一種防治溝眶象的牛血清白蛋白?苯氧威納米藥物的制備方法技術

本發明專利技術公開了一種防治溝眶象的牛血清白蛋白包裹苯氧威納米藥物的制備方法。所述的防治溝眶象的牛血清白蛋白包裹苯氧威的過程采用了物理包埋法。首先，取一定量牛血清白蛋白（BSA）溶于雙蒸水中配置成水相，取一定量苯氧威溶于乙腈配置成油相。然后，在高速攪拌條件下，將油相逐滴加入水相中，乳化一段時間后，迅速冷卻，超聲粉碎得到超微乳液，冷卻。最后，冷干得到苯氧威白蛋白納米粒子。該方法采用的新型白蛋白納米粒子制備技術是在不改變白蛋白結構的前提下，將藥物包裹在白蛋白中，增加了載藥量，同時也具有緩釋的作用。利用納米技術可以降低化學農藥的用量、殘留量、成本以及環境污染性，同時也可以提高藥效、有效增加藥劑與靶標害蟲的接觸面積，真正實現化學農藥的高效、低毒、安全。

A preparation method of prevention and treatment of Eucryptorrhynchus bovine serum albumin fenoxycarb nano drug

The invention discloses a preparation method of a bovine serum albumin inclusion nano medicine for preventing and controlling the orbital image of a bull. The process of preparing bovine serum albumin by controlling the orbit of the orbital image is a physical embedding method. First of all, a certain amount of bovine serum albumin (BSA) was dissolved in two distilled water and treated as an aqueous phase. A certain amount of benzene was dissolved in acetonitrile to form an oil phase. Then, in the high-speed mixing, the oil phase drops into the water phase, and after a period of emulsification, it is cooled rapidly, and then the ultrafine emulsion is cooled by ultrasonic grinding. Finally, the cold dry benzene oxygen Granville white protein nanoparticles. The new technology for preparing albumin nanoparticles is that the drug is encapsulated in albumin without changing the structure of albumin, thus increasing the drug loading and releasing the drug. The use of chemical pesticides can reduce the amount of residues, nanotechnology, cost and environmental pollution, but also can improve the efficacy, effectively increase the contact area of the reagents and the target pests, high efficiency, low toxicity, realize chemical pesticide safety.

【技術實現步驟摘要】
一種防治溝眶象的牛血清白蛋白-苯氧威納米藥物的制備方法
本專利技術公開了一種防治溝眶象的牛血清白蛋白-苯氧威納米藥物的制備方法，苯氧威納米粒的制備過程，屬于生命科學、化學、納米材料和新型農藥

技術介紹
苯氧威，英文名Ethyl2-(4-phenoxyphenoxy)ethylcarbamate，分子式為C17H19NO4，苯氧威、雙氧威或苯醚威，苯是具有保幼激素活性的非萜烯類昆蟲生長調節劑類殺蟲劑，最早由瑞士先正達公司在上個世紀九十年代投放市場，并被先正達列為二十一世紀的十幾個保留品種之一。苯氧威純品為無色結晶體，熔點53-54℃，溶解性(25℃時)：水5.7mg/Kg，丙酮、氯仿、乙醚乙酸乙酯、甲醇、異丙醇、甲苯等中大于250g/Kg。在pH3、7、9，50℃下水解穩定，對光穩定，低毒、高效，對環境無污染。具有殺蟲譜廣，對害蟲高效，對哺乳動物低毒，對天敵無害，持效期長，對環境無污染等優點。由于苯氧威兼具二苯醚和氨基甲酸酯分子結構，使它有多種殺蟲功能，具胃毒和觸殺作用并對昆蟲內分泌激素有多種調節功能。作用機制為：使昆蟲無法蛻皮變態而逐漸死亡；抑制成蟲期變態，從而造成后期或蛹期死亡；有較強的殺卵作用，可減少蟲口數；可改變昆蟲的胚胎發育、繁殖和性外激素。廣泛應用于儲糧害蟲（米象、玉米象、谷象、赤擬谷盜、印度谷螟和麥蛾等）、森林害蟲（松毛蟲、溝眶象和楊樹多種食葉害蟲）、果樹害蟲（蒂蛀蟲、荔枝蝽象、梨木虱和蘋果黃蚜等）、果蔬害蟲（菜青蟲、菜蚜和潛葉蠅等）以及衛生害蟲（白蟻、蟑螂、跳蚤和螞蟻等）等多種類的害蟲。白蛋白具有安全無毒、無免疫原性、可生物降解及生物相容性好等優點，是一種理想的給藥系統載體材料。具有的可生物降解、無毒、無抗原性和生物利用度高等特點，白蛋白已受到了生物醫藥領域研究工作者的重視，被廣泛用作診斷試劑和藥物載體等。新型白蛋白納米制備技術是在不改變白蛋白結構的前提下，將藥物載入其中，混懸劑中藥物以納米級別的“純藥物”粒子形式存在，為難溶性、大劑量藥物注射給藥提供了一種新的途徑。利用包埋技術把純藥物納米粒子制成納米生物農藥微球，發揮納米材料所特有的體積效應、表面效應、量子尺寸效應和宏觀量子隧道效應，顯著地提高藥效，農藥的傳統施藥方式是通過噴霧方式，通過這個過程80-90％的藥物有效成分將流失到土壤和空氣中，直接造成了農藥的施藥量加大、施藥次數增加等。通過使用納米技術將亞微米級的農藥顆粒或液體包裹在一個惰性殼結構中或者搭載在一種大分子物質上，形成一種新型的納米農藥。真正做到化學農藥使用的低濃度、低藥量、低成本、低毒性、低抗性、低殘留、廣譜殺蟲、高效以及對環境無污染。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種防治溝眶象的新型農藥牛血清白蛋白-苯氧威納米粒子的制備方法，該方法采用的新型白蛋白納米制備技術是在不改變白蛋白結構的前提下，將藥物載入其中，更易被吞食和吸收，更好地發揮觸殺和胃毒作用，提高藥效，降低用量，載藥量大，具有控釋能力，實現生物農藥的高效、低毒、安全。目前，尚未有關納米級苯氧威藥物的研究報道。該方法具有可以使農藥產品微型化，降低成本，可達到“低消耗、高效益”的可持續發展目的，實現資源利用的持續化。本專利技術的上述目的在于通過以下技術方案實現：牛血清白蛋白包裹苯氧威的過程采用了乳化固化法，白蛋白納米粒作為一種藥物載體，無免疫原性、生物相容性好。所述的牛血清白蛋白包裹苯氧威的過程采用了乳化固化法。首先，取一定量牛血清白蛋白（BSA）溶于雙蒸水中配置成水相，取一定量苯氧威溶于乙腈配置成油相。然后，在高速攪拌條件下，將油相逐滴加入水相中，乳化一段時間后，迅速冷卻，超聲粉碎得到超微乳液，冷卻。最后，冷干得到苯氧威白蛋白納米粒子。該方法采用的新型白蛋白納米粒子制備技術是在不改變白蛋白結構的前提下，將藥物包裹在白蛋白中，增加了載藥量，同時也具有緩釋的作用。具體步驟如下：（1）取一定量的牛血清白蛋白溶于雙蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）取一定量的苯氧威，加入乙腈超聲溶解5-20min，配制成2-15mg/mL的苯氧威-乙腈油相；（3）將水相調節轉速1000-5000rpm，高速攪拌下逐滴加入苯氧威-乙腈油相，乳化30-60min，取出乳液迅速于0-4℃下冷卻5-10min，然后取出超聲5-20min，得到牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液；（4）將牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液經透析膜（MWCO=5000）透析過夜12h；（5）將透析液取出并冷凍，冷干得到白色粉末，即牛血清白蛋白-苯氧威納米粒。所述的牛血清白蛋白包裹對象苯氧威，為疏水性藥物，也同樣適用于其他疏水性藥物如噻蟲啉，阿維菌素等。所述的乳化固化法是指將油相藥物加入到水相白蛋白中，高速攪拌下，形成水包油的納米粒，冰浴后超聲形成穩定的、均勻的超微乳，透析，冷凍，冷干得牛血清白蛋白-苯氧威納米粒。步驟（2）中的苯氧威也可換做其他藥物替代，其包裹方法也可適用。步驟（2）中的乙腈也可用乙醚、二氯甲烷、氯仿、二甲基亞砜、石油醚、乙醇、甲醇等多種有機溶劑替代。步驟（2）中的超聲時間5-20min，所得到的納米粒粒徑均勻，分散性好。步驟（3）中的乳化過程時間30-60min，時間太短乳化不充分，太長會導致更多的聚集。本專利技術具有以下優點：（1）本專利技術的反應機理是水相在高速旋轉的狀態下逐滴加入油相，產生水包油乳滴。（2）白蛋白本身具有可生物降解、無毒、無抗原性和生物利用度高等特點，藥物載入其中，更易被吞食和吸收，更好地發揮觸殺和胃毒作用，提高藥效。（3）白蛋白納米粒的載藥量大，具有控釋能力，實現生物農藥的高效、低毒、安全。（4）本專利技術不需要特殊的化學試劑，工藝簡單，設備要求低，綠色環保，低制造成本。附圖說明圖1為牛血清白蛋白-苯氧威納米粒子的SEM圖。圖2為牛血清白蛋白-苯氧威納米農藥防治溝眶象的效果。具體實施方式（1）取一定量的牛血清白蛋白溶于雙蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）取一定量的苯氧威，加入乙腈超聲溶解5-20min，配制成2-15mg/mL的苯氧威-乙腈油相；（3）將水相調節轉速1000-5000rpm，高速攪拌下逐滴加入苯氧威-乙腈油相，乳化30-60min，取出乳液迅速于0-4℃下冷卻5-10min，然后取出超聲5-20min，得到牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液；（4）將牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液經透析膜（MWCO=5000）透析過夜12h；（5）將透析液取出并冷凍，冷干得到白色粉末，即牛血清白蛋白-苯氧威納米粒；（6）將得到的牛血清白蛋白-苯氧威納米粒溶于純凈水中，裝載到小型噴霧器中，并噴到溝眶象的食物上，觀察溝眶象的死亡情況。溝眶象的死亡情況見圖2。實施例1（1）取0.08g牛血清白蛋白于4ml雙蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）另取1mg苯氧威，加入0.167ml乙腈超聲溶解5min，配制成6mg/mL的苯氧威-乙腈油相；（3）將水相調節轉速1000rpm，高速攪拌下逐滴加入苯氧威-乙腈油相，乳化30min，取出乳液迅速于0-4℃下冷卻10min，然后取出超聲10min，得到牛血清白蛋白-苯氧威超微乳液；（本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種防治溝眶象的牛血清白蛋白?苯氧威納米藥物的制備方法，其特征在于：所述的牛血清白蛋白包裹苯氧威的過程采用了乳化固化法，首先，取一定量牛血清白蛋白（BSA）溶于雙蒸水中配置成水相，取一定量苯氧威溶于乙腈配置成油相，然后，在高速攪拌條件下，將油相逐滴加入水相中，乳化一段時間后，迅速冷卻，超聲粉碎得到超微乳液，冷卻，最后，冷干得到苯氧威白蛋白納米粒子，該方法采用的新型白蛋白納米粒子制備技術是在不改變白蛋白結構的前提下，將藥物包裹在白蛋白中，增加了載藥量，同時也具有緩釋的作用，具體步驟如下：（1）取一定量的牛血清白蛋白溶于雙蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）取一定量的苯氧威，加入乙腈超聲溶解5?20min，配制成2?15mg/mL的苯氧威?乙腈油相；（3）將水相調節轉速1000?5000?rpm，高速攪拌下逐滴加入苯氧威?乙腈油相，乳化30?60min，取出乳液迅速于0?4℃下冷卻5?10min，然后取出超聲5?20min，得到牛血清白蛋白?苯氧威超微乳液；（4）將牛血清白蛋白?苯氧威超微乳液經透析膜（MWCO=5000）透析過夜12h；（5）將透析液取出并冷凍，冷干得到白色粉末，即牛血清白蛋白?苯氧威納米粒。...

【技術特征摘要】
1.一種防治溝眶象的牛血清白蛋白-苯氧威納米藥物的制備方法，其特征在于：所述的牛血清白蛋白包裹苯氧威的過程采用了乳化固化法，首先，取一定量牛血清白蛋白（BSA）溶于雙蒸水中配置成水相，取一定量苯氧威溶于乙腈配置成油相，然后，在高速攪拌條件下，將油相逐滴加入水相中，乳化一段時間后，迅速冷卻，超聲粉碎得到超微乳液，冷卻，最后，冷干得到苯氧威白蛋白納米粒子，該方法采用的新型白蛋白納米粒子制備技術是在不改變白蛋白結構的前提下，將藥物包裹在白蛋白中，增加了載藥量，同時也具有緩釋的作用，具體步驟如下：（1）取一定量的牛血清白蛋白溶于雙蒸水中，配制成水相，50℃水浴30min，得到澄清透明牛血清白蛋白水溶液；（2）取一定量的苯氧威，加入乙腈超聲溶解5-20min，配制成2-15mg/mL的苯氧威-乙腈油相；（3）將水相調節轉速1000-5000rpm，高速攪拌下逐滴加入苯氧威-乙腈油相，乳化30-60min，取出乳液迅速于0-4℃下冷卻5-10min，然后取出...

【專利技術屬性】
技術研發人員：溫俊寶，季英超，劉彥雪，雷建都，代娟，王英颯，朱蓬勃，
申請(專利權)人：北京林業大學，
類型：發明
國別省市：北京,11