治療失智癥的活性物質、含其的組合物及其制備方法技術

本發明專利技術提供一種治療失智癥的活性物質、其制備方法、含其的醫藥組合物及該醫藥組合物的制備方法。該活性物質的制備方法是透過平板培養、燒瓶培養、發酵槽培養的方式制備，而得到粉末形態的猴頭菇菌絲體活性物質。該猴頭菇菌絲體粉末可進一步以醇類溶劑進行萃取獲得醇萃物，再進一步純化分離，獲得猴頭素A與猴頭素S。

Composition and preparation process thereof containing active substances, the treatment of dementia

This invention provides a preparation method of active substances, for treating dementia and its preparation method, including pharmaceutical compositions and pharmaceutical compositions of the. The preparation method of the active substance is prepared by the method of plate culture, flask culture and fermentation tank culture, and the powder form of Hericium erinaceus mycelium active substance is obtained. The mycelium powder of Hericium erinaceus can be further extracted with alcohol solvent to obtain alcohol extract, and then further purified and separated to obtain Hericium A and Hericium S.

【技術實現步驟摘要】
治療失智癥的活性物質、含其的組合物及其制備方法
本專利技術涉及一種治療失智癥的活性物質、其制備方法、含其的醫藥組合物及該醫藥組合物的制備方法，尤指一種包含猴頭菇菌絲體活性物質的醫藥組合物及其制備方法。
技術介紹
阿茲海默氏癥(Alzheimer’sdisease，AD)隨著社會的人口老化比例增高，罹患失智癥的人口也跟著增加。失智癥并非特指一種疾病，但約半數以上的比例為阿茲海默氏癥。阿茲默氏癥的患者會喪失辨識能力，喪失記憶、失去方向感、改變行為習性、妄想癥、失去自制等等病狀。此疾病最為廣泛被接受的致病原因為類淀粉蛋白質在腦部積累造成神經退化。此疾病主要分為兩大類，一為家族性阿茲海默氏癥，另一則為偶發性阿茲海默氏癥。詳述如下：家族性阿茲海默氏癥為遺傳性疾病，其病患在21號染色體amyloidprecursorprotein(APP)、14號染色體Presenilin1(PS1)、以及1號染色體Presenilin2(PS2)上有突變。上述的基因突變會造成類淀粉蛋白質Aβ42的合成量增加，進而提高擁有該等基因突變者罹患阿茲海默氏癥的機率。偶發性阿茲海默氏癥較為常見，通常好發于65歲以上的老年人，但有少數患者其發病是在65歲以前，就屬于早發性阿茲海默氏癥。類淀粉蛋白質(Amyloidbeta，Aβ)類淀粉蛋白質主要是由穿膜蛋白類淀粉蛋白質前驅物(amyloidprecursorprotein，APP)經由β-分泌酵素(β-secretase)及γ-分泌酵素(γ-secretase)連續切割后，所產生的代謝產物。該代謝產物常見有Aβ40及Aβ42。其中，Aβ42結構為疏水性，容易相互聚集，因此降低對于Aβ42的清除量或是增加Aβ42的生成量，皆會導致有毒性寡聚物(oligomer)的生成，進而增加神經細胞的氧化壓力，造成神經細胞產生發炎反應、神經訊息傳遞異常及鈣離子調節失去平衡等等情況。最終會導致神經細胞啟動凋亡機制，造成認知記憶等功能受損。腦部類淀粉蛋白質降解路徑在正常的生理狀態下，Aβ在一旦生成后會立即被酵素分解，以避免造成Aβ的過度積累，造成腦部神經元的受損。降解Aβ的酵素有胰島素降解酶(insulin-degradingenzyme，IDE)以及腦啡肽酶(Neprilysin又稱為neutralendopeptidase(NEP)或是membranemetallo-endopeptidase(MME))。胰島素降解酶于1994年被學者發現若在高胰島素的生理環境下，胰島素會與Αβ競爭IDE，造成Αβ的降解路徑受阻，使Αβ過度堆積而產生神經毒性，說明胰島素降解酶除了有降解胰島素的能力外，亦能降解Αβ(Kurochkin&Goto，1994)。腦啡肽酶是編碼于MME基因的酵素(因此又稱為membranemetallo-endopeptidase，MME)，其可透過水解勝肽鏈的氨基酸疏水端，使特定的勝肽賀爾蒙去活化。先前研究指出，若減少年老者大腦中生長激素抑制素(somatostatin)的產生，則會造成Neprilysin的活性被抑制，進而促成未經處理的Αβ的積累。Neprilysin在大腦中的表現量并不高，但其相關于突觸可塑性及記憶等功能，因此對大腦的生理功能與作用物質有一定的影響。阿茲海默治療藥物目前的阿茲海默氏癥的治療，針對病因、認知功能或情緒癥狀的控制有不同的藥物治療，然皆僅能暫時改善阿茲海默氏癥的病狀，但該些藥物無法有效治愈阿茲海默癥。詳述如下：病因性治療目的在于防止或減少神經纖維糾結及類淀粉蛋白質的形成，但目前仍無有效控制藥物或方法。認知功能藥物是抗乙酰膽堿水解酵素，針對中重度的患者，目前衛生署許可的藥物有愛憶欣(aricept)，憶思能(exelon)、利憶靈(reminyl)、憶必佳(ebixa)。由于大多數的失智癥患者在病程中會伴隨行為或情緒等癥況，例如失眠、易怒、幻覺、妄想等，因此有行為及情緒癥狀的治療，該等治療藥物是安眠藥、抗郁劑、情緒安定劑及抗精神藥物、抗癲癇藥物等。但其效益并不高，且有增加死亡率的風險，因此并不建議施用。猴頭菇根據《中國藥用真菌》的記載：猴頭菇味甘、性平、能利五臟、助消化、滋補、對消化不良、神經衰退與十二指腸潰瘍及胃潰瘍有良好的功效。由此可知在古代醫學上已知猴頭菇具有治療疾病的效果，為藥膳兩用菌。猴頭菇學名Hericiumerinaceus，其分類于真菌界(Fungi)、真菌門(Eumycota)、擔子菌亞門(Basidiomycotina)、擔子菌綱(Basidiomycetes)、非褶菌目(Aphyllophorales)、齒菌科(Hydnaceae)、猴頭菌亞科(Hericioideae)中的猴頭菌屬(Hericium)。猴頭菇在外型上，其子實體外形由長條粗糙的突起組成，而成軟圓形狀，新鮮時成白色，干燥過后則變為黃褐色。猴頭菇子實體或菌絲體中抽出物中含有醣類(Wangetal.,2001；Yangetal.,2003)、猴頭素(Erinacines)(Saitoetal.,1998；Kenmokuetal.,2002；Kenmokuetal.,2004；Watanabeetal.,2007；WatanabeandNakada,2008；Leeetal.,2014；Lietal.,2014)、雙亞麻油酸磷酯乙烯胺(dilinoleoyl-phosphatidylethanolamine，DLPE)(Nagaietal.,2006)、胺基酸、蛋白質及微量元素(Jiaetal.,2004)。在過去文獻記載中，不乏是猴頭菇多醣體具有免疫調解、降血脂、降血糖或是抑制胃部發炎及胃癌的產生的效果。猴頭菇是藥膳兩用菌。研究證實猴頭菇多醣(hericiumerinaceuspolysaccharide)具有抑制腫瘤細胞生長，以RAW264.7巨噬細胞為免疫調解探討，發現猴頭菇水萃取物10g/ml可誘導NO(nitricoxide)、IL1(interleukin-1)表現，且證實是透過增加NF-Kb(nuclearfactorkB)結合活性，以達到免疫調解作用(Son,C.G.,etal.Int.Immunol.,1363-13692006)，且猴頭菇水萃取物濃度為10及100g/ml，亦可增進脾臟細胞的活性，誘導INF-γ(interferon-gamma)、IL-12(interleukin-12)的表現，進而活化自然殺手細胞(Yim,M.Hetal.,ActaPharmacol901-9072007)。猴頭菇含多勝肽類、酚類及其衍生物，除了可增加體內免疫功能，提高淋巴細胞活性，可誘導細胞因子及產生抗體。臨床試驗中，給予猴頭菇藥片于慢性胃炎，消化性潰瘍病人每天三次，一次3片持續60天，慢性胃炎病人痊愈率為88.89％，消化性潰瘍病人痊愈率為84.62％，總療效可達87.5％。(潘超雄等人海南醫學院學報第27卷，第六期，260-2612004)。目前未有文獻指出猴頭菇多醣或其二級代謝物可以治療阿茲海默癥的相關機制探討。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種猴頭菇活性物質的制備方法，其可用于制成治療失智癥的活性物質。為達到前述目的，本專利技術提供的猴頭菇活性物本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種治療失智癥的猴頭菇菌絲體活性物質的制備方法，包含下列步驟：(a)取猴頭菇菌絲體接種于平板上，于溫度15?32℃下培養8?16天；(b)將步驟(a)培養的猴頭菇菌絲體接種于燒瓶培養基，并于溫度20?30℃及pH值4.5?6.5下，培養3?5天；(c)將步驟(b)培養的猴頭菇菌絲體接種于發酵槽培養基，并于溫度24?32℃及pH值4.5?5.5下，培養8?16天，取得猴頭菇菌絲體發酵液；(d)將步驟(c)所述的猴頭菇菌絲體發酵液進行干燥，獲得猴頭菇菌絲體粉末。

【技術特征摘要】
2015.12.14 TW 1041418971.一種治療失智癥的猴頭菇菌絲體活性物質的制備方法，包含下列步驟：(a)取猴頭菇菌絲體接種于平板上，于溫度15-32℃下培養8-16天；(b)將步驟(a)培養的猴頭菇菌絲體接種于燒瓶培養基，并于溫度20-30℃及pH值4.5-6.5下，培養3-5天；(c)將步驟(b)培養的猴頭菇菌絲體接種于發酵槽培養基，并于溫度24-32℃及pH值4.5-5.5下，培養8-16天，取得猴頭菇菌絲體發酵液；(d)將步驟(c)所述的猴頭菇菌絲體發酵液進行干燥，獲得猴頭菇菌絲體粉末。2.如權利要求1所述的制備方法，其中，步驟(b)的培養為震蕩培養，其震蕩速率為100-250rpm。3.如權利要求1所述的制備方法，其中，步驟(c)中發酵槽的槽壓為0.8-1.2kg/cm2，攪拌速率為10-150rpm，且以通氣速率為0.5-1vvm通入氣體至發酵槽。4.如權利要求3所述的制備方法，其中，所述氣體為空氣、氧氣、二氧化碳、氮氣或其組合。5.如權利要求1所述的制備方法，其中，步驟(b)與步驟(c)中使用相同的培養基。6.如權利要求5所述的制備方法，其中，所述培養基包含綜合性碳氮源、動植物來源蛋白或其水解物、無機鹽類、醣類、酵母、麥芽抽出物、消泡劑或其組合。7.如權利要求6所述的制備方法，其中，所述綜合性碳氮源為谷類或豆類；所述無機鹽類為硫酸鹽類或磷酸鹽類。8.如權利要求1所述的制備方法，其中，將步驟(d)的所述猴頭菇菌絲體粉末進一步利用醇類溶劑萃取，獲得猴頭菇菌絲體醇萃物。9.如權利要求8所述的制備方法，其中，所述醇類溶劑為30-100v/v％的乙醇或30-100v/v％的甲醇。10.如權利要求8所述的制備方法，其中，將所述猴頭菇菌絲體醇萃物進一步利用水及乙酸乙酯萃取，再以管柱色層分析，獲得猴...

【專利技術屬性】
技術研發人員：蕭永基，陳勁初，李麗雅，陳婉屏，
申請(專利權)人：葡萄王生技股份有限公司，
類型：發明
國別省市：中國臺灣,71