一種組蛋白甲基化酶EZH2抑制劑中間體的合成方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種組蛋白甲基化酶EZH2抑制劑的中間體I的合成方法，該方法以化合物1為原料，經(jīng)過還原、磺酰化、取代和水解得到化合物I，該反應(yīng)操作簡(jiǎn)單，后處理方便，中間不需要純化，總收率高，環(huán)境友好，反應(yīng)原料簡(jiǎn)單易得，適合工業(yè)生產(chǎn)。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及一種組蛋白甲基化酶EZH2(enhancerofzestehomolog2)抑制劑的中間體的合成方法，屬于有機(jī)合成領(lǐng)域。
技術(shù)介紹
組蛋白甲基化酶EZH2是PcG蛋白復(fù)合體的主要成份，是H3K27甲基化催化酶，它與組蛋白甲基化修飾有關(guān)，通過與其他PcG蛋白形成polycomb抑制復(fù)合物(PRC)而發(fā)揮轉(zhuǎn)錄抑制作用，在胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化和腫瘤發(fā)生中具有重要作用。EZH2具有DNA甲基轉(zhuǎn)移酶、組蛋白去乙酰化酶的調(diào)控作用，參與靶基因的轉(zhuǎn)錄抑制并促進(jìn)細(xì)胞的增殖，且其參與的基因沉默機(jī)制與DNA甲基轉(zhuǎn)移酶參與的基因沉默機(jī)制及組蛋白的乙?；揎棿嬖诮换プ饔?。在腫瘤細(xì)胞中EZH2為一個(gè)專門高度沉默包括抑癌基因在內(nèi)的一系列靶基因的轉(zhuǎn)錄抑制因子。EZH2可激活干細(xì)胞特異基因及調(diào)控很多抑癌基因如p16、p27和BRCA18。EZH2在多種腫瘤組織中高表達(dá)，如前列腺癌、乳腺癌、膀胱癌、大腸癌、肝細(xì)胞癌、淋巴瘤等，并發(fā)現(xiàn)EZH2表達(dá)增高與腫瘤的進(jìn)展及預(yù)后相關(guān)。這就提示其可能成為一種新的腫瘤標(biāo)志物，同時(shí)成為基因治療的新靶點(diǎn)。其中，代表性的化合物CPI169的R型異構(gòu)體具有較好的生物活性，能抑制PRC2的催化活性，IC50<1nM，還能降低H3K27me3細(xì)胞水平，EC50為70nM?；衔颕(結(jié)構(gòu)如下式所示)與3-(氨基甲基)-4-甲氧基-6-甲基吡啶-2(1H)-酮鹽酸鹽通過常規(guī)縮合方法可制備EZH2抑制劑CPI169、CPI360及其類似化合物。其中，Z為NH、NBoc、O、S、SO2。對(duì)于化合物I的合成方法的報(bào)道較少，WO2014124418A1，WO2015010078A2，WO2015023915A1以及organicletters,2014(16),4114-4117中公開的方法(如下式所示)，均以I-6為起始原料制備化合物I，其中化合物I-3的制備需使用格氏試劑，反應(yīng)體系要求苛刻，且產(chǎn)品手性選擇性不高，需要通過進(jìn)一步的拆分純化以得到單一構(gòu)型的化合物I-2，但純化收率低，以(R)-叔丁基4-(1-氨基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的純化為例，通過與扁桃酸成鹽再游離的方法進(jìn)行單一手性化合物的富集，但純化收率僅44％；由化合物I-2制備化合物I-1時(shí)，需要使用價(jià)格昂貴、不易得的釕或鈀金屬催化劑，使得化合物I的合成成本大大提高，且反應(yīng)條件苛刻，需惰性氣體條件下110℃攪拌12小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后需要通過硅膠柱層析色譜分離方法對(duì)化合物I進(jìn)行分離純化，不利于工藝放大。因此需要開發(fā)一種化合物I的新的合成方法，本專利給出的方法路線短、操作簡(jiǎn)單，收率高，ee值高、安全性好，環(huán)境友好，成本低，有利于工藝化生產(chǎn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供一種下面通式(I)所述化合物的合成方法。其中，Z為NH、NBoc、O、S、SO2。本專利技術(shù)所述化合物I的合成方法可以用以下流程表示：其中，Z的定義如前。更具體的，本專利技術(shù)的制備方法包含如下過程：1)步驟1：在有機(jī)溶劑中，化合物1通過還原得到化合物2；所述還原劑可選自(R)-2-甲基-CBS-惡唑硼烷，(S)-2-甲基-CBS-惡唑硼烷，(R)-MeCBS-硼烷二甲硫醚，(S)-MeCBS-硼烷二甲硫醚，二氯雙(4-甲基異丙基苯基)釕-(±)-2,2'-二(二-對(duì)甲苯基膦)-1,1'-聯(lián)萘，二氯化釕-1,1'-聯(lián)萘-2,2'-雙二苯膦，硼氫化鈉、硼氫化鋰、四氫鋰鋁、鈀/碳，氫氧化鈀/碳，鉑/碳，氧化鉑，鉑/三氧化二鋁，二乙基苯胺硼烷，硼烷二甲硫醚中的一種或多種，優(yōu)選(R)-MeCBS-硼烷二甲硫醚、(S)-MeCBS-硼烷二甲硫醚。所述還原劑與化合物1的摩爾比為0.1～2:1。所述反應(yīng)使用的溶劑為甲醇、乙醇、四氫呋喃，甲苯中的一種或多種，優(yōu)選四氫呋喃；所述的反應(yīng)時(shí)間以檢測(cè)反應(yīng)完成為止；所述的反應(yīng)溫度為-10～35℃。2)步驟2：化合物2與甲基磺酰氯在堿性條件下，得到化合物3；所述反應(yīng)可以為本領(lǐng)域此類反應(yīng)的常規(guī)方法和條件，所述的堿可選自三乙胺，N,N-二異丙基乙胺，吡啶，4-二甲氨基吡啶二異丙胺，碳酸鈉，碳酸鉀，碳酸氫鈉，碳酸氫鉀，氫氧化鈉，氫氧化鉀，鈉氫中的一種或多種，優(yōu)選三乙胺。所述的反應(yīng)時(shí)間以檢測(cè)反應(yīng)完成為止。3)步驟3：化合物3和化合物4通過親核取代制備化合物5；所述的親核取代方法和條件可以為本領(lǐng)域此類反應(yīng)的常規(guī)方法和條件，所述的堿可選自鈉氫，二(三甲基硅基)氨基鋰，碳酸鉀，碳酸鈉，碳酸銫中的一種或多種，所述的溶劑為N,N-二甲基甲酰胺，N,N-二甲基苯胺的一種或兩種。所述反應(yīng)溫度為80～130℃，優(yōu)選100～120℃。所述的反應(yīng)時(shí)間以檢測(cè)反應(yīng)完成為止。所述化合物4可以由市場(chǎng)得到，或者參考OrganicLetters,2013,15(2),362-365中所示方法制得。4)步驟4：化合物5水解制備化合物I；所述的親核取代方法和條件可以為本領(lǐng)域此類反應(yīng)的常規(guī)方法和條件。本專利技術(shù)方法的優(yōu)點(diǎn)主要在于：1.公開了一類制備組蛋白甲基化酶EZH2抑制劑關(guān)鍵中間體I的合成方法，其中，Z為NH、NBoc、O、S、SO2；2.中間體I由化合物1通過還原、磺酰化、取代、水解反應(yīng)方便的得到，該反應(yīng)操作簡(jiǎn)單，后處理方便，中間不需要純化，并且四步反應(yīng)收率高達(dá)73％；3.通過手性還原化合物1得到高e.e.值的化合物2(e.e.值>92％)，以達(dá)到對(duì)關(guān)鍵中間體I的手性控制；4.該方法反應(yīng)操作簡(jiǎn)單、環(huán)境友好，反應(yīng)原料簡(jiǎn)單易得，適合工業(yè)生產(chǎn)；本方法是一條全新的可工業(yè)化的合成路線。同時(shí)，該路線對(duì)開發(fā)新的組蛋白甲基化酶抑制劑具有很好的方法學(xué)意義。具體實(shí)施例下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本專利技術(shù)。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本專利技術(shù)而不用于限制本專利技術(shù)的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件進(jìn)行。實(shí)施例中所用的原料或試劑除特別說明之外，均市售可得。實(shí)施例中所述的室溫均指20-35℃。除非特別指出，所述的試劑不經(jīng)純化直接使用。所有溶劑均購(gòu)自商業(yè)化供應(yīng)商，例如奧德里奇(Aldrich)，并且不經(jīng)處理就可使用。反應(yīng)通過TLC分析和/或通過LC-MS分析，通過起始材料的消耗來判斷反應(yīng)的終止。分析用的薄層層析(TLC)是在預(yù)涂覆硅膠60F2540.25毫米板的玻璃板(EMD化學(xué)品公司(EMDChemicals))上進(jìn)行的，用UV光(254nm)和/或硅膠上的碘顯象，和/或與TLC染色物如醇制磷鉬酸、水本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種組蛋白甲基化酶EZH2抑制劑中間體化合物I的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：步驟1，有機(jī)溶劑中，化合物1通過還原得到化合物2；步驟2，化合物2與甲基磺酰氯在堿性條件下反應(yīng)，得到化合物3；步驟3，有機(jī)溶劑中，化合物3和化合物4通過親核取代得到化合物5；步驟4，化合物5水解制備化合物I；其中Z為NH、NBoc、O、S、SO2。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種組蛋白甲基化酶EZH2抑制劑中間體化合物I的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟1，有機(jī)溶劑中，化合物1通過還原得到化合物2；
步驟2，化合物2與甲基磺酰氯在堿性條件下反應(yīng)，得到化合物3；
步驟3，有機(jī)溶劑中，化合物3和化合物4通過親核取代得到化合物5；
步驟4，化合物5水解制備化合物I；
其中Z為NH、NBoc、O、S、SO2。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1中，所述還原反應(yīng)使用還原劑可選自(R)-2-甲基-CBS-惡唑硼烷，(S)-2-甲基-CBS-惡唑硼烷，(R)-MeCBS—硼烷二甲硫醚，(S)-MeCBS—硼烷二甲硫醚，二氯雙(4-甲基異丙基苯基)釕-(±)-2,2'-二(二-對(duì)甲苯基膦)-1,1'-聯(lián)萘，二氯化釕—1,1'-聯(lián)萘-2,2'-雙二苯膦，硼氫化鈉、硼氫化鋰、四氫鋰鋁、鈀/碳，氫氧化鈀/碳，鉑/碳，氧化鉑，鉑/三氧化二鋁，二乙基苯胺硼烷，硼烷二甲硫醚中的一種或多種。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1中，所述反應(yīng)使用的溶劑為甲醇、乙醇、四氫呋喃，甲苯中的一種或多種。
4.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟1中，所述還原劑選自(R)-MeCBS—硼...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王廣勇，李朝平，周治國(guó)，高強(qiáng)，鄭保富，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：上海皓元生物醫(yī)藥科技有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：上海;31