一種提純紐莫康定B0的方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種經(jīng)過工藝優(yōu)化的紐莫康定B0的純化方法，包括(1)將紐莫康定B0的發(fā)酵液酸化，過濾，浸提，得浸提液；(2)浸提液濃縮混合物中加入硅藻土裹晶，加去離子水離心得到含有紐莫康定B0的白色固體；(3)離心固體加入乙醇溶解，充分?jǐn)嚢瑁偌尤牖钚蕴浚浞謹(jǐn)嚢杳撋^濾得到無色濾液；(4)無色濾液濃縮至干，加入非均相溶劑體系，溶解，析晶，得到潮晶；(5)將所得的潮晶再次加入非均相溶劑體系，溶解，析晶，得到潮晶，干燥。該方法在純度保持不變的基礎(chǔ)上，不僅簡化了工藝步驟，且降低了生產(chǎn)成本，更有利于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。

A purification Niumo Kangding B

The invention discloses a through process optimization Niumo Kangding B

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
一種提純紐莫康定B0的方法
本專利技術(shù)屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，涉及紐莫康定B0的工業(yè)化生產(chǎn)，具體涉及一種提純紐莫康定B0的工業(yè)化方法。
技術(shù)介紹
紐莫康定B0是由霉菌Glarealozoyensis發(fā)酵合成的次級代謝產(chǎn)物。Glarealozoyensis發(fā)酵產(chǎn)物除目標(biāo)產(chǎn)物之外，有C0等組份，還包括有大量的色素等其他雜質(zhì)，因此紐莫康定B0的提取純化工藝難度較大。中國專利技術(shù)專利200910133118.0公開了制備紐莫康定B0的方法，主要步驟是：a)離心紐莫康定B0發(fā)酵液，取菌絲體，用甲醇浸提紐莫康定B0；b)降甲醇浸提液蒸干，再用正丁醇浸提紐莫康定B0；c)將正丁醇浸提液蒸干，再用70～80％甲醇浸提紐莫康定B0，過酸性氧化鋁柱，收集流出液；d)將紐莫康定B0收集蒸干后，用60～70％甲醇溶解，上HP20吸附樹脂，用85～95％甲醇洗脫，收集洗脫液紐莫康定B0純度在50～65％間；e)將紐莫康定B0收集液蒸干，溶于反相樹脂YPR-II，用85～95％甲醇洗脫，收集紐莫康定B0純度大于90％；f)將紐莫康定B0收集液蒸干后，用甲醇溶解，滴加少量水使之過飽和結(jié)晶析出，制得紐莫康定B0，純度可達(dá)到96％。中國專利技術(shù)專利201110266790.4公開了一種紐莫康定B0的提取純化方法，主要包括：a)將含有紐莫康定B0的發(fā)酵液pH值調(diào)至2.0～4.0，過濾，菌渣用低分子醇浸提，得浸提液；b)調(diào)整浸提液的醇濃度至30～50％(V/V),pH為6.0～8.0；c)用吸附樹脂吸附浸提液后，依次用水、30～50％(V/V)丙酮-水溶液沖洗樹脂，然后用pH值為3.0～5.0的50％～80％(V/V)丙酮-酸溶液洗脫樹脂，收集富含紐莫康定B0的洗脫液；d)紐莫康定B0洗脫液加水稀釋至丙酮濃度為30～50％(V/V),用吸附樹脂吸附，用水沖洗樹脂后用低分子醇洗脫，收集富含紐莫康定B0的洗脫液；e)以常規(guī)方法結(jié)晶得紐莫康定B0。現(xiàn)有技術(shù)主要采用的是樹脂柱工藝，均未對相關(guān)物質(zhì)C0的檢測和控制進(jìn)行描述，C0是紐莫康定B0的異構(gòu)體，在結(jié)構(gòu)上的差異表現(xiàn)為一個羥基位置的不同；C0雜質(zhì)不能在反相色譜中與紐莫康定B0分離，只有通過正相色譜分離。發(fā)酵液中的C0雜質(zhì)一般10％，如果不能得到有效的控制，最后得到的是紐莫康定B0和C0的混合物。C0雜質(zhì)能參與后續(xù)反應(yīng)，嚴(yán)重影響醋酸卡泊芬凈的質(zhì)量。中國專利技術(shù)專利201410051009.5公開了一種提純紐莫康定B0的新方法，通過該方法，能夠有效的控制C0的含量，降到C0≤0.2％。該方法為本申請人公司母公司下屬的子公司博瑞生物醫(yī)藥泰興市有限公司開發(fā)，但在進(jìn)行工藝交接時，本專利技術(shù)人發(fā)現(xiàn)該方法雖然能夠有效的控制C0的含量，使得紐莫康定B0的純度能夠達(dá)到99％以上，但在整個工藝中，需要柱層析，柱層析應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)時，費時，溶劑使用量大，易造成環(huán)境污染，且原料損耗大，使得生產(chǎn)成本大幅提高。
技術(shù)實現(xiàn)思路
為克服中國專利技術(shù)專利201410051009.5所公開的提純紐莫康定B0的方法的缺點，本專利技術(shù)人優(yōu)化了該提純工藝。為了實現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案如下：一種提純紐莫康定B0的方法，包括以下步驟：(1)將含有紐莫康定B0的發(fā)酵液pH調(diào)至2.0～4.0，過濾，菌渣用低分子醇浸提，得浸提液；(2)將步驟(1)所得的浸提液蒸餾出低分子醇，并濃縮至濃縮混合物中液體所含的紐莫康定B0≤100mg/L，然后向浸提液濃縮混合物中加入硅藻土裹晶，加去離子水離心得到含有紐莫康定B0的白色固體；(3)將步驟(2)所得的離心固體加入乙醇溶解，充分?jǐn)嚢瑁偌尤牖钚蕴浚浞謹(jǐn)嚢杳撋^濾得到無色濾液；(4)將步驟(3)所得的無色濾液濃縮至干，加入非均相溶劑體系，溶解，析晶，得到潮晶；(5)將步驟(4)所得的潮晶再次加入非均相溶劑體系，溶解，析晶，得到潮晶，并在溫度45.0～50.0℃，真空度≤-0.07MPa的條件下干燥得成品。所述步驟(1)，優(yōu)選將pH調(diào)節(jié)至3.0，優(yōu)選使用草酸進(jìn)行調(diào)節(jié)，低分子醇為乙醇。所述步驟(2)中硅藻土的目數(shù)為100～150，所述硅藻土的加入重量為浸提液濃縮混合物重量的3～6倍，并使硅藻土充分吸附浸提液濃縮混合物中的紐莫康定B0；所述去離子水的加入重量為浸提液濃縮混合物與硅藻土的重量之和，加入去離子水后并充分?jǐn)嚢琛Ｋ霾襟E(3)中加入的乙醇的重量為離心固體重量的2～4倍；所述活性炭的目數(shù)為140～200，所述活性炭的加入重量為離心固體重量的0.05～0.1倍。所述步驟(4)和(5)中，非均相溶劑體系為乙醇：乙酸乙酯：水。其中，乙醇：乙酸乙酯：水的體積比優(yōu)選50:100：1。控制溫度為0-5攝氏度，先加入乙醇，使?jié)饪s至干的濾液溶解，再加入水，攪拌，使溶清，再加入乙酸乙酯，攪拌析晶。所述步驟(5)中干燥時間為18～24h；干燥后固體水份≤2％。步驟(2)、(4)中的所述的濃縮為真空條件下，濃縮溫度≤50℃，真空度≤-0.07MPa。本專利技術(shù)所提供的優(yōu)化過的提純紐莫康定B0的方法，具有以下有益效果：1.將原專利技術(shù)步驟(1)紐莫康定B0的發(fā)酵液的pH值做了進(jìn)一步的優(yōu)化，使得浸提液的純度上升。2.將原專利技術(shù)步驟(4)的柱層析和步驟(5)中的多相溶劑體系結(jié)晶改為在非均相溶劑體系中溶解析晶，簡化了純化步驟，同時降低了生產(chǎn)成本。本專利技術(shù)人發(fā)現(xiàn)經(jīng)過優(yōu)化的純化方法，在純度基本能保持同原專利技術(shù)一樣的基礎(chǔ)上，不僅簡化了工藝步驟，且降低了生產(chǎn)成本，更有利于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。具體實施例實施例111噸發(fā)酵液先轉(zhuǎn)移到酸化罐，用草酸將發(fā)酵液的pH值調(diào)至3.0，板框壓濾。得菌渣1200kg，加入6噸75％的乙醇溶液，攪拌6小時，再次板框壓濾，得浸提液6噸。浸提液再次轉(zhuǎn)移到1000L搪瓷釜中，控制溫度≤50℃，真空度≤-0.07MPa真空濃縮，濃縮過程中，觀察料液變渾濁后，取樣離心，清液送檢含量，當(dāng)清液中紐莫康定B0含量48mg/L時停止?jié)饪s，得浸提液濃縮混合物50kg；浸提液濃縮混合物中加入200kg規(guī)格為100目的硅藻土充分吸附，裹晶，再加入250kg去離子水?dāng)嚢瑁x心，得到含有紐莫康定B0的白色固體，收集離心固體260kg。將260kg離心固體用800kg的乙醇溶解，攪拌1小時，加入20kg規(guī)格為140目的活性炭，攪拌2小時，脫色，過濾得無色濾液。無色濾液在釜內(nèi)控制溫度≤50℃，真空度≤-0.07MPa下濃縮，濃縮至干后，控制溫度為0-5攝氏度，加入240L乙醇，使使?jié)饪s至干的濾液溶解，再加入4.8L的水，攪拌，使溶清，再加入480L的乙酸乙酯，攪拌析晶，得到潮晶，再次使用上述析晶方法，得到潮晶14.8kg。將潮晶放入真空干燥箱，控制濃縮溫度45.0～50.0℃，真空度≤-0.07MPa，干燥20h，即得到成品13.4kg，水份1.07％，相關(guān)物質(zhì)C0正相純度0.02％，紐莫康定B0正相純度99.98％，反相純度99.2％。本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】
一種提純紐莫康定B

【技術(shù)特征摘要】
1.一種提純紐莫康定B0的方法，包括以下步驟：(1)將含有紐莫康定B0的發(fā)酵液pH調(diào)至3.0，過濾，菌渣用75％乙醇浸提，得浸提液；(2)將步驟(1)所得的浸提液蒸餾出乙醇，并濃縮至濃縮混合物中液體所含的紐莫康定B0≤100mg/L，然后向浸提液濃縮混合物中加入硅藻土裹晶，加去離子水離心得到含有紐莫康定B0的白色固體；(3)將步驟(2)所得的離心固體加入乙醇溶解，充分?jǐn)嚢瑁偌尤牖钚蕴浚浞謹(jǐn)嚢杳撋^濾得到無色濾液；(4)將步驟(3)所得的無色濾液濃縮至干，加入非均相溶劑體系，溶解，析晶，得到潮晶；(5)將步驟(4)所得的潮晶再次加入非均相溶劑體系，溶解，析晶，得到潮晶，并在溫度45.0～50.0℃，真空度≤-0.07MPa的條件下干燥得成品。所述步驟(2)中硅藻土的目數(shù)為100～150，所述硅藻土的加入重量為...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：袁建棟，
申請(專利權(quán))人：信泰制藥蘇州有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：江蘇,32