一種高純度花椒麻味物質的制備方法技術

本發明專利技術屬于花椒的精深加工與利用領域，具體涉及一種從花椒油樹脂中提取制備高純度花椒麻味物質的方法。本發明專利技術所提供的制備方法，包括如下步驟：以花椒油樹脂為原料，加入硅膠，充分攪拌，混合均勻；所得混合物乙醚提取，然后固液分離；所得固相物甲醇浸提，然后固液分離，所得液相物脫溶，獲得花椒麻味物質粗提物；所得粗提物中石油醚浸提，回流浸提，然后固液分離，所得固相物再加入一定量石油醚繼續回流浸提，然后固液分離；所得液相物置于低溫環境冷凍結晶，即得花椒麻味物質。本發明專利技術所提供的從花椒油樹脂中提取制備高純度花椒麻味物質的方法避免了傳統層析柱過程，制備量不受限制，便于實現規模化生產，且制備獲得的花椒麻味物質的純度很高。

Method for preparing high purity Zanthoxylum bungeanum flavour substance

The deep processing and utilization of the invention belongs to the field of Chinese prickly ash, in particular relates to a method for extracting from oleoresin in preparation of high purity numb taste substances. The preparation method provided by the invention comprises the following steps: to pepper oil resin as raw material, adding silica gel, stir evenly mixed; the mixture of ether extraction, and solid-liquid separation; the solid phase methanol extraction, and solid-liquid separation, the liquid phase precipitation, get numb taste components of crude extract; the crude extract of petroleum ether extraction, reflux extraction, and solid-liquid separation, the solid phase by adding a certain amount of petroleum ether to reflux extraction, and solid-liquid separation; in low temperature freezing crystallization liquid phase is obtained, numb taste components. The present invention provides from the oleoresin extraction method for preparation of high purity numb taste components to avoid the traditional chromatography process, the preparation is not restricted, easy to realize large-scale production, the purity of numb taste components and the preparation was very high.

【技術實現步驟摘要】
一種高純度花椒麻味物質的制備方法
本專利技術屬于花椒的精深加工與利用領域，具體涉及一種從花椒油樹脂中提取制備高純度花椒麻味物質的方法。
技術介紹
花椒作為我國重要的藥食兩用材料，已具有兩千多年的歷史，其以獨特的辛麻味，廣泛用于川菜及火鍋等烹調中，被譽為“八大調味品”之一。花椒麻味物質是一類以山椒素及其同系物為代表的不飽和脂肪酸酰胺類物質，具有強烈的刺激性，是花椒產生麻味的物質基礎，也是衡量花椒品質的重要指標之一。此外，花椒麻味物質還具有麻醉、鎮痛、抗癌、抗自由基、降低血清膽固醇等生理活性，因此具有廣闊市場前景。但是，由于花椒麻味物質成分復雜，且其具有的不飽和雙鍵結構極不穩定，暴露于空氣中幾分鐘內即氧化成黃色粘稠狀物質，成為了制約大規模制備高純度花椒麻味物質的技術瓶頸。因此未見有市售的花椒麻味物質標準品，給花椒及其制品中麻味物質的定量評價帶來了一定困難，同時也限制了其在保健食品級醫藥領域的應用。花椒麻味物質提取制備的方法較多，主要有水提法、柱層析法、超臨界二氧化碳法、分子印跡技術等，但他們在工業應用中均存在一定的局限性。例如CN1305742A提供了一種采用高溫高壓水煮發提取制備花椒麻味物質的方法，但該法所提取得到山椒素等麻味物質，還含有茵芋堿、青椒堿等生物堿類雜質，純度低，無法作為花椒麻味物質標準品。CN102690208A提供了一種從花椒油中提取羥基山椒素的方法，該法獲得的花椒麻味物質雖純度高，但其對設備要求高、規模小，僅限于實驗性研究，難以實現規模化生產。CN1488289A公布了一種采用超臨界二氧化碳技術分離純化花椒麻味物質的方法，該法對設備要求高，且操作繁瑣，所獲得的花椒麻味物質仍然無法作為標準品。采用硅膠吸附結合溶劑提取法分離純化花椒麻味物質，與文獻報道及公開的專利相比，直接采用硅膠吸附樣品后，并根據花椒麻味物質的化學性質，采用不同極性的溶劑進行洗脫、除雜，避免了傳統方法的成本高、規模小、分離時間長等限制。此種方法提取制備花椒麻味物質具有操作簡便，無需專門的設備、上樣量不受限制，且純度高，非常適合工業化大規模生產。
技術實現思路
鑒于以上所述現有技術的缺點，本專利技術的目的在于提供一種大規模高純度花椒麻味物質的制備方法，用于解決現有技術中的問題。所述大規模高純度花椒麻味物質的制備方法以花椒油樹脂為原料，采用硅膠吸附后，再依次加入無水乙醚去雜、甲醇洗脫、石油醚純化，冷凍結晶、氮氣干燥，獲得高純度花椒麻味物質，可為花椒麻味物質生理功效評價及品質評價提供標準品，并可適用于工業化生產。為實現上述目的及其他相關目的，本專利技術提供一種高純度花椒麻味物質的制備方法，包括如下步驟：1)以花椒油樹脂為原料，加入硅膠，充分攪拌，混合均勻；本專利技術中的花椒油樹脂可使用各種市售的花椒油樹脂，一般是采用萃取法從花椒屬植物(拉丁名：ZanthoxylumL.)果實中提取的含有全部風味特征的油狀制品。優選的，所述步驟1中，花椒油樹脂中花椒麻味物質的含量為20～30wt％。花椒麻味物質是花椒屬植物中呈現麻味的所有物質的總稱，主要是由一類不飽和脂肪族酰胺組成，是花椒屬植物呈現麻味的物質基礎，其含量的檢測方法可參照DB50/T321-2009。優選的，所述步驟1中，硅膠為薄層層析用硅膠。本專利技術中的薄層層析用硅膠可使用市售的薄層層析用硅膠。薄層層析用硅膠一般是白色粒狀粗孔硅膠，不溶于水和有機溶劑，在空氣中吸潮，現有技術中一般是將粗孔硅膠粉碎至40～200目，經篩選，鹽酸浸泡，水洗，烘干(含水量≤5％)制得。優選的，所述步驟1中，花椒油樹脂與硅膠的質量之比為1：1～3。優選的，所述步驟1中，所述硅膠為經活化的硅膠，活化硅膠的具體方法為：100～120℃活化0.5～1.5h。2)在步驟1所得混合物中加入乙醚提取，然后固液分離；優選的，所述步驟2中，乙醚為無水乙醚。優選的，所述步驟2中，乙醚與步驟1所得混合物的比例為每4～8ml乙醚對應1g混合物。優選的，所述步驟2中，提取的具體條件為：密閉環境靜置1.5～2.5h，靜置過程中間歇攪拌，在本專利技術一實施例中，每隔20～40min攪拌一次。優選的，所述步驟2中，固液分離后固相物進一步干燥除去殘留的乙醚。本領域技術人員可選擇合適的條件對所得固相物進行干燥以除去殘留的乙醚，在本專利技術一實施例中，將固相物置于通風處以揮干殘留的乙醚。3)將步驟2分離所得固相物中加入甲醇浸提，然后固液分離，所得液相物脫溶，獲得花椒麻味物質粗提物；優選的，所述步驟3中，甲醇與固相物的比例為每2～6ml甲醇對應1g固相物。優選的，所述步驟3中，浸提的具體條件為：浸提溫度為45～55℃，浸提時間為6～12h。本領域技術人員可選擇合適的方法和條件對步驟3中的液相物脫溶，在本專利技術一實施例中，使用真空條件下蒸發回收溶劑(減壓蒸餾)的方式進行脫溶，具體條件為：溫度：40～50℃；真空度：0.03～0.08MPa。脫溶過程中回收的溶劑可循環再使用。4)在步驟3所得粗提物中加入石油醚浸提，回流浸提20～40min，然后固液分離，所得固相物再加入一定量石油醚繼續回流浸提12～18h，然后固液分離；所述步驟4中，在步驟3所得粗提物中加入石油醚浸提，回流浸提0.5h左右的目的是去除生物堿、多酚等雜質。優選的，所述步驟4中，石油醚為30～60℃沸程的石油醚。優選的，所述步驟4中，在步驟3所得粗提物中加入石油醚浸提時，石油醚與固相物的比例為每1～3ml石油醚對應1g固相物。優選的，所述步驟4中，所得固相物再加入一定量石油醚繼續回流浸提時，石油醚與固相物的比例為每1～3ml石油醚對應1g固相物。5)將步驟4所得液相物置于低溫環境冷凍結晶，分離出結晶物并干燥即得所述花椒麻味物質。優選的，所述低溫環境冷凍結晶時的溫度為-80℃～-18℃。本領域技術人員可選擇合適的條件對所得結晶物進行干燥，在本專利技術一實施例中，將結晶物通入低溫高純氮氣干燥以獲得最終的晶體產物。通過本專利技術所提供的高純度花椒麻味物質的制備方法制備獲得的花椒麻味物質其HPLC-MS鑒定其分子量為263及289，鑒定為山椒素類成分(圖1)，其純度大于97％(圖2)。目前發現的花椒麻味物質至少有25種以上，來源于于國內外不同花椒品種和產地，本專利技術主要以我國大量栽培和種植的紅花椒(紅椒，ZanthoxylumbungeanumMaxim.)和青花椒(ZanthoxylumschinifoliumSieb.etZucc)為原料的，其中,(2E,4E,6Z,10E)-2’-羥基-N-異丁基-2,4,6,10-十二烷四烯酰胺、(2E,4E,6E,10E)-2’-羥基-N-異丁基-2,4,6,10-十二烷四烯酰胺、(2E,4E,6Z,10E,12E)-2’-羥基-N-異丁基-2,4,6,10,12-十四烷五烯酰胺根據這三種成分是最大量的麻味成分，是主體成分，因此，用本方法能簡單快速獲得高純度的花椒麻味成分，且制備獲得的這三種物質對花椒麻味物質具有很強的代表性，可以用于花椒屬植物的品質評定。如上所述，本專利技術的一種高純度花椒麻味物質的制備方法，該方法包括花椒麻味物質的吸附、無水乙醚脫油、脫色、甲醇洗脫、石油醚純化、冷凍結晶以及氮氣干燥工段。具有以下有益效果：(1)本專利技術提供的一種高純度花椒麻味物質的提取本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種高純度花椒麻味物質的制備方法，包括如下步驟：1)以花椒油樹脂為原料，加入硅膠，充分攪拌，混合均勻；2)在步驟1所得混合物中加入乙醚提取，然后固液分離；3)將步驟2分離所得固相物中加入甲醇浸提，然后固液分離，所得液相物脫溶，獲得花椒麻味物質粗提物；4)在步驟3所得粗提物中加入石油醚浸提，回流浸提20～40min，然后固液分離，所得固相物再加入一定量石油醚繼續回流浸提12～18h，然后固液分離；5)將步驟4所得液相物置于低溫環境冷凍結晶，分離出結晶物并干燥即得所述花椒麻味物質。

【技術特征摘要】
1.一種高純度花椒麻味物質的制備方法，包括如下步驟：1)以花椒油樹脂為原料，加入硅膠，充分攪拌，混合均勻；2)在步驟1所得混合物中加入乙醚提取，然后固液分離；3)將步驟2分離所得固相物中加入甲醇浸提，然后固液分離，所得液相物脫溶，獲得花椒麻味物質粗提物；4)在步驟3所得粗提物中加入石油醚浸提，回流浸提20～40min，然后固液分離，所得固相物再加入一定量石油醚繼續回流浸提12～18h，然后固液分離；5)將步驟4所得液相物置于低溫環境冷凍結晶，分離出結晶物并干燥即得所述花椒麻味物質。2.如權利要求1所述的一種高純度花椒麻味物質的制備方法，其特征在于，所述步驟1中，花椒油樹脂中花椒麻味物質的含量為20～30wt％；和/或，所述步驟1中，硅膠為薄層層析用硅膠；和/或，所述步驟1中，花椒油樹脂與硅膠的質量之比為1：1～3；和/或，所述步驟1中，所述硅膠為經活化的硅膠，活化硅膠的具體方法為：100～120℃活化0.5～1.5h。3.如權利要求1所述的一種高純度花椒麻味物質的制備方法，其特征...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉雄，游玉明，闞建全，
申請(專利權)人：西南大學，
類型：發明
國別省市：重慶,50