用于大蔥組織培養的種子消毒法制造技術

本發明專利技術的目的在于提供用于大蔥組織培養的種子消毒法，包括以下步驟：（1）大蔥種子預處理：在含洗滌劑的溫水中浸泡12?24?h；（2）預處理后的種子先用60?70%酒精體表消毒1?5?min，用無菌水沖洗3?5次后，再用0.1?0.5%的?HgCl2溶液中按10000∶（1?2）的比例添加Tween20消毒10?20?min；（3）接種：最后再用無菌水沖洗3次后接種在培養基（MS基本培養基，p?H5.86）；（4）在培養基中加入三種殺菌劑：乙酰檸檬酸三丁酯，甲基托布津、代森錳鋅；（5）將培養基中種子清洗晾干后栽種。其方法對環境無污染，對土壤不會產生危害，不會是細菌、病毒產生抗藥性。

Seed sterilization method for tissue culture of Welsh Onion

The invention aims to provide a method for Seed Sterilization of Welsh Onion tissue culture, which comprises the following steps: (1) the Welsh onion seed pretreatment in detergent containing warm water and soak for 12 24 h; (2) after pretreatment of the seeds with 60 70% alcohol disinfection 5 min 1 surface, with a sterile water rinse 3 5 times, HgCl2 solution with 0.1 in 0.5% by 10000: (1 2) was added Tween20 10 min 20 disinfection; (3) inoculation: finally rinsed with sterile water for 3 times after inoculation in culture medium (MS medium, P H5.86); (4) in the culture medium adding three fungicides: citric acid butyl ester three, thiophanate methyl, mancozeb; (5) the culture medium after dry cleaning plant seeds. The method has no pollution to the environment and no harm to the soil, and is not resistant to bacteria or viruses.

【技術實現步驟摘要】
用于大蔥組織培養的種子消毒法
本專利技術涉及一種種子消毒法，尤其是涉及一種用于大蔥組織培養的種子消毒法。
技術介紹
大蔥是原產我國的二年生或多年生的蔬菜作物，在我國至少有2600多年的栽培歷史，先民通過混合選擇或母系選擇育成了適合本地生態環境、栽培條件和消費要求的優良地方品種或農家品種如山東的章丘大蔥(包括大梧桐型和氣煞風型)、天津的五葉齊、河北的海陽蔥、朝陽的鱗棒蔥、陜西的赤水谷蔥、隆堯雞腿蔥、內蒙古的胭脂紅大蔥、云南的安寧大彎蔥等。而大蔥容易受到病蟲害的威脅，例如大蔥細菌性軟腐病有逐年上升趨勢。一般先從莖基由下向上擴展，初侵染呈水漬狀長形斑點，后產生半透明狀灰白色病斑，接著葉鞘基部軟化腐爛，致葉片折倒，病斑向下擴展，假莖部染病初呈水浸狀，后內部開始腐爛，散發出細菌病害所特有的惡臭味。又如大蔥紫斑病，是大蔥的重要病害，還可危害蔥頭、大蒜等。主要為害葉片和花梗，也可為害葉鞘，病斑初為水漬狀小白點，稍有凹陷，后擴大成橢圓形或梭形，呈褐色或暗紫色，周圍常有黃色暈圈。數個病斑愈合成長條形大斑。潮濕時，病部產生同心輪紋狀排列的深褐色或黑灰色霉層，發病重時引起葉、梗枯死或折倒。種株花梗發病率高，常使種子皺縮，不能充分成熟，影響種子產量和質量。近來年也有不少人用組織培養進行快繁，但是用種子進行組織培養，首先碰到的就是污染嚴重的問題。而對種子進行消毒還能減少病蟲害。目前，國內外還沒有公開任何關于用于大蔥組織培養的種子消毒法的相關研究報道。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供用于大蔥組織培養的種子消毒法，其方法對環境無污染，對土壤不會產生危害，能有效殺菌并防止霉變，不會使細菌、病毒產生抗藥性。為實現上述目的，本專利技術采用以下方案：一種用于大蔥組織培養的種子消毒法，包括以下步驟：（1）大蔥種子預處理：在含洗滌劑的溫水中浸泡12-24h。（2）預處理后的種子先用60-70%酒精體表消毒1-5min，用無菌水沖洗3-5次后，再用0.1-0.5%的HgCl2溶液中按10000∶（1-2）的比例添加Tween20消毒10-20min。（3）接種：最后再用無菌水沖洗3次后接種在培養基（MS基本培養基，pH5.86）。（4）在培養基中加入三種殺菌劑：乙酰檸檬酸三丁酯，甲基托布津、代森錳鋅。殺菌劑按重量份數的比例為乙酰檸檬酸三丁酯：甲基托布津：代森錳鋅=1-2：1-2：1-3；（5）將培養基中種子清洗晾干后栽種。本專利技術的優點在于：能夠從源頭處著手，顯著提高大蔥對疾病的抵御能力。具體實施方式以下結合實施例對本專利技術作進一步詳細描述。實施例1：一種用于大蔥組織培養的種子消毒法，包括以下步驟：（1）大蔥種子預處理：在含洗滌劑的溫水中浸泡12h。（2）預處理后的種子先用60%酒精體表消毒1min，用無菌水沖洗3次后，再用0.1%的HgCl2溶液中按10000∶1的比例添加Tween20消毒10min。（3）接種：最后再用無菌水沖洗3次后接種在培養基（MS基本培養基，pH5.86）。（4）在培養基中加入三種殺菌劑：乙酰檸檬酸三丁酯，甲基托布津、代森錳鋅。殺菌劑按重量份數的比例為乙酰檸檬酸三丁酯：甲基托布津：代森錳鋅=1-2：1-2：1-3；（5）將培養基中種子清洗晾干后栽種。實施例2：一種用于大蔥組織培養的種子消毒法，包括以下步驟：（1）大蔥種子預處理：在含洗滌劑的溫水中浸泡15h。（2）預處理后的種子先用62%酒精體表消毒3min，用無菌水沖洗4次后，再用0.2%的HgCl2溶液中按10000∶1.2的比例添加Tween20消毒13min。（3）接種：最后再用無菌水沖洗3次后接種在培養基（MS基本培養基，pH5.86）。（4）在培養基中加入三種殺菌劑：乙酰檸檬酸三丁酯，甲基托布津、代森錳鋅。殺菌劑按重量份數的比例為乙酰檸檬酸三丁酯：甲基托布津：代森錳鋅=1-2：1-2：1-3；（5）將培養基中種子清洗晾干后栽種。實施例3：一種用于大蔥組織培養的種子消毒法，包括以下步驟：（1）大蔥種子預處理：在含洗滌劑的溫水中浸泡20h。（2）預處理后的種子先用65%酒精體表消毒3min，用無菌水沖洗4次后，再用0.4%的HgCl2溶液中按10000∶1.5的比例添加Tween20消毒15min。（3）接種：最后再用無菌水沖洗3次后接種在培養基（MS基本培養基，pH5.86）。（4）在培養基中加入三種殺菌劑：乙酰檸檬酸三丁酯，甲基托布津、代森錳鋅。殺菌劑按重量份數的比例為乙酰檸檬酸三丁酯：甲基托布津：代森錳鋅=1-2：1-2：1-3；乙酰檸檬酸三丁酯能增強代森錳鋅的殺菌和抑制霉變效果。（5）將培養基中種子清洗晾干后栽種。實施例4：一種用于大蔥組織培養的種子消毒法，包括以下步驟：（1）大蔥種子預處理：在含洗滌劑的溫水中浸泡24h。（2）預處理后的種子先用70%酒精體表消毒5min，用無菌水沖洗5次后，再用0.5%的HgCl2溶液中按10000∶2的比例添加Tween20消毒20min。（3）接種：最后再用無菌水沖洗3次后接種在培養基（MS基本培養基，pH5.86）。（4）在培養基中加入三種殺菌劑：乙酰檸檬酸三丁酯，甲基托布津、代森錳鋅。殺菌劑按重量份數的比例為乙酰檸檬酸三丁酯：甲基托布津：代森錳鋅=1-2：1-2：1-3；將培養基中種子清洗晾干后栽種。本專利技術的用于大蔥組織培養的種子消毒的效果：測定指標種子數污染數污染率％實驗組993030.30對照993939.39由表可知，本方法用于大蔥組織培養的種子消毒的效果是很顯著的。以上所述僅為本專利技術的較佳實施例，并不用以限制本專利技術，凡在本專利技術的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本專利技術的保護范圍之內。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種用于大蔥組織培養的種子消毒法，其特征在于包括以下幾個步驟：1）大蔥種子預處理：在含洗滌劑的溫水中浸泡；預處理后的種子先用酒精體表消毒1?5?min，用無菌水沖洗3?5次后，再用0.1?0.5%的?HgCl

【技術特征摘要】
1.一種用于大蔥組織培養的種子消毒法，其特征在于包括以下幾個步驟：1）大蔥種子預處理：在含洗滌劑的溫水中浸泡；預處理后的種子先用酒精體表消毒1-5min，用無菌水沖洗3-5次后，再用0.1-0.5%的HgCl2溶液中按10000∶1-2的比例添加Tween20消毒；2）接種：最后再用無菌水沖洗3次后接種在培養基；3）在培養基中加入三種殺菌劑：乙酰檸檬酸三丁酯、甲基托布津、代森錳鋅；所述的殺菌劑按重量份數的比例為乙酰檸檬酸三丁酯：甲基托布津：代森錳鋅=1-2：1-2：1-3；4）將培養基中種子清洗晾干后栽種。2.根據權利要求1所述的一種用于大蔥組織培養的種子消毒法，其特征在于，步驟1）中，溫水浸泡的溫度...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張毓霞，張睿，
申請(專利權)人：新昌縣鈞國生物技術有限公司，
類型：發明
國別省市：浙江,33