一種檢測細菌耐藥基因的基因芯片試劑盒制造技術

本發明專利技術公開了一種檢測細菌耐藥基因的基因芯片試劑盒。本發明專利技術所提供的試劑盒中含有用于檢測細菌耐藥基因的引物對組，由13個引物對組成，其序列為序列表中序列1-26；同時所述試劑盒中還含有固定有序列27-39所示13個單鏈DNA探針的雜交芯片。本發明專利技術提供的試劑盒支持高通量、快速、準確地檢測多個細菌耐藥基因，對中國人群進行篩查，能有效地起到準確診斷、耐藥溯源、耐藥控制等作用，從而抗生素使用量，減少耐藥產生。

Gene chip reagent kit for detecting bacterial resistance gene

The invention discloses a gene chip reagent box for detecting bacterial resistance genes. The kit provided by the invention contains bacteria for detection of drug resistance genes of the primer pairs, by 13 primers, the sequence sequence in sequence table 1-26; at the same time the kit also contains a fixed sequence of 27-39 shows 13 single stranded DNA probe hybridization chip. The kit provided by the invention supports high-throughput, rapid and accurate detection of multiple antibiotic resistance gene, screening for Chinese people, can effectively play the accurate diagnosis and drug resistance, resistance control traceability, so as to reduce the usage of antibiotics, drug resistance.

【技術實現步驟摘要】
一種檢測細菌耐藥基因的基因芯片試劑盒
本專利技術屬于核酸擴增
，涉及一種檢測細菌耐藥基因的基因芯片試劑盒。
技術介紹
細菌耐藥基因檢測具有重要臨床意義。臨床診斷中存在抗生素的用量大、起點高、種類較為隨意的缺陷，從而導致耐藥菌種的產生和流行。目前用于耐藥基因檢測仍較為傳統，大致有生理生化試驗、血清學試驗、藥敏試驗等后加以聚合酶鏈式反應(PCR)擴增相應基因的方法，而上述檢測方法需要時間長，方法操作煩瑣、報告結果慢、通量低，且往往先鑒定出菌種，才能相應的進行藥敏等后續試驗，因而難以適應臨床治療的需要。因此開發快速高通量的分子診斷技術檢測，可以協助快速診斷，指導及時準確用藥。生物芯片技術是近年來在生命科學領域中迅速發展并成熟的一項高新技術，主要是通過微加工技術和微電子技術在固相芯片表面構建的微型生物化學分析系統，可實現對細胞、蛋白質、核酸以及其他多種生物成份的準確、快速、大量信息的檢測。生物芯片的主要特點是高通量、微型化和自動化。
技術實現思路
本專利技術的第一個目的是提供一種用于檢測細菌耐藥基因的引物對組。本專利技術所提供的用于檢測細菌耐藥基因的引物對組，由如下13個引物對組成：1)如下(a1)或(a2)所示的引物對，記為引物對1：(a1)由序列表中序列1和序列2所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(a2)由將序列表中序列1和序列2經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(a1)中所述引物對功能相同的引物對；2)如下(b1)或(b2)所示的引物對，記為引物對2：(b1)由序列表中序列3和序列4所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(b2)由將序列表中序列3和序列4經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(b1)中所述引物對功能相同的引物對；3)如下(c1)或(c2)所示的引物對，記為引物對3：(c1)由序列表中序列5和序列6所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(c2)由將序列表中序列5和序列6經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(c1)中所述引物對功能相同的引物對；4)如下(d1)或(d2)所示的引物對，記為引物對4：(d1)由序列表中序列7和序列8所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(d2)由將序列表中序列7和序列8經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(d1)中所述引物對功能相同的引物對；5)如下(e1)或(e2)所示的引物對，記為引物對5：(e1)由序列表中序列9和序列10所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(e2)由將序列表中序列9和序列10經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(e1)中所述引物對功能相同的引物對；6)如下(f1)或(f2)所示的引物對，記為引物對6：(f1)由序列表中序列11和序列12所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(f2)由將序列表中序列11和序列12經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(f1)中所述引物對功能相同的引物對；7)如下(g1)或(g2)所示的引物對，記為引物對7：(g1)由序列表中序列13和序列14所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(g2)由將序列表中序列13和序列14經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(g1)中所述引物對功能相同的引物對；8)如下(h1)或(h2)所示的引物對，記為引物對8：(h1)由序列表中序列15和序列16所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(h2)由將序列表中序列15和序列16經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(h1)中所述引物對功能相同的引物對；9)如下(i1)或(i2)所示的引物對，記為引物對9：(i1)由序列表中序列17和序列18所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(i2)由將序列表中序列17和序列18經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(i1)中所述引物對功能相同的引物對；10)如下(j1)或(j2)所示的引物對，記為引物對10：(j1)由序列表中序列19和序列20所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(j2)由將序列表中序列19和序列20經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(j1)中所述引物對功能相同的引物對；11)如下(k1)或(k2)所示的引物對，記為引物對11：(k1)由序列表中序列21和序列22所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(k2)由將序列表中序列21和序列22經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(k1)中所述引物對功能相同的引物對；12)如下(l1)或(l2)所示的引物對，記為引物對12：(l1)由序列表中序列23和序列24所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(l2)由將序列表中序列23和序列24經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(l1)中所述引物對功能相同的引物對；13)如下(m1)或(m2)所示的引物對，記為引物對13：(m1)由序列表中序列25和序列26所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(m2)由將序列表中序列25和序列26經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(m1)中所述引物對功能相同的引物對。其中，所述引物對1用于擴增mecA基因；所述引物對2用于擴增vanA基因；所述引物對3用于擴增vanB基因；所述引物對4用于擴增blaDHA-1基因；所述引物對5用于擴增blaOXA-23基因；所述引物對6用于擴增blaOXA-24基因；所述引物對7用于擴增blaOXA-58基因；所述引物對8用于擴增blaKPC-1基因；所述引物對9用于擴增blaIMP-4基因；所述引物對10用于擴增blaVIM-8基因；所述引物對11用于擴增blaNDM-1基因；所述引物對12用于擴增blaCTX-M-1基因；所述引物對13用于擴增blaCTX-M-9基因。本專利技術的第二個目的是提供一種用于檢測細菌耐藥基因的成套單鏈DNA。本專利技術所提供的用于檢測細菌耐藥基因的成套單鏈DNA，具體由探針組和所述引物對組組成；所述探針組由如下13個單鏈DNA探針組成：序列表中序列27所示的單鏈DNA探針1；序列表中序列28所示的單鏈DNA探針2；序列表中序列29所示的單鏈DNA探針3；序列表中序列30所示的單鏈DNA探針4；序列表中序列31所示的單鏈DNA探針5；序列表中序列32所示的單鏈DNA探針6；序列表中序列33所示的單鏈DNA探針7；序列表中序列34所示的單鏈DNA探針8；序列表中序列35所示的單鏈DNA探針9；序列表中序列36所示的單鏈DNA探針10；序列表中序列37所示的單鏈DNA探針11本文檔來自技高網...

【技術保護點】
用于檢測細菌耐藥基因的引物對組，由如下13個引物對組成：1)如下(a1)或(a2)所示的引物對，記為引物對1：(a1)由序列表中序列1和序列2所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(a2)由將序列表中序列1和序列2經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(a1)中所述引物對功能相同的引物對；2)如下(b1)或(b2)所示的引物對，記為引物對2：(b1)由序列表中序列3和序列4所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(b2)由將序列表中序列3和序列4經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(b1)中所述引物對功能相同的引物對；3)如下(c1)或(c2)所示的引物對，記為引物對3：(c1)由序列表中序列5和序列6所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(c2)由將序列表中序列5和序列6經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(c1)中所述引物對功能相同的引物對；4)如下(d1)或(d2)所示的引物對，記為引物對4：(d1)由序列表中序列7和序列8所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(d2)由將序列表中序列7和序列8經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(d1)中所述引物對功能相同的引物對；5)如下(e1)或(e2)所示的引物對，記為引物對5：(e1)由序列表中序列9和序列10所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(e2)由將序列表中序列9和序列10經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(e1)中所述引物對功能相同的引物對；6)如下(f1)或(f2)所示的引物對，記為引物對6：(f1)由序列表中序列11和序列12所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(f2)由將序列表中序列11和序列12經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(f1)中所述引物對功能相同的引物對；7)如下(g1)或(g2)所示的引物對，記為引物對7：(g1)由序列表中序列13和序列14所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(g2)由將序列表中序列13和序列14經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(g1)中所述引物對功能相同的引物對；8)如下(h1)或(h2)所示的引物對，記為引物對8：(h1)由序列表中序列15和序列16所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(h2)由將序列表中序列15和序列16經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(h1)中所述引物對功能相同的引物對；9)如下(i1)或(i2)所示的引物對，記為引物對9：(i1)由序列表中序列17和序列18所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(i2)由將序列表中序列17和序列18經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(i1)中所述引物對功能相同的引物對；10)如下(j1)或(j2)所示的引物對，記為引物對10：(j1)由序列表中序列19和序列20所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(j2)由將序列表中序列19和序列20經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(j1)中所述引物對功能相同的引物對；11)如下(k1)或(k2)所示的引物對，記為引物對11：(k1)由序列表中序列21和序列22所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(k2)由將序列表中序列21和序列22經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(k1)中所述引物對功能相同的引物對；12)如下(l1)或(l2)所示的引物對，記為引物對12：(l1)由序列表中序列23和序列24所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(l2)由將序列表中序列23和序列24經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(l1)中所述引物對功能相同的引物對；13)如下(m1)或(m2)所示的引物對，記為引物對13：(m1)由序列表中序列25和序列26所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(m2)由將序列表中序列25和序列26經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(m1)中所述引物對功能相同的引物對。...

【技術特征摘要】
1.用于檢測細菌耐藥基因的引物對組，由如下13個引物對組成：1)如下(a1)或(a2)所示的引物對，記為引物對1：(a1)由序列表中序列1和序列2所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(a2)由將序列表中序列1和序列2經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(a1)中所述引物對功能相同的引物對；2)如下(b1)或(b2)所示的引物對，記為引物對2：(b1)由序列表中序列3和序列4所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(b2)由將序列表中序列3和序列4經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(b1)中所述引物對功能相同的引物對；3)如下(c1)或(c2)所示的引物對，記為引物對3：(c1)由序列表中序列5和序列6所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(c2)由將序列表中序列5和序列6經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(c1)中所述引物對功能相同的引物對；4)如下(d1)或(d2)所示的引物對，記為引物對4：(d1)由序列表中序列7和序列8所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(d2)由將序列表中序列7和序列8經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(d1)中所述引物對功能相同的引物對；5)如下(e1)或(e2)所示的引物對，記為引物對5：(e1)由序列表中序列9和序列10所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(e2)由將序列表中序列9和序列10經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(e1)中所述引物對功能相同的引物對；6)如下(f1)或(f2)所示的引物對，記為引物對6：(f1)由序列表中序列11和序列12所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(f2)由將序列表中序列11和序列12經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(f1)中所述引物對功能相同的引物對；7)如下(g1)或(g2)所示的引物對，記為引物對7：(g1)由序列表中序列13和序列14所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(g2)由將序列表中序列13和序列14經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(g1)中所述引物對功能相同的引物對；8)如下(h1)或(h2)所示的引物對，記為引物對8：(h1)由序列表中序列15和序列16所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(h2)由將序列表中序列15和序列16經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(h1)中所述引物對功能相同的引物對；9)如下(i1)或(i2)所示的引物對，記為引物對9：(i1)由序列表中序列17和序列18所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(i2)由將序列表中序列17和序列18經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(i1)中所述引物對功能相同的引物對；10)如下(j1)或(j2)所示的引物對，記為引物對10：(j1)由序列表中序列19和序列20所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(j2)由將序列表中序列19和序列20經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(j1)中所述引物對功能相同的引物對；11)如下(k1)或(k2)所示的引物對，記為引物對11：(k1)由序列表中序列21和序列22所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(k2)由將序列表中序列21和序列22經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(k1)中所述引物對功能相同的引物對；12)如下(l1)或(l2)所示的引物對，記為引物對12：(l1)由序列表中序列23和序列24所示的兩條單鏈DNA分子組成的引物對；(l2)由將序列表中序列23和序列24經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后所得序列所示的兩條單鏈DNA分子組成的，且與(l1)中所述...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張巖，王輝，姜可偉，王杉，
申請(專利權)人：博奧生物集團有限公司，
類型：發明
國別省市：北京,11