（2E，4E）-乙基-4-（吡啶-2-基亞氨基）-2-丁烯酸乙酯含量測定方法技術

本發明專利技術公開一種“（2E，4E）

【技術實現步驟摘要】
（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
?2??
基亞氨基）
?2??
丁烯酸乙酯含量測定方法


[0001]本專利技術涉及醫藥領域，具體涉及的是一種“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
?2???
基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”含量測定方法。

技術介紹

[0002]米諾膦酸水合物(minodronic acid hydrate)為1
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羥基
?2?
(咪唑并[1,2
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a]吡啶
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基)乙烷
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1,1
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雙膦酸一水合物，分子量為340.16 g/mol，分子式為C9H
12
N2O7P2·
H2O；米諾膦酸水合物，是一個口服生物有效的第三代雙膦酸鹽類藥物，在治療骨質疏松癥方面具有顯著療效。雙膦酸鹽類藥物是人工合成的非生物降解性焦磷酸鹽類似物，是日本山之內制藥株式會社與小野藥品株式會社聯合研發的雙磷酸鹽類藥物。目前，米諾膦酸水合物在非臨床試驗中，只需比現有二碳磷酸鹽類藥物更低劑量的本品就表現出了良好的抗骨再吸收能力、抑制骨密度及骨強度降低的作用；在臨床試驗中，針對日本退化性骨質疏松癥患者顯示出出色的骨密度增加效果，且證實了其對骨折的預防效果；在米諾膦酸水合物的合成過程中，受合成條件的影響，有可能產生副產物“（2E，4E）
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乙基
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（吡啶
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基亞氨基）
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丁烯酸乙酯”這一有關物質，作為醫藥制劑，為了保證藥物的安全性，嚴格控制其有關物質“（2E，4E）
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乙基
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（吡啶
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基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”的含量是非常必要的。然而在現有技術中，暫無報道“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
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基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”的含量測定方法。本專利技術為了解決米諾膦酸水合物在出廠或使用前有關物質“（2E，4E）
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乙基
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（吡啶
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基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”檢測的問題，提供一種便捷、準確、高效和廉價的檢測方法。

技術實現思路

[0003]本專利技術的目的在于提供一種“（2E，4E）
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乙基
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（吡啶
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基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”含量測定方法，該測定方法便捷、準確、可靠，能夠真實反映產品的“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
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基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”含量；為了達成上述目的，本專利技術的解決方案是：一種“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
?2???
基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”的含量測定方法，包括如下步驟：（1）對照品溶液的制備：取“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
?2???
基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”對照品1~10 mg，用流動相溶解后配置成對照品母液，經流動相再次稀釋后配置成濃度為5 ug/mL的對照品溶液，置于量瓶中備用；（2）供試品溶液的制備：取米諾膦酸水合物的原料藥樣品10~30 mg，用堿溶液溶解后，超聲5 min后放冷至室溫后，置于50 mL量瓶中，然后加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品，置于量瓶中備用；（3）高效液相色譜條件：色譜柱為Alltima C
18
色譜柱 (4.6 mm
×
200 mm, 5 μm)，
流動相為2.66 g/L焦磷酸鈉
?
甲醇，檢測波長為225 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫為25 ℃，進樣量為10 μL，運行時間為30 min；（4）測定法：精密吸取對照品及供試品溶液注入高效液相色譜儀，測定；步驟（2）中所述堿溶液為1~6g/L氫氧化鈉溶液；步驟（3）中所述流動相的pH值為6.0~8.0，所述流動相用酸調節pH值，其中酸的濃度為75~90 %；所述流動相為2.66 g/L焦磷酸鈉
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甲醇=80 :20的流動相；步驟（4）中所述測定的米諾膦酸水合物供試品中“（2E，4E）
?
乙基
?4?
（吡啶
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基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”的含量不得高于0.1%；為了證明本專利技術“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
?2???
基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”的含量測定方法的準確可靠，通過以下測試方法加以驗證;1、儀器與試藥本專利技術所使用的試劑均可以從市場上購得或者可以通過本專利技術所描述的方法制備而得；試劑：甲醇、水均為色譜純，焦磷酸鈉、磷酸、氫氧化鈉均為分析純；樣品：自制；對照品：“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
?2???
基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”對照品由TLC Pharmaceutical Standards Ltd.提供，供含量測定用；儀器：Agilent 1200 型高效液相色譜儀（Agilent公司），電子天平（奧豪斯儀器有限公司），UV
?
1750紫外可見分光光度計（日本島津公司），超聲波清洗儀 (上海躍進醫療器械廠)；2、色譜條件色譜柱：色譜柱為Alltima C
18
色譜柱 (4.6 mm
×
200 mm, 5 μm)，流動相為2.66 g/L焦磷酸鈉
?
甲醇=80 :20，用85 %磷酸調pH值為7.4，檢測波長為225 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫為25 ℃，進樣量為10 μL，運行時間為30 min；理論板數按“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
?2???
基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”峰計算應不小于6000；進樣方式：自動進樣；3、對照品溶液的制備：精密稱取“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
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基亞氨基）
?2?–
丁烯酸乙酯”對照品5 mg，用流動相溶解后，置于100 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，配制成濃度為50
?μ
g/mL的對照品母液，取1mL對照品母液置于本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
1.（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
?2???
基亞氨基）
?2?
丁烯酸乙酯含量測定方法，其特征在于：包括如下步驟：（1）對照品溶液的制備：取“（2E，4E）
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乙基
?4?
（吡啶
?2???
基亞氨基）
?2?
丁烯酸乙酯”對照品1~10 mg，用流動相溶解后配置成對照品母液，經流動相再次稀釋后配置成濃度為5ug/mL的對照品溶液，置于量瓶中備用；（2）供試品溶液的制備：取米諾膦酸水合物的原料藥樣品10~30 mg，用堿溶液溶解后，超聲5 min后放冷至室溫后，置于50 mL量瓶中，然后加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品，置于量瓶中備用；（3）高效液相色譜條件：色譜柱為Alltima C
18
色譜柱 (4.6 mm
×
200 mm, 5 μm)，流動相為2.66 g/L焦磷酸鈉
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甲醇，檢測波長為225 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫為25 ℃，進樣量...

【專利技術屬性】
技術研發人員：王立強，
申請(專利權)人：王立強，
類型：發明
國別省市：