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    微生物細胞的固定化方法技術

    技術編號:1736389 閱讀:233 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
    本發明專利技術提出一種微生物細胞的固定化方法。是采用聚乙烯醇作載體包埋微生物細胞,并使用成型劑使包埋微生物細胞成型后定型,制備出外形為規則珠狀的凝膠態固定化微生物細胞。本發明專利技術的特點是載體價格便宜,成型劑可重復使用,制備工藝操作簡便,穩定性高,外形規則的成品使用方便,機械強度優良。本發明專利技術可以廣泛應用于醫藥工業和食品飲料工業,改進傳統的發酵工藝。(*該技術在2005年保護過期,可自由使用*)

    【技術實現步驟摘要】
    本專利技術涉及一種。以前的微生物細胞固定化方法一般是用膠類作為載體。例如明膠、瓊脂、果膠、海藻膠等。中國科學院微生物研究所等單位制備的生產6-氨基青霉素烷酸(簡稱6-APA)的固定化大腸桿菌細胞,就是采用瓊脂作載體,結合戊二醛處理的方法,如《微生物學報》1980年20卷4期文章所述。該方法最大的缺點是所得的固定化細胞酶活性低,只有2u/克固胞。因而應用于生產時效率低,直接影響到生產6-APA的產量及質量,并且其固定化細胞的機械強度較差,降低了使用效果和壽命。近年來有人提出用聚乙烯醇(PVA)作為載體固定微生物細胞制備酒精,例如日本特許出愿公開昭57-138390、昭57-198088。但他們制備固定化微生物細胞需在模具中成形,固定化后脫模,使用時要用機械方法破碎。因而使用起來很不方便,而且破碎后不均勻、不規則的形狀會影響使用效果,特別是當用于反應器中時。本專利技術的目的就是為了解決上述方法存在的缺點。用新的方法制備出固定化微生物細胞,并使之具有酶活性高、機械強度好、外形為規則珠狀,適宜于在反應器中長期使用等優點。本專利技術采用聚乙烯醇作為包埋微生物細胞的載體,用成形劑成形,低溫冷凍定形的方案。成形劑選用油脂類物質,以植物油或礦物油為佳。制備工藝是,首先把制備好的聚乙烯醇溶液與微生物細胞混合均勻,可用濃度在10%~20%之間的PVA溶液,微生物細胞與聚乙烯醇溶液的重量比選擇在1∶1至9范圍內。然后在細胞-聚乙烯醇混合物中加入成形劑,并充分攪拌,使之分散成珠狀,細胞-聚乙烯醇混合物與成形劑的重量比可以是1∶0.5至2。再將已成形的包埋微生物細胞在一定溫度下放置一段時間定形,一般需要在-10℃至-40℃溫度條件下保留8~20小時即可。待定形后即可除去成形劑,成形劑可回收以備重復使用,最后可經后處理,例如清潔處理等,則得到形狀規則的珠狀凝膠態成品固定化微生物細胞。實施例用本專利技術可制備工業上用于生產6-APA的固定化大腸桿菌細胞。原料的配比濃度15%的PVA溶液 10克大腸桿菌細胞 10克菜籽油 20克制備條件溫度 -20℃時間 12小時結果所得固定化細胞外形為規則珠狀凝膠態,酶活性為8u/克固胞,機械強度良好。本專利技術可以應用于醫藥工業和食品飲料工業,改進傳統的發酵工藝。本專利技術的特點是,用聚乙烯醇作載體價格便宜,成形劑可重復使用,因而成本低廉。制備工藝方法操作簡便,穩定性高。制備出的固定化大腸桿菌細胞酶活達到8u/克固胞,可以生產出濃度較高的6-APA轉化液,從而提高了生產效率。成品固定化微生物細胞外形為規則珠狀凝膠態,使用方便,機械強度優良,長期在較高溫度和壓力條件下使用無破裂。特別適于工業上在柱反應器中使用。本文檔來自技高網...

    【技術保護點】
    用聚乙烯醇(PVA)作載體包埋微生物細胞的固定化方法,其特征是使用了成形劑,所用的成形劑是油脂類物質。并用低溫冷凍法定形。

    【技術特征摘要】
    1.用聚乙烯醇(PVA)作載體包埋微生物細胞的固定化方法,其特征是使用了成形劑,所用的成形劑是油脂類物質。并用低溫冷凍法定形。2.如權利要求1所說的固定化方法,其特征是所說的油脂類物質是植物油或者礦物油。3.如權利要求1、2所說的固定化方法,其特征是把微生物細胞與制備好的聚乙烯醇溶液混合后,在細胞-聚乙烯醇混合物中加入成形劑充分攪拌,使之成形為珠狀,然后在一定溫度下放置一段時間使之定形,...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:李有福張坐奎張叔淵
    申請(專利權)人:四川大學
    類型:發明
    國別省市:51[中國|四川]

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