一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條及其制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條及其制備方法，包括以下原料：試紙基片一片，試紙吸附材料兩片，酶標(biāo)記抗體8?10份，透明底液6?8份，乙腈溶液15?20份，N?甲基咪唑溶液7?9份，三氟乙酸酐溶液9?11份。本發(fā)明專利技術(shù)通過采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法和檢測(cè)試紙條的結(jié)合，達(dá)到檢測(cè)速度快和攜帶方便的效果，適合于農(nóng)副市場(chǎng)以及小商販的販賣水產(chǎn)品過程中對(duì)水產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)，能夠避免購買者買到含有阿維菌素的水產(chǎn)品，保障了購買者的人身安全，并且通過采用乙腈、N?甲基咪唑和三氟乙酸酐的混合溶液以及檢測(cè)試紙條配合，達(dá)到能夠使用高效液相色譜法檢測(cè)水產(chǎn)品中阿維菌素的具體含量的效果，進(jìn)一步增大了檢測(cè)試紙的作用，使得檢測(cè)試紙的實(shí)用性增大。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及阿維菌素檢測(cè)
，具體為一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條及其制備方法。
技術(shù)介紹
阿維菌素是一種被廣泛使用的農(nóng)用或獸用殺菌、殺蟲和殺螨劑，也稱阿滅丁。阿維菌素類藥物屬于大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，它對(duì)絕大多數(shù)的寄生線蟲和節(jié)肢動(dòng)物均有很強(qiáng)的抑殺作用，成為廣泛使用的農(nóng)藥和獸藥。化學(xué)性質(zhì)：外觀為淡黃色至白色結(jié)晶粉末，無味。m.p.155～157℃，蒸氣壓2×10^-7Pa，相對(duì)密度1.16（21℃）。21℃時(shí)溶解度為：甲苯350g/L、丙酮100g/L、異丙醇70g/L、氯仿25g/L、乙醇20g/L、甲醇19.5g/mL、環(huán)己烷6g/L、煤油0.5g/L和水10μg/L。分配系數(shù)9.9×10^3。正常條件下穩(wěn)定，pH值5～9時(shí)不會(huì)水解。阿維菌素是由日本北里大學(xué)大村智等和美國Merck公司首先開發(fā)的一類具有殺菌、殺蟲、殺螨和殺線蟲活性的十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物，由鏈霉菌中阿維鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)生。我國20世紀(jì)80年代末由上海市農(nóng)藥研究所開發(fā)的從廣東揭陽土壤中分離篩選得到7051菌株，后經(jīng)鑒定證明該菌株與S.avermitilisMa-8460相似，與Avermectin的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同。1993年北京農(nóng)業(yè)大學(xué)新技術(shù)開發(fā)總公司立項(xiàng)研究并生產(chǎn)開發(fā)此藥。2007年以來，水稻上阿維菌素的大量推廣，給阿維菌素產(chǎn)品帶來了無限潛力。阿維防治水稻螟蟲，稻縱方面的優(yōu)異表現(xiàn)，成為替代高毒農(nóng)藥的新寵兒。與此同時(shí)，害蟲抗性的提高，阿維用藥量的不斷增加，各個(gè)廠家之間的低價(jià)格砸價(jià)和打壓市場(chǎng)。阿維菌素對(duì)螨類和昆蟲具有胃毒和觸殺作用，不能殺卵。作用機(jī)制與一般殺蟲劑不同的是干擾神經(jīng)生理活動(dòng)，刺激釋放γ-氨基丁酸，而氨基丁酸對(duì)節(jié)肢動(dòng)物的神經(jīng)傳導(dǎo)有抑制作用。螨類成蟲、若蟲和昆蟲幼蟲與阿維菌素接觸后即出現(xiàn)麻痹癥狀，不活動(dòng)也不取食，2～4天后死亡。因不引起昆蟲迅速脫水，所以阿維菌素致死作用較緩慢。阿維菌素對(duì)捕食性昆蟲和寄生天敵雖有直接觸殺作用，但因植物表面殘留少，因此對(duì)益蟲的損傷很小。阿維菌素在土內(nèi)被土壤吸附不會(huì)移動(dòng)，并且被微生物分解，因而在環(huán)境中無累積作用，可以作為綜合防治的一個(gè)組成部分。調(diào)制容易，將制劑倒入水中稍加攪拌即可使用，對(duì)作物亦較安全。但阿維菌素類藥物的過量使用使其在農(nóng)產(chǎn)品和動(dòng)物源性食品中高殘留，使人體產(chǎn)生抗藥性，對(duì)人體造成一定的危害，特別是對(duì)于水產(chǎn)品，會(huì)在魚類的肌肉中產(chǎn)生大量殘留，對(duì)于這種阿維菌素殘留的檢測(cè)，現(xiàn)有技術(shù)需要用到特定儀器和實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的操作，其檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)，難以快速得出結(jié)論，只適合用以科學(xué)實(shí)驗(yàn)和魚塘的產(chǎn)品檢驗(yàn)，而在于農(nóng)副市場(chǎng)以及小商販的販賣水產(chǎn)品過程中，水產(chǎn)品的安全難以得到保證，購買者的人身安全難以得到保障。因此，我們提出了一種能夠快速檢驗(yàn)阿維菌素和快速得出結(jié)果的檢測(cè)試紙條。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
（一）解決的技術(shù)問題針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本專利技術(shù)提供了一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條及其制備方法，解決了現(xiàn)有檢測(cè)速度慢以及不符合小眾即時(shí)消費(fèi)安全的問題。（二）技術(shù)方案為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)提供如下技術(shù)方案：一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條，包括以下原料：試紙基片一片；試紙吸附材料兩片；酶標(biāo)記抗體8-10份；透明底液6-8份；乙腈溶液15-20份；N-甲基咪唑溶液7-9份；三氟乙酸酐溶液9-11份。優(yōu)選的，所述試紙基片的長(zhǎng)度和寬度為8厘米和3厘米，并且試紙基片的一端為圓弧形，可供手指捏起，方便操作。優(yōu)選的，一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條，其制備方法包括以下步驟：S1、制備酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)試紙基體：首先將8-10份酶標(biāo)記抗體和6-8份透明底液導(dǎo)入同一容器內(nèi)，再將容器拿起進(jìn)行手動(dòng)震蕩，向容器內(nèi)加入一定量的對(duì)稱性納米磁粉，并通過玻璃棒以每分鐘120圈的轉(zhuǎn)速進(jìn)行攪拌，攪拌5分鐘后靜置2分鐘，待8-10份酶標(biāo)記抗體和6-8份透明底液均勻混合，再取一片試紙吸附材料，將混合均勻的溶液浸泡試紙吸附材料，浸泡一分鐘待其吸收飽和后，取出，通過鑷子夾住放在酒精燈的火焰外側(cè)烘烤，并來回移動(dòng)和翻轉(zhuǎn)，使其不在滴液并保持濕潤(rùn)后放到載玻片上，然后進(jìn)行干燥，待其完全干燥后，制得酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)試紙基體；S2、制備高效液相色譜法檢測(cè)試紙基體：首先將15-20份乙腈溶液、7-9份N-甲基咪唑溶液和9-11份三氟乙酸酐溶液分別制成三種衍生化試劑，分別是乙腈溶液和N-甲基咪唑溶液的等比例溶液、乙腈溶液和三氟乙酸酐溶液的等比例溶液和乙腈溶液，其中乙腈溶液和N-甲基咪唑溶液的等比例溶液和乙腈溶液和三氟乙酸酐溶液的等比例溶液需攪拌均勻，然后選取一片試紙吸附材料，第一步，將試紙吸附材料放入乙腈溶液中，進(jìn)行浸泡，待其吸收充分，取出，利用酒精燈初步烘干，再進(jìn)行噴霧干燥，第二步，將處理過第一步的試紙吸附材料再放入乙腈溶液和三氟乙酸酐溶液的等比例溶液中浸泡，待其吸收充分，取出，干燥，第三步，將處理過第一步和第二步的試紙吸附材料放入乙腈溶液和N-甲基咪唑溶液的等比例溶液中，進(jìn)行浸泡，待其吸收充分，取出，干燥，從而制得高效液相色譜法檢測(cè)試紙基體；S3、制備成品：將步驟S1和步驟S2中制得的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)試紙基體和高效液相色譜法檢測(cè)試紙基體均通過高分子粘合劑粘合在試紙基片的兩面，從而獲得成品。優(yōu)選的，所述步驟S1中容器拿起進(jìn)行手動(dòng)震蕩的時(shí)間為十秒。優(yōu)選的，所述步驟S1和步驟S2中的干燥方法均為先通過酒精燈進(jìn)行初步干燥，在進(jìn)行噴霧干燥。優(yōu)選的，一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條，其使用方法包括以下步驟：A1、首先取0.03g水產(chǎn)品的肉放在容器內(nèi)，然后將其搗碎，搗碎后加水?dāng)嚢瑁阑旌弦壕鶆驗(yàn)橹梗籄2、將檢測(cè)試紙條伸進(jìn)混合溶液中，等其反應(yīng)三分鐘，然后拿出，觀看酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)試紙基體上是否有藍(lán)色生成，有，則說明水產(chǎn)品中含有阿維菌素，否則，沒有；A3、將檢測(cè)試紙條上的高效液相色譜法檢測(cè)試紙基體使用特定的相色譜分析，采用外標(biāo)法定量，根據(jù)定量結(jié)果計(jì)算待測(cè)樣品中阿維菌素含量，可得出水產(chǎn)品中阿維菌素的含量。（三）有益效果本專利技術(shù)提供了一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條及其制備方法。具備以下有益效果：（1）、本專利技術(shù)通過采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法和檢測(cè)試紙條的結(jié)合，達(dá)到檢測(cè)速度快和攜帶方便的效果，適合于農(nóng)副市場(chǎng)以及小商販的販賣水產(chǎn)品過程中對(duì)水產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)，能夠避免購買者買到含有阿維菌素的水產(chǎn)品，保障了購買者的人身安全，并且使用方便，便于攜帶，操作簡(jiǎn)單。（2）、本專利技術(shù)通過采用乙腈、N-甲基咪唑和三氟乙酸酐的混合溶液以及檢測(cè)試紙條配合，達(dá)到能夠使用高效液相色譜法檢測(cè)水產(chǎn)品中阿維菌素的具體含量的效果，進(jìn)一步增大了檢測(cè)試紙的作用，使得檢測(cè)試紙的實(shí)用性增大。（3）、本專利技術(shù)通過在檢測(cè)試紙上融合酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法和高效液相色譜法，不僅能夠快速的檢測(cè)出水產(chǎn)品中是否含有阿維菌素，還能夠通過相色譜分析出水產(chǎn)品含有阿維菌素的具體量，不僅方便高效，還符合小眾即時(shí)消費(fèi)的安全。具體實(shí)施方式下面將結(jié)合本專利技術(shù)實(shí)施例，對(duì)本專利技術(shù)實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本專利技術(shù)一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。基于本專利技術(shù)中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本專利技術(shù)保護(hù)的范圍。本專利技術(shù)提供一種技術(shù)方案：一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條，包括以下原料本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條，其特征在于，包括以下原料：試紙基片一片；試紙吸附材料兩片；酶標(biāo)記抗體8?10份；透明底液6?8份；乙腈溶液15?20份；N?甲基咪唑溶液7?9份；三氟乙酸酐溶液9?11份。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條，其特征在于，包括以下原料：試紙基片一片；試紙吸附材料兩片；酶標(biāo)記抗體8-10份；透明底液6-8份；乙腈溶液15-20份；N-甲基咪唑溶液7-9份；三氟乙酸酐溶液9-11份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條，其特征在于：所述試紙基片的長(zhǎng)度和寬度為8厘米和3厘米，并且試紙基片的一端為圓弧形，可供手指捏起，方便操作。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種水產(chǎn)品中阿維菌素的檢測(cè)試紙條，其特征在于，其制備方法包括以下步驟：S1、制備酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)試紙基體：首先將8-10份酶標(biāo)記抗體和6-8份透明底液導(dǎo)入同一容器內(nèi)，再將容器拿起進(jìn)行手動(dòng)震蕩，向容器內(nèi)加入一定量的對(duì)稱性納米磁粉，并通過玻璃棒以每分鐘120圈的轉(zhuǎn)速進(jìn)行攪拌，攪拌5分鐘后靜置2分鐘，待8-10份酶標(biāo)記抗體和6-8份透明底液均勻混合，再取一片試紙吸附材料，將混合均勻的溶液浸泡試紙吸附材料，浸泡一分鐘待其吸收飽和后，取出，通過鑷子夾住放在酒精燈的火焰外側(cè)烘烤，并來回移動(dòng)和翻轉(zhuǎn)，使其不在滴液并保持濕潤(rùn)后放到載玻片上，然后進(jìn)行干燥，待其完全干燥后，制得酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)試紙基體；S2、制備高效液相色譜法檢測(cè)試紙基體：首先將15-20份乙腈溶液、7-9份N-甲基咪唑溶液和9-11份三氟乙酸酐溶液分別制成三種衍生化試劑，分別是乙腈溶液和N-甲基咪唑溶液的等比例溶液、乙腈溶液和三氟乙酸酐溶液的等比例溶液和乙腈溶液，其中乙腈溶液和N-甲基咪唑溶液的等比例溶液和乙腈溶液和三氟乙酸酐溶液的等比例溶液需攪拌均勻，然...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：周合，張根義，張進(jìn)，周朱晨，胡彬，吳念綺，楊敏，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：百奧森江蘇食品安全科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：江蘇;32