枳殼揮發油提取物作為制備抗抑郁藥物的應用，所述枳殼揮發油提取物從枳殼藥材中提取，主要成分為檸檬烯。所述枳殼揮發油提取物的提取工藝為：取枳殼藥材，浸泡1～3h，采用水蒸氣蒸餾法，加6～10倍體積的水提取5～9h即得。優選工藝為：取枳殼藥材，浸泡3h，采用水蒸氣蒸餾法，加8倍體積的水提取7h，即得。所述枳殼揮發油提取物可以制備成多種制劑，并可添加藥學上可接受的輔料及載體應用于臨床抗抑郁新藥的開發。本發明專利技術提供的枳殼揮發油提取物作為制備抗抑郁藥物的應用，通過體外藥效實驗，證明枳殼揮發油提取物對缺氧損傷SH-SY5Y神經細胞具有保護作用，具有顯著的抗抑郁作用，為抗抑郁方面的新藥開發奠定基礎。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及中醫藥
，尤其涉及枳殼揮發油提取物作為制備抗抑郁藥物的應用。
技術介紹
抑郁癥是一種以持續精神低落為主要癥狀的精神情志障礙性疾病。臨床對抑郁癥的治療主要依靠西藥抗抑郁劑，并輔助以心理治療，但此治療方法存在起效慢、療程長、副作用大、藥價昂貴等缺點。近年來，中醫藥在治療抑郁癥實驗研究方面取得了豐富的經驗和較好的療效。經大量文獻調研可知，許多中藥復方、單味藥及中藥活性成分均具有抗抑郁作用。因此，近年來中醫中藥在抑郁癥的治療方面日益被人們所關注。枳殼最早載于《神農本草經》，列為中品。枳殼為蕓香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培變種的干燥未成熟果實，性微寒，味苦、辛、酸，入肺、脾、大腸經。功能理氣寬中，行滯消脹。主治胸肋氣滯、脹滿疼痛、食積不化、痰飲內停、胃下垂等。枳殼類藥材化學成分比較復雜，目前枳殼藥材中已知的成分主要包括揮發油、黃酮類、香豆素類和生物堿等成分。枳殼揮發油中所含的主要化合物為檸檬烯，能夠顯著抑制胃腸平滑肌收縮，也具有一定的鎮痛、抗菌、中樞抑制及溶膽石作用。目前，針對枳殼揮發油抗抑郁癥的研究未見報道。體外細胞實驗，由于細胞直接來源于機體組織，生物性狀尚未發生大的變化，在一定程度上能夠反映體內的狀態，具有操作簡便、周期短、節約成本等優勢，廣泛應用于藥效學研究領域。SH-SY5Y細胞（神經母細胞瘤細胞）在抗抑郁、治療帕金森病等神經系統疾病研究方面應用較為普遍，SH-SY5Y細胞氧化損傷模型常用于抗抑郁藥物的篩選研究。
技術實現思路
針對上述問題，本專利技術提供一種枳殼揮發油提取物作為制備抗抑郁藥物的應用，該揮發油提取物從枳殼藥材中提取，對缺氧損傷SH-SY5Y神經細胞具有較好的保護作用，可應用于抑郁癥的治療研究。為實現本專利技術的上述目的，本專利技術提供枳殼揮發油提取物作為制備抗抑郁藥物的應用，所述枳殼揮發油提取物的主要成分為檸檬烯。所述枳殼揮發油提取物的提取工藝為：取枳殼藥材，浸泡1～3h，采用水蒸氣蒸餾法，加6～10倍重量的水提取5～9h，即得。所述枳殼揮發油提取物的提取工藝為：取枳殼藥材，浸泡3h，采用水蒸氣蒸餾法，加8倍重量的水提取7h，即得。所用的枳殼為蕓香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培變種的干燥未成熟果實。所述枳殼揮發油提取物能制備多種制劑，并可添加藥學上可接受的輔料及載體應用于臨床抗抑郁新藥的開發。藥物劑型可以為：糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、蜜丸劑、散劑、丹劑、注射劑、栓劑、硬膏劑、糖漿劑、針粉劑或緩釋膠囊劑等。與現有技術相比本專利技術的有益效果。本專利技術提供的枳殼揮發油提取物作為制備抗抑郁藥物的應用，通過體外藥效實驗，證明枳殼揮發油提取物有顯著的抗抑郁作用，為該藥物抗抑郁方面的新藥開發奠定基礎。具體實施方式下面結合具體實施例進一步詳細說明本專利技術，但不應將此理解為本專利技術上述主題的范圍僅限于下述的實施例，凡基于本專利技術上述內容實現的技術均屬于本專利技術的范圍。一實驗材料。1實驗細胞株。人骨髓神經母細胞瘤細胞株SH-SY5Y（購自中國科學院上海生命科學研究院細胞資源中心）。2藥材與試劑。鹽酸帕羅西汀片（中美史克，批號：13030713）；枳殼藥材（由遼寧華潤本溪三藥有限公司提供）；DMEM/F12培養基（美國GIBCO公司）；胎牛血清（FCS）（杭州四季青生物工程材料有限公司）；水為超純水。3儀器與設備。USAUTOFLOW型CO2培養箱（德國NUAIRE公司）；AE31型倒置相差顯微鏡（Motic公司）；SUNRISE酶標儀（瑞士TECAN公司）；LEGENDMICRO17R型低溫高速離心機（ThermoFisherScientific）。二實驗方法與結果。1枳殼揮發油提取工藝研究：取枳殼藥材，精密稱取50.0g，采用水蒸氣蒸餾法，按下述條件進行提取試驗。1.1正交試驗設計。選取浸泡時間、加水倍數、提取時間三個因素，對主要影響因素各取三個水平，進行L9(34)正交試驗考察。以揮發油得率為考察指標，優選其最佳提取工藝。正交試驗L9（34）因素水平表見表1，正交試驗設計表及直觀分析結果見表2，方差分析結果見表3。表1因素水平表。表2正交實驗設計表及直觀分析結果。表3以揮發油為指標正交試驗方差分析。注：F0.05＝19.00；*為P＜0.05。以揮發油含量為指標，直觀分析及方差分析影響枳殼揮發油提取工藝的因素順序為A>B>C，篩選出最佳提取條件為A2B2C3，即浸泡3h，加8倍量的水提取7h。2藥物活性研究。2.1實驗方法：（1）MTT法藥效檢測。取對數生長期、生長狀態良好的SH-SY5Y細胞，經PBS清洗，用0.25%胰蛋白酶消化，待細胞趨于變圓用含15%進口胎牛血清的DMEM培養液沖洗吹打細胞，制成單細胞懸液。以每毫升1×105個細胞接種于96孔培養板中，每孔100μL（除空白調零孔外），將培養板置于CO2培養箱中繼續培養，24h后模型組和給藥組加入含H2O2（終濃度為100μmol·L-1）的PBS溶液，構建氧化損傷抑郁模型，空白對照組加無H2O2的PBS溶液，造模2h后空白對照組和模型組加入含10%血清的培養基100μL培養，各給藥組分別加入含10%血清的含藥培養基100μL。設空白調零組（只加培養基，酶標儀調零用）、空白對照組、模型組（只加細胞）、枳殼揮發油組和鹽酸帕羅西汀組,設5個復孔。在37℃、5%CO2培養箱中繼續培養24h后，每孔吸取細胞上清液50μL，置-20℃保存，留作測試劑盒用，每孔補加50μL培養液，繼續培養3h，每孔加入20μL（5mg/mL）MTT，繼續培養4h后吸凈孔內上清液，每孔加入150μLDMSO用酶標儀振搖10min，使紫色結晶完全溶解，在492nm處掃描，測定吸光值（OD），結果見表4。其中存活率=OD試驗組均值/OD空白對照組均值×100％。表4枳殼揮發油對SH-SY5Y神經細胞的保護作用。組別給藥濃度（mg·mL-1）OD值（s）存活率（%）空白對照組-1.0732±0.0845100模型組-0.6184±0.0655**57.62枳殼揮發油組0.50.7954±0.0306#74.11鹽酸帕羅西汀0.010.8530±0.1132##79.48注：與空白組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，#P<0.05，##P<0.01。由表4可知，枳殼揮發油對SH-SY5Y神經細胞有很好的保護作用，其作用效果等效于鹽酸帕羅西汀，證明枳殼揮發油具有較強的抗抑郁作用，可以開發為以枳殼揮發油為原料的中藥抗抑郁藥物，便于臨床制成不同劑型給藥，擴大了枳殼的應用范圍，為其抗抑郁新藥的開發提供理論依據。本文檔來自技高網...
【技術保護點】
枳殼揮發油提取物用于治療抑郁癥。
【技術特征摘要】
1.枳殼揮發油提取物用于治療抑郁癥。
2.如權利要求1所述的枳殼揮發油提取物，其特征在于，所述枳殼揮發油提取物從枳殼藥材中提取，主要成分為檸檬烯。
3.如權利要求1所述的枳殼揮發油提取物，其特征在于，所述枳殼揮發油提取物的提取工藝為：取枳殼藥材，浸泡1～3h，采用水蒸氣蒸餾法，加6～10倍量的水提取5～9h，即得本發明枳殼揮發油提取物。
4.如權利要求3所述的枳殼揮發油提取物，其特征在于，所述枳殼揮發油提取物的提取工藝為：取枳殼藥材，浸泡3h，采用水蒸氣蒸餾法，加8倍量的水提取7h，即得本發明枳殼揮發油提取物。
5.如權利要求2所述...
【專利技術屬性】
技術研發人員：孟憲生，包永睿，王帥，張麗敏，李天嬌，
申請(專利權)人：遼寧中醫藥大學，
類型：發明
國別省市：遼寧;21
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