5)中，所述第四溶液中普魯蘭多糖-全反式維甲酸材料的濃度為5-10mg/mL。進一步地，步驟5)中，第三溶液中的阿霉素-納米金剛石與第四溶液中的普魯蘭多糖-全反式維甲酸的質(zhì)量比為(1-4)：1。本專利技術(shù)第二方面提供上述方法制得的普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)。本專利技術(shù)第三方面提供上述普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)在制備靶向治療腫瘤藥物中的用途。如上所述，本專利技術(shù)的一種普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)的制備方法，具有以下有益效果：1、利用普魯蘭多糖載體賦予納米載藥系統(tǒng)優(yōu)良的穩(wěn)定性，提高了靶向性；2、使用全反式維甲酸與阿霉素協(xié)同增效，提高阿霉素的抗腫瘤效果；3、引入納米金剛石物理吸附藥物，增加藥物在腫瘤細胞內(nèi)的滯留，克服耐藥性。本專利技術(shù)將改性天然普魯蘭多糖和納米金剛石作為載體，實現(xiàn)對阿霉素和全反式維甲酸的雙載藥，不僅保證了納米載藥系統(tǒng)在體內(nèi)穩(wěn)定、安全地將藥物靶向遞送到病灶部位，而且克服了腫瘤耐藥性，實現(xiàn)了對腫瘤的聯(lián)合給藥和協(xié)同治療。附圖說明圖1顯示為本專利技術(shù)實施例的普魯蘭多糖-全反式維甲酸材料的紅外圖。圖2顯示為本專利技術(shù)實施例的負載阿霉素-納米金剛石的普魯蘭多糖-全反式維甲酸納米粒子的粒徑分布圖。圖3顯示為本專利技術(shù)實施例的藥物在腫瘤細胞內(nèi)的分布圖。圖4顯示為本專利技術(shù)實施例的荷瘤鼠的死亡曲線圖。具體實施方式以下通過特定的具體實例說明本專利技術(shù)的實施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可由本說明書所揭露的內(nèi)容輕易地了解本專利技術(shù)的其他優(yōu)點與功效。本專利技術(shù)還可以通過另外不同的具體實施方式加以實施或應(yīng)用，本說明書中的各項細節(jié)也可以基于不同觀點與應(yīng)用，在沒有背離本專利技術(shù)的精神下進行各種修飾或改變。專利技術(shù)人在前期研究工作中，構(gòu)建的普魯蘭多糖納米載藥系統(tǒng)展現(xiàn)出優(yōu)異的穩(wěn)定性，以下實施例中的普魯蘭-肼凍干材料采用申請?zhí)枮?012100661842的專利文獻中的方法制得。載阿霉素-納米金剛石的制備方法詳見“NanodiamondTherapeuticeliveryAgentsMediateEnhancedChemoresistantTumorreatment，EdwardK.Chowetal.SciTranslMed3,73ra21(2011)”。實施例1一種普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)的制備方法，包括如下步驟：1)將100mg普魯蘭多糖-肼凍干材料(酰胺化普魯蘭多糖)用10mL去離子水溶解，常溫、磁力攪拌助溶，制得第一溶液；2)稱取20mg全反式視黃醛加入到第一溶液中，得到混合溶液，將2mL異丙醇逐滴滴入該混合溶液中，直至全反式視黃醛徹底溶解，在常溫、磁力攪拌下反應(yīng)12小時，制得第二溶液；3)將第二溶液用去離子水透析除去小分子雜質(zhì)，冷凍干燥，制得普魯蘭多糖-全反式維甲酸材料；4)將20mg載阿霉素-納米金剛石用2mL去離子水溶解，常溫、超聲助溶，制得第三溶液；5)將20mg普魯蘭多糖-全反式維甲酸材料溶于2mL水中，制得第四溶液，將第三溶液與第四溶液混合進行反應(yīng)，常溫、磁力攪拌2h，制得第五溶液；6)將第五溶液超濾，制得負載阿霉素-納米金剛石的普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)。實施例2一種普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)的制備方法，包括如下步驟：1)將100mg普魯蘭多糖-肼凍干材料(酰胺化普魯蘭多糖)用20mL去離子水溶解，常溫、磁力攪拌助溶，制得第一溶液；2)稱取40mg全反式視黃醛加入到第一溶液中，得到混合溶液，將7.8mL二甲亞砜逐滴滴入該混合溶液中，直至全反式視黃醛徹底溶解，在常溫、磁力攪拌下反應(yīng)12小時，制得第二溶液；3)將第二溶液用去離子水透析除去小分子雜質(zhì)，冷凍干燥，制得普魯蘭多糖-全反式維甲酸材料；4)將30mg載阿霉素-本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種普魯蘭多糖?全反式維甲酸載藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：1)將普魯蘭多糖?肼凍干材料用水溶解，制得第一溶液；2)將全反式視黃醛與第一溶液混合，再加入異丙醇或二甲亞砜進行反應(yīng)，制得第二溶液；3)將第二溶液除去雜質(zhì)，冷凍干燥，制得普魯蘭多糖?全反式維甲酸材料；4)將阿霉素?納米金剛石復(fù)合物用水溶解，制得第三溶液；5)將步驟3)制得的普魯蘭多糖?全反式維甲酸材料溶于水中，制得第四溶液，將第三溶液與第四溶液混合進行反應(yīng)，制得第五溶液；6)將第五溶液超濾，制得所述普魯蘭多糖?全反式維甲酸載藥系統(tǒng)。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：1)將普魯蘭多糖-肼凍干材料用水溶解，制得第一溶液；2)將全反式視黃醛與第一溶液混合，再加入異丙醇或二甲亞砜進行反應(yīng)，制得第二溶液；3)將第二溶液除去雜質(zhì)，冷凍干燥，制得普魯蘭多糖-全反式維甲酸材料；4)將阿霉素-納米金剛石復(fù)合物用水溶解，制得第三溶液；5)將步驟3)制得的普魯蘭多糖-全反式維甲酸材料溶于水中，制得第四溶液，將第三溶液與第四溶液混合進行反應(yīng)，制得第五溶液；6)將第五溶液超濾，制得所述普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于：步驟1)中，每10mg普魯蘭多糖-肼凍干材料中加入1-3mL水。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于：步驟2)中，全反式視黃醛與第一溶液中普魯蘭多糖-肼凍干材料的質(zhì)量之比為(1-3)：5。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的普魯蘭多糖-全反式維甲酸載藥系統(tǒng)的制備方...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李樺楠，李發(fā)琪，涂道月，黃楠，劉宏英，
申請(專利權(quán))人：重慶醫(yī)科大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：重慶;50