一種新的多肽--核糖體L39蛋白9和編碼這種多肽的多核苷酸制造技術

本發明專利技術公開了一種新的多肽－核糖體Ｌ３９蛋白９，編碼此多肽的多核苷酸和經ＤＮＡ重組技術產生這種多肽的方法。本發明專利技術還公開了此多肽用于治療多種疾病的方法，如惡性腫瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各類炎癥等。本發明專利技術還公開了抗此多肽的拮抗劑及其治療作用。本發明專利技術還公開了編碼這種新的核糖體Ｌ３９蛋白９的多核苷酸的用途。（*該技術在2019年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于生物
，具體地說，本專利技術描述了一種新的多肽--核糖體L39蛋白9，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本專利技術還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。蛋白的正確翻譯對所有細菌及高等生物都是非常重要的，對蛋白翻譯調控機制的研究是從大腸桿菌中得到的。蛋白的翻譯過程主要由各種氨?；?tRNA合成酶、各種tRNA及核糖體共同作用來完成，其中核糖體和其他輔助因子在一起提供了翻譯過程的全部酶活性，這些酶活性只有在核糖體整體結構完整的情況下才會具備。因而，核糖體及其組成的各亞單位在生物體內協同作用，起著重要的生理學功能。核糖體是合成蛋白質的細胞器，其唯一功能是按照mRNA的指令由氨基酸合成多肽鏈，它被稱為核糖核蛋白體，簡稱為核蛋白體或核糖體。核糖體幾乎存在于一切細胞內，無論原核還是真核細胞，均有大量的核糖體存在。核糖體是一種顆粒狀結構，沒有膜包裹，其直徑為25nm，主要成分為蛋白質和RNA，核糖體RNA稱為rRNA，蛋白質含量約占40％，RNA約占60％。蛋白質分子主要分布在核糖體的表面，而rRNA則位于內部，兩者靠非共價鍵結合在一起。(細胞生物學 翟中和 高等教育出版社ppl22-129)核糖體的功能研究將焦點放到了核糖體RNA上，有很多rRNA功能域決定著核糖體的不同功能。(Annu Rev Biochem 1991；60 191-227)生物有機體細胞內有兩種基本類型的核糖體一種是70S(S為Sverdberg沉降系數單位)的核糖體，所有的原核細胞的核糖體均為70S真核細胞線粒體與葉綠體內的核糖體也近似于70S。另一種是80S核糖體，真核細胞的核糖體(除線粒體與葉綠體核糖體外)均為80S。不論70S或80S的核糖體，均由大小不同的兩個亞單位構成。核糖體大小亞單位在細胞內常常游離于細胞質基質中，只有當小亞單位與mRNA結合后大亞單位才與小亞單位結合形成完整的核糖體。肽鏈合成終止后，大小亞單位解離，又游離存在于細胞質基質中。核糖體蛋白L39是核糖體大亞單位的結合蛋白之一，它和同源蛋白存在于絕大多數原核生物和真核生物細胞內。在不同的生物中，編碼核糖體蛋白L39的基因已有很多得到克隆，包括哺乳動物、植物和酵母等等。(Lin A.,McNally J.,Wool I.G.J.Biol.Chem.259:487-490(1984))；(Leer R.J.,van Raamsdonk-Duin M.M.C.,Kraakman P.,MagerW.H.,Planta R.J.Nucleic Acids Res.13:701-709(1985))；(Ramirez C.,LouieK.A.,Matheson A.T.FEBS Lett.250:416-418(1989))所有的核糖體蛋白L39的C末端均含有一保守的區域，該區域含有以下一致的序列片段-T-x(3)---x--x(3)-R--W-R-R。在眾多不同生物的核糖體蛋白L39中均含有這一序列片段，該片段可能在核糖體的作用過程中起重要的作用。這一結構基序在蛋白發揮正常生理學功能的過程中起著極為重要的作用。核糖體蛋白L39對于蛋白質的翻譯過程有著重要的作用，如果缺失或對其進行化學修飾，或編碼它的基因發生突變，都會影響核糖體的功能，降低多肽合成的活性。雖然，對核糖體蛋白L39的功能研究還不夠透徹，但根據種種研究結果，可以證明，核糖體蛋白L39的功能包括(1)對rRNA折疊成有功能的三維結構是十分重要的；(2)在蛋白質合成中，核糖體的空間構象發生一系列的變化，核糖體蛋白可能對核糖體的構象起“微調”作用；(3)在核糖體的結合位點上甚至可能在催化作用中，核糖體蛋白與rRNA共同行使功能。根據核糖體蛋白L39的序列相似性，認為其屬于核糖體蛋白家族。該蛋白缺失將導致細胞生長速度減慢。因而,核糖體蛋白L39在由DNA轉錄、翻譯的細胞增殖過程中起著極為重要的作用。其表達異常將導致組織的生長速度減慢，從而引發各種發育紊亂性疾病，如發育遲緩等。由于如上所述核糖體L39蛋白9蛋白在機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的核糖體L39蛋白9蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新核糖體L39蛋白9蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。本專利技術的一個目的是提供分離的新的多肽--核糖體L39蛋白9以及其片段、類似物和衍生物。本專利技術的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼核糖體L39蛋白9的多核苷酸的重組載體。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼核糖體L39蛋白9的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。本專利技術的另一個目的是提供生產核糖體L39蛋白9的方法。本專利技術的另一個目的是提供針對本專利技術的多肽--核糖體L39蛋白9的抗體。本專利技術的另一個目的是提供了針對本專利技術多肽--核糖體L39蛋白9的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。本專利技術的另一個目的是提供診斷治療與核糖體L39蛋白9異常相關的疾病的方法。本專利技術涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQID NO:2氨基酸序列的多肽。本專利技術還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體(a)編碼具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種(a)具有SEQ ID NO:1中137-397位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1038位的序列。本專利技術另外涉及一種含有本專利技術多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本專利技術多肽的方法。本專利技術還涉及一種能與本專利技術多肽特異性結合的抗體。本專利技術還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制核糖體L39蛋白9蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本專利技術的多肽。本專利技術還涉及用該方法獲得的化合物。本專利技術還涉及一種體外檢測與核糖體L39蛋白9蛋白異常表達相關的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測生物樣品中本專利技術多肽的量或生物活性。本專利技術也涉及一種藥物組合物，它含有本專利技術多肽或其模擬物、激活劑、拮抗劑或抑制劑以及藥學上可接受的載體。本專利技術還涉及本專利技術的多肽和/或多核苷酸在制備用于治療癌癥、發育性疾病或免疫性疾病或其它由于核糖體L39蛋白9表達異常所引起疾病的藥物的用途。本專利技術的其它方面由于本文的技術的公開，對本領域的技術人員而言是顯而易見的。本說明書和權利要求書中使用的下列術語除非特別說明具有如下的含義“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因組或合成的DNA或RNA，它們可以是單鏈或雙鏈的，代表有義鏈或反義鏈。類似地，術語“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種分離的多肽－核糖體Ｌ３９蛋白９，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、類似物或衍生物。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：毛裕民，謝毅，
申請(專利權)人：復旦大學，上海博道基因技術有限公司，
類型：發明
國別省市：31[中國|上海]