乙酰基澳澤蘭素在制備抗腫瘤藥物增敏劑中的應用制造技術

本發(fā)明專利技術屬于細胞生物學和醫(yī)藥領域，涉及乙酰基澳澤蘭素在制備抗腫瘤藥物增敏劑中的應用。乙酰基澳澤蘭素是天然產物，具有逆轉腫瘤細胞多藥耐藥的作用，可以作為腫瘤多藥耐藥的逆轉劑；乙酰基澳澤蘭素還具有增加腫瘤多藥耐藥細胞對抗腫瘤藥物敏感性的作用，可以作為化療增敏劑使用。本發(fā)明專利技術還提供了抗腫瘤藥物和乙酰基澳澤蘭素聯合使用的藥物組合物抑制腫瘤多藥耐藥細胞增殖的方法。本發(fā)明專利技術中的小分子化合物乙酰基澳澤蘭素作為新的抗腫瘤藥物或者其輔助成分進行開發(fā)，抑瘤效果明顯，綠色環(huán)保，將為治療和治愈腫瘤提供了一種新的途徑和手段。

The application of acetyl - chitosan in preparation of antitumor drug sensitizer

The invention belongs to the field of cell biology and medicine, and relates to the application of an acetyl antibiotic in the preparation of an antineoplastic drug sensitizer. Acetyl Macao Eupatorin is a natural product, can reverse the multidrug resistance of tumor cells, can be used as modulators of multidrug resistance; acetyl Macao Eupatorin has increased multidrug resistance of tumor cells against tumor drug sensitivity, can be used as a chemotherapy sensitizer. The invention also provides a method for inhibiting the proliferation of tumor multidrug resistant cells by a combination of an antineoplastic drug and an acetyl antibiotic. The invention of the small molecular compound acetyl Macao Eupatorin as new anticancer drugs or their auxiliary components for development, anti-tumor effect, green environmental protection, will provide a new way and method to treat and cure cancer.

【技術實現步驟摘要】
乙酰基澳澤蘭素在制備抗腫瘤藥物增敏劑中的應用
本專利技術屬于細胞生物學和醫(yī)藥領域領域，具體而言，本專利技術涉及乙酰基澳澤蘭素的新用途。本專利技術還涉及相應的藥物組合物及其應用方法。
技術介紹
腫瘤是機體在各種致癌因素作用下，局部組織的某一個細胞在基因水平上失去對其生長的正常調控，導致其克隆性異常增生而形成的異常病變。我國的腫瘤病例數相當龐大，有資料顯示占全世界病例數的55％。良性腫瘤對機體的影響較小，主要表現為局部壓迫和阻塞癥狀。惡性腫瘤由于分化不成熟、生長較快，浸潤破壞器官的結構和功能，并可發(fā)生轉移，因而對機體影響嚴重。惡性腫瘤除可引起與上述良性腫瘤相似的局部壓迫和阻塞癥狀外，還可有發(fā)熱、頑固性疼痛，晚期可出現嚴重消瘦、乏力、貧血和全身衰竭的狀態(tài)。中醫(yī)認為，癌癥的起因首先是人體內陰陽平衡，組織細胞在不同的致癌因素長期作用下，細胞突變而引起的。其實癌組織也是人體的一部分，只有在人本陰陽平衡失調，五行生克乘侮發(fā)生變化的前提下，人體的免疫監(jiān)控系統才會對其失去監(jiān)控，任其發(fā)展。中草藥能夠以調理氣血、調整陰陽平衡、維持正常生命體征而保命；以培補正氣、產生抗體，清理"毒源"而治本。因而，中草藥提取物成為治療腫瘤一個重要方向。乙酰基澳澤蘭素是甜葉菊的提取物。甜葉菊，是一種多年生菊科草本植物，葉片中含有菊糖苷，其甜度為蔗糖的150～300倍，是一種低熱量、高甜度的天然甜味劑，是食品及藥品工業(yè)的原料之一。國外已用來代替糖精做低熱食品，不但無副作用，而且能治療某些疾病，如治糖尿病，調節(jié)血壓、軟化血管、降低血脂、降血糖、抑菌止血、鎮(zhèn)痛、減肥養(yǎng)顏、養(yǎng)陰生津、幫助消化，促進胰腺、脾胃功能和清熱解毒。對肥胖癥、心臟病、小兒蟲齒等也有療效，并有促進新陳代謝，強健身體的作用。乙酰基澳澤蘭素是天然產物，生物利用度高、性質比較穩(wěn)定,具有臨床使用價值。隨著人們對其的化學和生物學研究的深入,其分子作用機制將逐步明確,這將進一步推動此類化合物的化學結構修飾和構效關系研究。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供乙酰基澳澤蘭素的新的藥物用途。本專利技術的目的是提供一種抗腫瘤藥物增敏劑。一方面，本專利技術提供了乙酰基澳澤蘭素在制備抗腫瘤藥物增敏劑中的應用。其中，乙酰基澳澤蘭素的英文全稱為acetyl-austroinulin，其結構如式(Ⅰ)所示。所述的腫瘤包括口腔癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、宮頸癌、結腸癌或胰腺癌。所述的抗腫瘤藥物是長春新堿、柔紅霉素、紫杉醇或者5-氟尿嘧啶。乙酰基澳澤蘭素可以作為腫瘤多藥耐藥逆轉劑。另一方面，本專利技術提供了一種抗腫瘤藥物組合物，所述的抗腫瘤藥物組合物的有效成分是抗腫瘤藥物和乙酰基澳澤蘭素。所述的抗腫瘤藥物是細胞周期特異性藥物或者細胞周期非特異性藥物。所述的抗腫瘤藥物是長春新堿、柔紅霉素、紫杉醇或者5-氟尿嘧啶。本專利技術還提供了一種抑制體外腫瘤細胞生長增殖的方法，即在腫瘤細胞的培養(yǎng)基中加入乙酰基澳澤蘭素和抗腫瘤藥物。其中，加入乙酰基澳澤蘭素的終濃度為1-100μmol/L。所述的腫瘤包括口腔癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、宮頸癌或者胰腺癌。實施上述方法時，先加入乙酰基澳澤蘭素，然后加入抗腫瘤藥物。也可以同時加入乙酰基澳澤蘭素和抗腫瘤藥物。本專利技術提供了乙酰基澳澤蘭素的新用途，即其在制備抗腫瘤藥物增敏劑中的應用。乙酰基澳澤蘭素是天然產物，具有逆轉腫瘤細胞多藥耐藥的作用，可以作為腫瘤多藥耐藥的逆轉劑；乙酰基澳澤蘭素還具有增加腫瘤多藥耐藥細胞對抗腫瘤藥物敏感性的作用，可以作為化療增敏劑使用。本專利技術中的小分子化合物乙酰基澳澤蘭素作為新的抗腫瘤藥物或者其輔助成分進行開發(fā)，抑瘤效果明顯，綠色環(huán)保，將為治療和治愈腫瘤提供了一種新的途徑和手段。具體實施方式本專利技術提供了一種抗腫瘤藥物，所述的抗腫瘤藥物的活性成分是乙酰基澳澤蘭素。所述的腫瘤可以是肝癌細胞、胃癌細胞、宮頸癌細胞或者血癌細胞。本專利技術的小分子化合物可以采用各種常規(guī)的制備方法制備。例如，采用人工化學合成的方法。利用本專利技術小分子化合物，通過各種常規(guī)篩選方法，可篩選出與乙酰基澳澤蘭素發(fā)生相互作用的物質，如受體、抑制劑或拮抗劑等。本專利技術及其抑制劑、拮抗劑等，在治療上進行施用(給藥)時，可提供不同的效果。通常，可將這些物質配制于無毒的、惰性的和藥學上可接受的水性載體介質中，其中pH通常約為5-8，較佳地pH約為6-8，pH值可隨被配制物質的性質以及待治療的病癥而有所變化。配制好的藥物組合物可以通過常規(guī)途徑進行給藥，其中包括(但并不限于)：肌內、腹膜內、皮下、皮內、或局部給藥。以本專利技術的乙酰基澳澤蘭素為例，可以將其與合適的藥學上可接受的載體聯用。這類藥物組合物含有治療有效量的化合物和藥學上可接受的載體或賦形劑。這類載體包括(但并不限于)：鹽水、緩沖液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其組合。藥物制劑應與給藥方式相匹配。本專利技術的乙酰基澳澤蘭素可以被制成針劑形式，例如用生理鹽水或含有葡萄糖和其他輔劑的水溶液通過常規(guī)方法進行制備。諸如片劑和膠囊之類的藥物組合物，可通過常規(guī)方法進行制備。藥物組合物如針劑、溶液、片劑和膠囊宜在無菌條件下制造。活性成分的給藥量是治療有效量，例如每天約1微克/千克體重-約5毫克/千克體重。此外，本專利技術的乙酰基澳澤蘭素還可與其他治療劑一起使用。當然，具體劑量還應考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟練醫(yī)師技能范圍之內的。實驗方法：1.細胞復蘇1)從液氮罐中取出凍存管，直接投入37℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化。2)從37℃水浴中取出凍存管，用吸管吸出細胞懸液，注入離心管并加入10倍以上培養(yǎng)液，混合后低速離心，棄上清，再重復用培養(yǎng)液洗一次。3)用培養(yǎng)液適當稀釋后，接種培養(yǎng)瓶，放在37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)，次日更換培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)至一定濃度時進行傳代。PANC-1細胞培養(yǎng)在含10％Gibico胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基中；K562、HGC、QGY、MCF-7、PC-3等細胞培養(yǎng)在含10％胎牛血清的1640培養(yǎng)基中，SK-hep1、HeLa、HepG2、等細胞培養(yǎng)在含10％胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中含100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素。2.細胞傳代培養(yǎng)每天觀察細胞生長的情況，當細胞在培養(yǎng)瓶中長至約90％匯合時傳代，約每隔2-4天傳代一次。一瓶傳代成三瓶，或一個25cm2傳代于一個75cm2的培養(yǎng)瓶中。方法：1)用1×磷酸緩沖液洗滌細胞一次。2)加入2-3ml胰酶消化液消化，置于37℃培養(yǎng)箱中數分鐘。用手拍打細胞培養(yǎng)瓶，使細胞分離。3)用含10-15％的Gibico胎牛血清的合適培養(yǎng)基終止胰酶消化。將細胞分裝于新的培養(yǎng)瓶中，繼續(xù)培養(yǎng)。懸浮細胞傳代時，直接收集于離心管中離心，棄舊培養(yǎng)基。一般一瓶傳代成三瓶的比例分裝于新的培養(yǎng)瓶中，加入新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。3.細胞凍存1)取培養(yǎng)至對數生長期的細胞胰蛋白酶消化，收集于離心管中并計數，離心。2)棄除胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液，加入配置好的凍存培養(yǎng)液(含10％DMSO，40％DMEM和50％Gibico胎牛血清)，凍存液中細胞的最終濃度為0.5-1×107/ml。用吸管輕輕吹打使細胞均勻，然后分裝入無菌凍存管中，每管加1-1.5ml。3)將凍存管放入凍存盒置-80℃速凍，5小時后移入液氮罐中保存。4.實驗材料藥物準備：乙酰基澳澤蘭素溶于本文檔來自技高網...

【技術保護點】
乙酰基澳澤蘭素在制備抗腫瘤藥物增敏劑中的應用。

【技術特征摘要】
1.乙酰基澳澤蘭素在制備抗腫瘤藥物增敏劑中的應用。2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，乙酰基澳澤蘭素是腫瘤多藥耐藥逆轉劑。3.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的腫瘤包括口腔癌、鼻咽癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、宮頸癌、結腸癌或胰腺癌。4.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的抗腫瘤藥物是長春新堿、柔紅霉素、紫杉醇或者5-氟尿嘧啶。5.一種抗腫瘤藥物組合物，其特征在于，所述的抗腫瘤藥物組合物的有效成分是抗腫瘤藥物和乙酰基澳澤蘭素。6.如權利要求5所述的抗腫瘤藥物組合物，...

【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：余龍，解放，
申請(專利權)人：復旦大學，
類型：發(fā)明
國別省市：上海,31