一種胺苯吡唑酮殘留量的GC-EI-MS測定方法技術

本發明專利技術公開了一種胺苯吡唑酮殘留量的GC?EI?MS測定方法，該方法主要用于測定糧谷、動物源性食品等復雜基質食品農產品中殘留的胺苯吡唑酮含量的方法。用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均質提取樣品中殘留的胺苯吡唑酮，C18/PSA固相萃取柱凈化濃縮后，氣相色譜?電子轟擊離子源?質譜（GC?EI?MS）檢測，采用不含待測農藥的空白基質溶液建立校正的標準工作曲線，外標法定量。本方法平均回收率為90.5%～94.7%，平均相對標準偏差（RSD）為5.9%～8.9%，檢出限低于2.14?μg/kg，具有操作簡便、快速、去雜效果好、靈敏度高、特征性強、重復性好、定性定量準確的優點。能滿足美國、歐盟、日本等國家對相應產品安全檢測的技術要求，為保障我國人民食品安全及對外出口貿易健康發展提供有力的技術支撐。

A method for the determination of GC-EI-MS residue in the determination of n

The invention discloses a benzene amine pyrazolone residue GC EI MS determination method, the main method for the determination method of residual grain, animal food and other food and agricultural products in the complex matrix of benzene amine pyrazolone content. Homogenized with acetonitrile or acetonitrile containing 1% acetic acid extraction of benzene amine pyrazolone remaining in the sample, purified and concentrated C18/PSA SPE column, gas chromatography electron ionization mass spectrometry (GC EI MS) detection, by excluding the measured blank matrix solution of pesticides to establish the calibration of the standard working curve, external standard method. The average recovery rate was 90.5% ~ 94.7%, the average relative standard deviation (RSD) ranged from 5.9% to 8.9%, the detection limit of less than 2.14 mu g/kg, has the advantages of convenient operation, rapid, high sensitivity, good purification effect, strong characteristics, good repeatability, accurate qualitative and quantitative. To meet the United States, the European Union, Japan and other countries on the corresponding product safety testing technical requirements, in order to protect the people's food safety and the healthy development of foreign trade exports to provide strong technical support.

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種胺苯吡唑酮殘留量的GC-EI-MS測定方法，更具體地說是采用氣相色譜-電子轟擊離子源-質譜(GC-EI-MS)定性定量測定糧谷、豬肉、牛肉、羊肉、雞肉等動物肌肉及制品等復雜基質的動植物源性食品中殘留的胺苯吡唑酮含量的方法，屬于農藥殘留量的測定

技術介紹
胺苯吡唑酮(Fenpyrazamine)是日本住友化學株式會社研究開發的基于吡啶的雜環類殺真菌劑，通過抑制麥角甾醇生物合成途徑的作用機制的病原體，顯示出對菌絲生長和孢子萌發和花粉管生長的抑制作用。CAS號為：473798-59-3，分子式為C17H21N3O2S，分子量為331.43，胺苯吡唑酮的化學結構式如下：胺苯吡菌酮是住友化學獨立開發的新殺菌劑，具有新穎化學結構，能迅速滲入作物體內，對感染的真菌能快速發揮藥效，主要用于控制葡萄、石果、蔬菜作物中的灰霉病、菌核病和鏈核盤菌。另外，胺苯吡菌酮對哺乳類動物高度安全，在環境中能迅速降解，可在多種作物采收前應用。胺苯吡菌酮最初在韓國推出，在胺苯吡菌酮原藥獲得第一個全球登記后，住友化學又在韓國推出其含胺苯吡菌酮原藥的殺菌劑新品，并以Botrycide商標名進行銷售，該產品為30％的懸浮劑型，用于水果和蔬菜作物。2009年，住友化學于申請歐盟登記用于溫室栽培的西紅柿、茄子、辣椒和葫蘆等蔬菜作物，還有葡萄的田間應用，但當時僅在波蘭獲得為期三年的臨時登記，商品名為Prolectu。2012年6月，歐盟食品與動物健康常務委員會已投票通過了其登記申請，胺苯吡菌酮已經獲得歐盟批準登記，將于2013年1月1日起正式列入歐盟農藥1107/2009法規下的已登記有效成分名單，有效期為十年。胺苯吡菌酮在歐盟取得登記后，將用于葡萄和一些溫室作物，如番茄、茄子、辣椒和葫蘆等。胺苯吡菌酮對葡萄孢菌具有優異防控能力，住友化學將進一步于2012/13年度向意大利和智利市場推廣該產品，其全球商品名為Prolectus。現已在美國和很多亞洲國家進行了登記，具有很廣闊的應用前景。隨著胺苯吡唑酮的登記、推廣和使用，作為我國主要出口市場的歐盟、美國、加拿大等國家制定了其在蔬菜、水果、糧谷和畜產品等食品農產品中的最大允許殘留量(MRL)，歐盟制定殺菌劑胺苯吡菌酮在多種作物上的最大殘留限量標準。該標準已于2012年5月7日生效。胺苯吡菌酮在馬鈴薯、辣椒、茄子中的最大殘留限量為3mg/kg；在葫蘆、黃瓜、小黃瓜、綠皮南瓜中的最大殘留限量為0.7mg/kg；在柑橘、葡萄柚、檸檬等水果及各種干果中的殘留限量最為嚴格，為0.01mg/kg。美國規定胺苯吡唑酮在杏仁中的最大殘留限量為0.02mg/kg；在杏仁外殼中的最大殘留限量為1.5mg/kg；在開心果中的最大殘留限量為0.02mg/kg；在萵苣頭中的最大殘留限量為1.5mg/kg；在萵苣葉中的最大殘留限量為2mg/kg；在蔓越莓亞組13-07A中的最大殘留限量為5mg/kg；在灌木漿果類亞組13-07B中的最大殘留限量為5mg/kg；在小型蔓生水果13-07F亞組中(除獼猴桃外)的最大殘留限量為3mg/kg；在葡萄汁中的最大殘留限量為4mg/kg；在矮生漿果類亞組13-07G中的最大殘留限量為3mg/kg；在人參中的最大殘留限量為0.7mg/kg。加拿大規定胺苯吡唑酮在葡萄汁、生菜、萵苣、人參根、杏仁堅果、開心果中的MRL分別為4.0mg/kg、2.0mg/kg、1.5mg/kg、0.7mg/kg和0.02mg/kg；歐盟、日本等國家規定沒有制定相應農藥的殘留限量標準時，出口至其國家的食品農產品包括畜禽肉等動物源性食品中殘留限量均實行0.01mg/L的“一律標準”。現階段，對胺苯吡唑酮殘留量測定方法的研究較少，報道的檢測方法主要為蔬菜和水果中胺苯吡唑酮殘留檢測方法，這些檢測方法均采用液相色譜串聯質譜(LC-MS/MS)測定蔬菜和水果中胺苯吡唑酮殘留量的檢測方法，使用LC-MS/MS測定食品農產品中農藥殘留具有快速、簡便、靈敏度高等優點，但由于其價格較昂貴，很多檢測機構、企業或科研院所未配置該儀器或配置臺數較少，由于不同的化合物采用LC-MS/MS檢測時，需使用不同的流動相或色譜柱，這樣需要不斷更換色譜柱、流動相并耗費比較長的時間對系統進行平衡，這一定程度上制約了LC-MS/MS的應用。配備電子轟擊電離源的氣相色譜質譜(GC-EI-MS)分析食品農產品中農藥殘留具有很大優勢，由于電子轟擊電離源質譜為通用性檢測器，可實現幾百種農藥的多殘留分析，可同時定性和定量，價格適中，因此現各種檢測機構和企業均配備氣相色譜-電子轟擊離子源-質譜儀(GC-EI-MS)對食品農產品中的農藥殘留進行檢測，但迄今為止未見食品農產品中胺苯吡唑酮殘留量的GC-EI-MS檢測方法的報道，胺苯吡唑酮屬電負性化合物，由于糧谷、動物源性食品等食品農產品基質比較復雜，須建立凈化效果良好的樣品前處理方法和儀器分析條件才能滿足檢測要求，因此，建立氣相色譜-電子轟擊離子源-質譜(GC-EI-MS)定性和定量分析糧谷和動物源性食品中胺苯吡唑酮殘留量的檢測方法具有重要意義。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種胺苯吡唑酮殘留量的GC-EI-MS測定方法，主要用于測定糧谷、動物源性食品等復雜基質食品農產品中胺苯吡唑酮殘留量。為實現以上目的，本專利技術所采用的技術方案是：一種胺苯吡唑酮殘留量的GC-EI-MS測定方法，包括如下步驟：(1)提取稱取混勻樣品于具塞離心管中，加入適量水復蘇后，定量加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均質或振蕩超聲提取，然后加入氯化鈉或乙酸鈉中的一種和無水硫酸鎂，劇烈渦旋1min后離心。(2)凈化移取一定體積樣品提取液，濃縮至1mL左右，經C18/PSA固相萃取柱凈化，乙腈洗脫，收集洗脫液，濃縮至干后，用體積比為1/1的丙酮/正己烷混合溶劑溶解定容，過膜后，待氣相色譜-電子轟擊離子源-質譜(GC-EI-MS)檢測。(3)標準工作溶液的配制將不含胺苯吡唑酮的同種類基質空白樣品按上述步驟(1)、(2)處理時，得樣品提取凈化殘渣，加入適量溶劑和標準溶液，渦旋混勻，配制成至少3個濃度的胺苯吡唑酮系列標準工作液。(4)氣相色譜-電子轟擊離子源-質譜法(GC-EI-MS)測定將步驟(3)中的各濃度梯度的標準工作液進行GC-EI-MS測定，以標準工作液的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準工作曲線；在相同條件下將步驟(2)中凈化后的樣品液注入GC-EI-MS進行測定，測本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種胺苯吡唑酮殘留量的GC?EI?MS測定方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：(1)提取稱取混勻樣品于具塞離心管中，加適量水后，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均質或振蕩超聲提取后，加入氯化鈉或乙酸鈉中的一種和無水硫酸鎂，劇烈渦旋1min后離心；(2)凈化移取一定體積樣品提取液，濃縮至1mL左右，經C18/PSA固相萃取柱凈化，乙腈洗脫，收集洗脫液，濃縮至干后，用體積比為1/1的丙酮/正己烷混合溶劑溶解定容，過膜后，待氣相色譜?電子轟擊離子源?質譜(GC?EI?MS)檢測；(3)標準工作溶液的配制將不含胺苯吡唑酮的同種類基質空白樣品按上述步驟(1)、(2)處理，得樣品提取凈化殘渣，加入適量溶劑和標準溶液，渦旋混勻，配制成至少3個濃度的胺苯吡唑酮系列標準工作液；(4)測定和結果計算將步驟(3)中的各濃度梯度的標準工作液進行GC?EI?MS測定，以標準工作液的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到基質標準工作曲線；在相同條件下將步驟(2)中凈化后的樣品液注入GC?EI?MS進行測定，測得樣品液中胺苯吡唑酮的色譜峰面積，代入基質標準工作曲線，得到樣品液中胺苯吡唑酮含量，然后根據樣品液所代表試樣的質量計算得到樣品中胺苯吡唑酮殘留量；若上機溶液中胺苯吡唑酮殘留量超過線性范圍上限，需用定容溶劑將上機溶液濃度稀釋至線性范圍之內。...

【技術特征摘要】
1.一種胺苯吡唑酮殘留量的GC-EI-MS測定方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
(1)提取
稱取混勻樣品于具塞離心管中，加適量水后，加入乙腈或含1％乙酸的乙腈溶液均質或振
蕩超聲提取后，加入氯化鈉或乙酸鈉中的一種和無水硫酸鎂，劇烈渦旋1min后離心；
(2)凈化
移取一定體積樣品提取液，濃縮至1mL左右，經C18/PSA固相萃取柱凈化，乙腈洗脫，收
集洗脫液，濃縮至干后，用體積比為1/1的丙酮/正己烷混合溶劑溶解定容，過膜后，待氣相色
譜-電子轟擊離子源-質譜(GC-EI-MS)檢測；
(3)標準工作溶液的配制
將不含胺苯吡唑酮的同種類基質空白樣品按上述步驟(1)、(2)處理，得樣品提取凈
化殘渣，加入適量溶劑和標準溶液，渦旋混勻，配制成至少3個濃度的胺苯吡唑酮系列標準工
作液；
(4)測定和結果計算
將步驟(3)中的各濃度梯度的標準工作液進行GC-EI-MS測定，以標準工作液的色譜峰
面積對其相應濃度進行回歸分析，得到基質標準工作曲線；在相同條件下將步驟(2)中凈化
后的樣品液注入GC-EI-MS進行測定，測得樣品液中胺苯吡唑酮的色譜峰面積，代入基質標準
工作曲線，得到樣品液中胺苯吡唑酮含量，然后根據樣品液所代表試樣的質量計算得到樣品
中胺苯吡唑酮殘留量；若上機溶液中胺苯吡唑酮殘留量超過線性范圍上限，需用定容溶劑將
上機溶液濃度稀釋至線性范圍...

【專利技術屬性】
技術研發人員：郭慶龍，
申請(專利權)人：郭慶龍，
類型：發明
國別省市：山東;37