用于消化道再生的片狀細胞培養物制造技術

本說明書中提供用于促進具有損傷部的管腔器官、尤其是十二指腸的組織的治愈的片狀細胞培養物、該片狀細胞培養物的制造方法及使用了該片狀細胞培養物的管腔器官的損傷部的再生方法等。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】用于消化道再生的片狀細胞培養物
本專利技術涉及用于處置具有損傷部的管腔器官的片狀細胞培養物、該片狀細胞培養物的制造方法及使用了該片狀細胞培養物的管腔器官的處置方法等。
技術介紹
近年來，為了修復損傷的組織等，進行了移植各種細胞的嘗試。例如，為了修復因心絞痛、心肌梗塞等缺血性心臟病而導致損傷的心肌組織，嘗試利用了胎兒心肌細胞、骨骼肌成肌細胞、間充質干細胞、心臟干細胞、ES細胞、iPS細胞等(非專利文獻1)。作為上述嘗試的一環，開發出了利用支架(scaffold)形成的細胞結構物、使細胞形成為片狀而得的片狀細胞培養物(專利文獻1、非專利文獻2)。關于片狀細胞培養物在治療中的應用，已開展了下述研究：針對由燒傷等導致的皮膚損傷的培養表皮片的利用、針對角膜損傷的角膜上皮片狀細胞培養物的利用、針對食管癌內窺鏡切除的口腔粘膜片狀細胞培養物的利用等，其一部分已進入臨床應用的階段。作為這樣的應用之一，提出了在消化道等器官的損傷的治愈中利用片狀細胞培養物的方案。例如在專利文獻2中記載了為了治愈或預防因縫合不全等產生的從消化道損傷部漏出而利用包含間充質干細胞的片狀細胞培養物。另外，在非專利文獻3、4中記載了在胰瘺、胃穿孔的模型動物中可以在它們的治愈中使用骨骼肌成肌細胞片。作為低侵害性地切除早期腫瘤的方法，近年來內鏡粘膜下剝離術(ESD)受到關注。其是將局部注射液注入病變部的粘膜下層，人工引起浮腫后，將隆起的粘膜病變部與粘膜下層一起切除。然而，有報道稱，尤其是十二指腸的ESD會因內窺鏡的操作性、腸壁的薄度等而以30％左右的概率發生穿孔等并發癥。現有技術文獻專利文獻專利文獻1：日本特表2007-528755號公報專利文獻2：國際公開第2017/130802號非專利文獻非專利文獻1：Haraguchi等人,StemCellsTranslMed.2012Feb；1(2):136-41非專利文獻2：Sawa等人,SurgToday.2012Jan；42(2):181-4非專利文獻3：Tanaka等人,JGastroenterol.2013Sep；48(9):1081-9非專利文獻4：Tanaka等人,SurgToday.2017Jan；47(1):114-121
技術實現思路
專利技術要解決的課題本專利技術的目的在于提供用于使具有損傷部的管腔器官、尤其是十二指腸的組織再生的片狀細胞培養物、該片狀細胞培養物的制造方法及使用了該片狀細胞培養物的管腔器官的損傷部的再生方法等。用于解決課題的手段本申請的專利技術人在對十二指腸的ESD中減少術后并發癥的方法進行深入研究的過程中，首次發現通過將骨骼肌成肌細胞的片狀細胞培養物貼附于ESD施術部位的外側，可以保持潰瘍底部的連續性，可以預防術后穿孔，并基于該見解進一步繼續進行研究，從而完成了本專利技術。即，本專利技術涉及下述所示的內容：[1]片狀細胞培養物，其是用于促進在管腔壁至少一側具有損傷部的管腔器官治愈的片狀細胞培養物，其特征在于，該片狀細胞培養物應用于與存在損傷的部位對應的管腔壁的相反側。[2]根據[1]的片狀細胞培養物，其中，損傷處于管腔壁的內側部，片狀細胞培養物應用于管腔壁的對應的外側部；或者，損傷處于管腔壁的外側部，片狀細胞培養物應用于管腔壁的對應的內側部。[3]根據[1]的片狀細胞培養物，其中，損傷是貫穿性損傷或非貫穿性損傷。[4]根據[1]～[3]的片狀細胞培養物，其中，管腔器官是消化道系統的器官。[5]根據[1]～[4]的片狀細胞培養物，其中，損傷是管腔壁表面組織剝離導致的損傷。[6]根據[1]～[5]的片狀細胞培養物，其還具有包含凝膠及/或聚合物的增強層。[7]根據[1]～[6]的片狀細胞培養物，其特征在于，其與帶蒂血管一起應用。[8]根據[1]～[7]的片狀細胞培養物，其具有50～500μm的厚度。[9]根據[1]～[8]的片狀細胞培養物，其含有接種密度為約7.1×105個/cm2～約3.0×106個/cm2的細胞群。[10]根據[1]～[9]的片狀細胞培養物，其用于預防因外科處置及/或外科處置產生的穿孔而導致的炎癥。[11]用于預防外科處置后管腔器官穿孔的方法，所述方法包括將片狀細胞培養物應用于管腔器官的步驟，所述片狀細胞培養物應用于實施了處置的部位或與實施了處置的部位對應的相反側。[12]根據[11]所述的方法，其中，外科處置是對管腔器官的粘膜、粘膜肌層及/或粘膜下層的剝離。[13]根據[11]或[12]的方法，其中，片狀細胞培養物以能夠完全覆蓋實施了處置的部位或與實施了處置的部位對應的相反側的方式而應用。[14]根據[11]～[13]的方法，其中，片狀細胞培養物經遞送裝置被遞送至實施了處置的部位或與實施了處置的部位對應的相反側。[15]用于處置管腔壁表面的疾患部的方法，所述方法包括：(a)將管腔壁表面的疾患部剝離的步驟；以及(b)將片狀細胞培養物應用于步驟(a)中經剝離的部分或與剝離部分對應的相反側的步驟。[16]根據[15]的方法，其中，疾病為癌癥。[17]根據[15]或[16]的方法，其中，管腔壁表面的疾患部的剝離是具有疾患部的粘膜、粘膜肌層及/或粘膜下層的剝離。專利技術效果根據本專利技術，在管腔壁至少一側具有損傷的管腔組織中，將片狀細胞培養物移植至與存在損傷的部位對應的相反側，由此能夠促進組織的治愈。尤其是對因ESD等的施術而形成的損傷也具有效果，因此能夠預防這些施術后的并發癥，能夠提高預后。附圖說明圖1表示本專利技術的片狀細胞培養物的組織染色圖像。A是豬骨骼肌成肌細胞的片狀細胞培養物，B是在豬骨骼肌成肌細胞的片狀細胞培養物上形成了纖維蛋白凝膠的增強層的情況，C是豬間充質干細胞的片狀細胞培養物的染色圖像。骨骼肌成肌細胞的片狀細胞培養物的片厚為約100μm，與此相對，豬間充質干細胞的片狀細胞培養物為不足50μm的厚度。圖2表示十二指腸的消化道壁的組織染色圖像。A是表示豬十二指腸壁的結構的截面染色圖像。11表示粘膜，12表示粘膜下層(布路納氏腺(Brunner’sgland))，20表示肌層。B是ESD處置前的組織染色圖像，將虛線部分切除。C是ESD處置后的染色圖像。可知殘留肌層而除去了粘膜及粘膜下層。圖3表示對照組的豬的ESD施術部位的組織染色圖像。分別地，A表示對象組1，B表示對象組2。在任何施術部位，均在箭頭所示的部位潰瘍底部的連續性消失，發生了術后穿孔。圖4-1表示片處置組的豬的ESD施術部位的組織染色圖像。分別地，A、B表示片處置組1，C、D表示片處置組2，E、F表示片處置組3，G、H表示片處置組4。可知：A、C及F的箭頭所示的部位是貼附有豬骨骼肌成肌細胞的片狀細胞培養物的部位，可保持潰瘍底部的連續性，還可以在組織學上預防術后穿孔。另外，A及C的虛線四邊形所圍成的部位的本文檔來自技高網...

【技術保護點】
1.片狀細胞培養物，其是用于促進在管腔壁至少一側具有損傷部的管腔器官治愈的片狀細胞培養物，其特征在于，所述片狀細胞培養物應用于與存在損傷的部位對應的管腔壁的相反側。/n

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】20180727 JP 2018-1409771.片狀細胞培養物，其是用于促進在管腔壁至少一側具有損傷部的管腔器官治愈的片狀細胞培養物，其特征在于，所述片狀細胞培養物應用于與存在損傷的部位對應的管腔壁的相反側。


2.根據權利要求1所述的片狀細胞培養物，其中，損傷處于管腔壁的內側部，片狀細胞培養物應用于管腔壁的對應的外側部；或者，損傷處于管腔壁的外側部，片狀細胞培養物應用于管腔壁的對應的內側部。


3.根據權利要求1所述的片狀細胞培養物，其中，損傷是貫穿性損傷或非貫穿性損傷。


4.根據權利要求1～3中任一項所述的片狀細胞培養物，其中，管腔器官是消化道系統的器官。


5.根據權利要求1～4中任一項所述的片狀細胞培養物，其中，損傷是管腔壁表面組織剝離導致的損傷。


6.根據權利要求1～5中任一項所述的片狀細胞培養物，其還具有包含凝膠及/或聚合物的增強層。


7.根據權利要求1～6中任一項所述的片狀細胞培養物，其特征在于，其與帶蒂血管一起應用。


8.根據權利要求1～7中任一項所述的片狀細胞培養物，其具有50～500μm的厚度。


9.根據權利要求1～8中任一項所述的片狀細胞培養物，其含有接種密度為約7.1×105個/cm2～...

【專利技術屬性】
技術研發人員：丸屋安廣，松本亮，小林慎一朗，金高賢悟，江口晉，大仁田賢，橋口慶一，大橋文哉，松村匡記，
申請(專利權)人：國立大學法人長崎大學，泰爾茂株式會社，
類型：發明
國別省市：日本;JP