一種奧沙利鉑熱敏長循環脂質體的蔗糖溶液制劑及其制備方法技術

本發明專利技術為一種奧沙利鉑長循環熱敏脂質體的蔗糖溶液制劑。長循環熱敏脂質體蔗糖溶液制劑是由奧沙利鉑、DPPC、DSPE?PEG2000組成，通過空白脂質體后載藥法制備，并且分散于蔗糖水溶液中。通過熱敏脂質DPPC的加入，使得該制劑對奧沙利鉑的釋放具有溫度敏感性。該制劑對腫瘤具有顯著靶向性。

Sucrose solution preparation of oxaliplatin thermosensitive long circulating liposome and preparation method thereof

The present invention relates to a sucrose solution preparation of oxaliplatin long circulating thermosensitive liposome. Long circulating thermosensitive liposome sucrose solution preparation is composed of DPPC, DSPE oxaliplatin, PEG2000, through the blank liposome loaded drug were prepared and dispersed in sucrose aqueous solution. By the addition of thermosensitive lipid DPPC, the preparation is sensitive to oxaliplatin release. The preparation has significant targeting to the tumor.

【技術實現步驟摘要】
一種奧沙利鉑熱敏長循環脂質體的蔗糖溶液制劑及其制備方法
本專利技術屬于醫藥
，涉及一種載藥脂質體溶液制劑及其制備方法，特別涉及一種載有奧沙利鉑的熱敏長循環脂質體、制備方法及其蔗糖溶液制劑。
技術介紹
奧沙利鉑對結直腸癌、卵巢癌、非小細胞肺癌及乳腺癌等多種動物或者人體細胞株，尤其是對順鉑和卡鉑耐藥腫瘤株多有顯著的抑制作用，可用于晚期卵巢癌的一線治療和復治。奧沙利鉑對胃腸道、肝、腎以及骨髓毒性較順鉑、卡鉑明顯減輕，然而仍存在容易分解和神經毒性等缺點。熱敏脂質體(thermosensitiveliposomes)是脂質體的一種，它又稱溫度敏感脂質體，無毒，生物相容性較好，DPPC是一種對溫度敏感的脂質，當脂質體被加熱到其相變溫度以上時，脂質體膜由“膠晶態”轉變到液晶結構，通透性增加，使藥物大量釋放。從而在特定的腫瘤靶點釋放出所攜帶藥物，而實現靶向給藥。熱敏脂質體在血液中容易被RES系統清除，因此在脂質體中嵌入DSPE-PEG2000使得PEG在脂質體表面形成位阻，并且PEG的極性基團增加了脂質體表面的親水性，減弱了RES系統對脂質體的識別，延長脂質體在血液中的循環時間，達到被動靶向的抗癌效果。由于奧沙利鉑屬于水溶性藥物，和磷脂膜的親和力小，使得脂質體發生相變時能迅速釋放，適合于作為熱敏脂質體的包封藥物。本專利技術旨在將DPPC與DSPE-PEG相結合，制備長循環熱敏脂質體蔗糖制劑，對腫瘤的靶向治療具有重要意義。
技術實現思路
本專利技術的目的之一在于提供一種奧沙利鉑藥物的熱敏感性的長循環脂質載體。本專利技術使用具有熱敏性質的DPPC作為主體，同時以生物相容性高的DSPE-PEG2000修飾在脂質體的外面，奧沙利鉑包載在脂質體的親水腔內。本專利技術的目的之二在于提供一種奧沙利鉑熱敏長循環脂質體的蔗糖制劑的制備方法。本專利技術的目的之三在于提供一種奧沙利鉑熱敏長循環脂質體的蔗糖制劑在制備抗腫瘤藥物中的用途。本專利技術提供如下技術方案：一種奧沙利鉑長循環熱敏脂質體蔗糖制劑，其特征在于，所述制劑由奧沙利鉑、DPPC、DSPE-PEG2000制備成的脂質體，并且分散于蔗糖溶液中，其中奧沙利鉑與DPPC的重量比為1∶3～30，DPPC、DSPE-mPEG的重量比為1∶0.07～0.20，蔗糖溶液的濃度為4％-10％，脂質體的粒徑為100-250nm，電位為-11～-30mV，較優脂質體的粒徑為120-160nm；所述脂質體的電位為-20～-30mV。一種奧沙利鉑長循環熱敏脂質體蔗糖制劑的制備方法，其特征在于按處方量稱取DPPC、DSPE-PEG2000，均勻混合后加入有機溶劑溶解，置旋轉蒸發儀上去除有機溶劑成膜，加入蔗糖水溶液水化后，采用探頭超聲或高速剪切機制備出脂質體，在制備得到的脂質體中加入奧沙利鉑粉末，加熱下溶解攪拌孵育，放冷后制備得到的奧沙利鉑脂質體，透析除去游離奧沙利鉑，并經0.22μm微孔濾膜過濾除菌，其中孵育溫度為50-60℃，所述攪拌速度為80-250rpm，保溫孵育時間為2-4小時；其中最優加熱溫度為55℃，最優攪拌速度為110rpm，最優保溫孵育時間為3小時。最后通過透析法、葡聚糖凝膠柱層析法或超濾離心法將游離奧沙利鉑除去。所述奧沙利鉑粉末加入后的濃度為4mg/mL～12mg/mL，且存在于4％～10％的蔗糖溶液中。本專利技術的特點本專利技術的優點在于選用合適的空白脂質體溫育載藥法將水溶性的奧沙利鉑穩定的包載在脂質體中，且該制劑能夠在溫度超過42℃時快速完全釋放藥物，并且在體內呈現出對腫瘤較佳的靶向性。本專利技術制備得到的奧沙利鉑長循環熱敏脂質體的粒徑為120-160nm，相較逆向蒸發法制備的脂質體粒徑較小，Zeta電位為-11mV～-30mV，放置中不易發生聚集或沉淀，體系具有良好的穩定性，并在體內具有明顯的被動靶向性。能夠長時間的保持在血液中的有效抗癌濃度，防止奧沙利鉑在血液中的清除與降解，減少在正常組織中的釋放，從而有效的進入癌細胞，在腫瘤部位溫度升高時有效釋放藥物，使得腫瘤部位藥物濃度增加，從而發揮抗癌作用。附圖說明圖1為本專利技術中奧沙利鉑長循環熱敏脂質體的粒徑分布圖。圖2為本專利技術中的奧沙利鉑長循環熱敏脂質體在37℃和42℃溫度下的體外釋放曲線。圖3為不同濃度的奧沙利鉑長循環熱敏脂質體和市售奧沙利鉑注射液在RKO細胞中的抑制率。圖4為奧沙利鉑長循環熱敏脂質體在荷瘤裸鼠體內不同時間點的組織熒光分布圖。具體實施方式實施例1：(配方一)DPPC150mgDSPE-PEG200026.9mg奧沙利鉑50mg按處方量稱取DPPC、DSPE-PEG2000，均勻混合后加入有機溶劑溶解，置旋轉蒸發儀上去除有機溶劑成膜，加入5％的蔗糖水溶液水化后，采用探頭超聲300W，超聲2分鐘，制備出空白脂質體，在制備得到的脂質體中加入處方量奧沙利鉑粉末，在55℃下溶解攪拌孵育2小時，放冷后制備得到的奧沙利鉑脂質體，透析除去游離奧沙利鉑，并經0.22μm微孔濾膜過濾除菌，分裝于西林瓶中。實施例2：(配方二)DPPC200mgDSPE-PEG200013.92mg奧沙利鉑30mg按處方量稱取DPPC、DSPE-PEG2000，均勻混合后加入有機溶劑溶解，置旋轉蒸發儀上去除有機溶劑成膜，加入9％的蔗糖水溶液水化后，采用探頭超聲300W，超聲5分鐘，制備出空白脂質體，在制備得到的脂質體中加入處方量奧沙利鉑粉末，在50℃下溶解攪拌孵育3小時，放冷后制備得到的奧沙利鉑脂質體，透析除去游離奧沙利鉑，并經0.22μm微孔濾膜過濾除菌，分裝于西林瓶中。實施例3：(配方三)DPPC240mgDSPE-PEG200018mg奧沙利鉑8mg按處方量稱取DPPC、DSPE-PEG2000，均勻混合后加入有機溶劑溶解，置旋轉蒸發儀上去除有機溶劑成膜，加入9％的蔗糖水溶液水化后，采用探頭超聲300W，超聲5分鐘，制備出空白脂質體，在制備得到的脂質體中加入處方量奧沙利鉑粉末，在60℃下溶解攪拌孵育4小時，放冷后制備得到的奧沙利鉑脂質體，透析除去游離奧沙利鉑，并經0.22μm微孔濾膜過濾除菌，分裝于西林瓶中。實施例4：奧沙利鉑脂質體的粒徑分布和電位測定：通過馬爾文激光粒度儀測定奧沙利鉑脂質體的粒徑與Zeta電位。平均粒徑150nm，Zeta電位-15mV，粒徑分布圖見圖1。實施例5：奧沙利鉑長循環熱敏脂質體的體外釋放評價：取奧沙利鉑的溫敏性脂質體0.5mL于透析袋(截留分子量＝7000Da)內，兩端用棉線扎緊，置于25mL比色管內，各加入釋放介質(pH6.8)15mL，分別置于37℃和42℃恒溫水浴振蕩器中，轉速為100r/min，分別于0.5h，1h，2h，4h，6h，8h，12h，24h，取釋放介質1mL于離心管中，過0.22μm水膜，棄初濾液，取續濾液于進樣小瓶，于高效液相色譜儀進樣，計算藥物釋放量，結果見圖2。實施例6：奧沙利鉑長循環熱敏脂質體的細胞毒性評價：將RKO結腸癌細胞以5000個/孔接種于96孔板中，孵育24h后，將長循環熱敏脂質體在42℃水浴鍋中溫育1小時后，稀釋成不同濃度加入96孔板中，同時以奧沙利鉑市售注射液為對照組。取20μL四甲基偶氮唑藍(MTT，5mg/mL)加入各孔內，繼續孵育4h，棄去孔內液體，加入DMSO200μL，振搖，使結晶充分溶解，在4本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種奧沙利鉑長循環熱敏脂質體蔗糖溶液制劑，其特征在于，所述制劑是由奧沙利鉑、DPPC、DSPE?PEG2000制備成的脂質體，并且分散于蔗糖水溶液中。

【技術特征摘要】
1.一種奧沙利鉑長循環熱敏脂質體蔗糖溶液制劑，其特征在于，所述制劑是由奧沙利鉑、DPPC、DSPE-PEG2000制備成的脂質體，并且分散于蔗糖水溶液中。2.根據權利要求1所述的奧沙利鉑長循環熱敏脂質體的蔗糖溶液制劑，其特征在于：1)所述奧沙利鉑與DPPC的重量比為1∶3～30；2)所述DPPC與DSPE-mPEG的重量比為1∶0.07～0.2；3)所述蔗糖溶液的濃度為4％-10％；4)所述脂質體的粒徑為100-250nm；5)所述脂質體的電位為-11～-30mV。3.根據權利要求1所述的奧沙利鉑長循環熱敏脂質體的蔗糖溶液制劑，其特征在于：所述脂質體的粒徑為120-200nm。4.根據權利要求1-3任一項所述的奧沙利鉑長循環熱敏脂質體的蔗糖溶液制劑，其特征在于：所述脂質體的粒徑為120-160nm；所述脂質體的電位為-20～-30mV。5.一種奧沙利鉑長循環熱敏脂質體蔗糖制劑的制備方法，其特征在于：按處方量稱取DPPC、DSPE-PEG2000，均勻混合后加入有機溶劑溶解，置旋轉蒸發儀上去除有機溶劑成膜，加入蔗糖水溶液水化后，采用探頭超聲或高速剪切機制備出脂質體，在制備得到的脂質體中加入奧沙利鉑粉末，...

【專利技術屬性】
技術研發人員：涂家生，李亞楠，孫春萌，
申請(專利權)人：中國藥科大學，
類型：發明
國別省市：江蘇,32