新型免疫刺激劑和包含其的疫苗組合物制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)人發(fā)現(xiàn)，先天免疫應(yīng)答和T細胞耗竭通路在豬中的過表達比在牛中多很多，使得豬比牛更不可能形成適應(yīng)性免疫應(yīng)答和體液免疫應(yīng)答。本文提出了一種通過同時誘導(dǎo)有效的細胞免疫應(yīng)答和體液免疫應(yīng)答并應(yīng)用T細胞激動劑作為新的疫苗佐劑來提高豬中的異常免疫應(yīng)答的創(chuàng)新策略。這一結(jié)果可能為理解牛和豬之間免疫應(yīng)答的差異提供了重要線索，同時提出了一種用于最大化免疫應(yīng)答和疫苗效力(其在豬中的表達比在牛中少)的方法。在牛中少)的方法。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
【國外來華專利技術(shù)】新型免疫刺激劑和包含其的疫苗組合物


[0001]本專利技術(shù)涉及一種新型免疫免疫增強劑(“佐劑”)，并且具體涉及一種包括非常規(guī)T細胞激動劑和常規(guī)T細胞激動劑的新型免疫佐劑以及包含其的疫苗組合物。

技術(shù)介紹

[0002]口蹄疫(FMD)是一種急性傳染病，其在有蹄類動物(“蹄類動物”)，特別是牛和豬中傳播非常迅速，在動物生產(chǎn)力和經(jīng)濟方面造成重大損失。大多數(shù)關(guān)于FMD的臨床研究都集中于提高牛而非豬的疫苗效力。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)關(guān)于FMD疫苗生產(chǎn)的指南僅規(guī)定了牛的效力測試程序，而沒有規(guī)定豬的效力測試程序。然而，F(xiàn)MD的嚴重程度高度依賴于病毒株和感染的宿主物種二者。豬的急性臨床FMD比其他反芻動物更嚴重，并且感染的豬可能會排泄大量氣溶膠病毒，這增加了嚴重疾病傳播的風(fēng)險。
[0003]根據(jù)韓國最近的疫苗接種趨勢，F(xiàn)MD疫苗有效地誘導(dǎo)了牛的免疫應(yīng)答，但是在豬中，盡管病毒中和抗體滴度(病毒中和(VN)滴度)高，但它不是一個足以完全保護免受FMD病毒感染的免疫應(yīng)答。這種差異可以用每種動物對病毒的易感性或宿主對疫苗接種的免疫應(yīng)答來解釋。
[0004]含有滅活口蹄疫病毒(FMDV)(即滅活抗原)的疫苗接種主要用于宿主防御和FMD控制。為了提高疫苗的免疫原性和效力，加入比如油乳劑(助劑)的佐劑和比如皂苷或凝膠等的免疫增強劑作為疫苗成分。最近，提出了一種作為新型FMD疫苗佐劑的模式識別受體(PRR)配體，該配體包括細胞因子(例如，IL
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15、IL
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18和IFNα)、作為Toll樣受體(TLR)
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3激動劑的poly(I:C)、作為TLR
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9激動劑的CpG和作為TLR
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7/8激動劑的R848(雷西莫特(resquimod))。然而，這些研究都是在基礎(chǔ)水平上進行的，對于進一步了解FMDV抗原或FMD疫苗介導(dǎo)的細胞免疫應(yīng)答和體液免疫應(yīng)答的機制的研究非常少。
[0005]本專利技術(shù)旨在開發(fā)一種用于提高免疫的佐劑和包含其的FMD疫苗組合物，其使用包括例如γδ(gamma delta)T細胞、恒定自然殺傷(iNK)T細胞和粘膜相關(guān)恒定T(MAIT)細胞在內(nèi)的非常規(guī)T細胞(這些細胞在先天免疫應(yīng)答和體液免疫應(yīng)答之間起連接子作用，并且被認為是宿主防御中的“新保護者”)的激動劑，以及將比如“T細胞”的常規(guī)T細胞用作疫苗佐劑來直接刺激T細胞而不刺激比如樹突狀細胞(DC)、巨噬細胞(MΦ)、單核細胞等的抗原呈遞細胞(APC)，從而誘導(dǎo)更快且更強的細胞免疫應(yīng)答，使得它們在疫苗接種期間在宿主的初始防御中發(fā)揮重要作用，并且同時刺激細胞免疫應(yīng)答和體液免疫應(yīng)答，從而在動物，特別是豬中誘導(dǎo)強記憶應(yīng)答和高滴度抗體。
[0006][現(xiàn)有技術(shù)文獻][0007][非專利文獻][0008]Lee,M.J.等.Mincle and STING
?
stimulating adjuvants elicit robust cellular immunity and drive long
?
lasting memory responses in a foot
?
and
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mouth disease vaccine.Front.Immunol.10,2509(2019).

技術(shù)實現(xiàn)思路

[0009][本專利技術(shù)要解決的問題][0010]為了解決上述問題，本專利技術(shù)的一個目的是提供一種新型免疫增強劑(“佐劑”)組合物，其通過直接活化牛和豬免疫細胞中的非常規(guī)T細胞和常規(guī)T細胞來誘導(dǎo)強細胞免疫應(yīng)答。
[0011]另外，本專利技術(shù)的另一個目的是提供一種包含該免疫佐劑組合物的疫苗組合物。
[0012][解決問題的手段][0013]為了實現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)提供了一種在牛和豬免疫細胞中誘導(dǎo)強細胞免疫應(yīng)答的新型免疫佐劑組合物。
[0014]該新型佐劑包含作為活性成分的非常規(guī)T細胞激動劑和常規(guī)T細胞激動劑。
[0015]如本文使用的，免疫刺激劑或佐劑指的是增強由抗原引起的免疫應(yīng)答的物質(zhì)。即使疫苗中的抗原含量少，免疫佐劑也能表現(xiàn)出相同的效力，因此可以用約一半到三分之一的常規(guī)抗原來制造疫苗。
[0016]本專利技術(shù)中的常規(guī)T細胞激動劑包括RAR相關(guān)孤兒受體γt(RORγt)。
[0017]本專利技術(shù)中的非常規(guī)T細胞激動劑表示的是除上文描述的已知的常規(guī)T細胞激動劑之外的T細胞激動劑。非常規(guī)T細胞激動劑可以包括γδT細胞激動劑、iNKT細胞激動劑或MAIT細胞激動劑，但不限于此。
[0018]非常規(guī)T細胞激動劑或常規(guī)T細胞激動劑可以基于免疫佐劑組合物的總重量以0.01重量％至1重量％(“wt.％”)、優(yōu)選0.1wt.％至0.5wt.％、更優(yōu)選0.2wt.％至0.3wt.％的量包含。如果其含量低于上述范圍，則不會表達免疫增強效應(yīng)。另一方面，如果其含量超過上述范圍，則可能誘發(fā)毒性。
[0019]除了上述成分外，本專利技術(shù)的免疫佐劑或免疫佐劑組合物可以進一步包含本領(lǐng)域公知的油(或油乳劑)、乳化劑、凝膠等。
[0020]油(或油乳劑)可以包括ISA 201、ISA 61、ISA 50、ISA 206或ISA 207，但不限于此。
[0021]乳化劑包括通常被認為是乳化劑的物質(zhì)，比如或產(chǎn)品線的其他產(chǎn)品(分別是聚乙氧基化山梨糖醇的脂肪酸酯和脂肪酸取代的山梨聚糖表面活性劑)以及比如PEG
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40蓖麻油或其他聚乙二醇化氫化油等的其他增溶劑，但它們并不限于此。
[0022]進一步地，盡管免疫增強劑(或佐劑)組合物通常在油制劑中具有優(yōu)異的免疫增強效應(yīng)，但根據(jù)本專利技術(shù)的免疫佐劑組合物甚至在非油制劑中也顯示出優(yōu)異的免疫增強效應(yīng)。
[0023]該疫苗組合物可以進一步包括常在本領(lǐng)域中用于制備免疫佐劑的添加劑、賦形劑、載體等，并且可以通過本領(lǐng)域中用于制備免疫增強制劑的常規(guī)制造方法來制備。
[0024]施用本專利技術(shù)的免疫佐劑組合物后出現(xiàn)的免疫增強效應(yīng)可以由免疫介質(zhì)或細胞引起，特別地，這些免疫增強效應(yīng)可以包括細胞免疫增強效應(yīng)、粘膜免疫增強效應(yīng)和體液免疫增強效應(yīng)，但它們并不限于此。
[0025]免疫可以包括針對病毒、真菌、細菌和寄生蟲中任何一種的感染或癌癥的免疫，但其并不限于此。
[0026]該病毒可以包括口蹄疫病毒(FMDV)、利什曼原蟲、人類免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)、戊型肝炎病毒(HEV)、甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、結(jié)核病、單
純皰疹病毒(HSV)、引起瘧疾的寄生蟲、人乳頭瘤病毒(HPV)、流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、埃博拉病毒、呼吸道合胞病毒(RSV)、西尼羅病毒(WNV)等，但其并不限于此。
[0027]另外，本專利技術(shù)提供了一種包含佐劑組合物的疫苗組合物。
[0028]免疫佐劑組合物可以基于疫苗組合物的總重量以30wt.％至70wt.％、優(yōu)選40wt.％至50wt.％的量包含，但其并不限于此。如本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】

【技術(shù)特征摘要】
【國外來華專利技術(shù)】1.一種免疫增強劑(“佐劑”)組合物，所述組合物包含選自由γδT細胞激動劑、iNKT細胞激動劑、MAIT細胞激動劑和T細胞激動劑組成的組中的任何一種或多種，作為活性成分。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的佐劑組合物，其中所述活性成分基于所述免疫佐劑組合物的總重量以0.01重量％至1重量％的量包含。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的佐劑組合物，除所述活性成分外，進一步包含添加劑、賦形劑、載體等。4.根據(jù)權(quán)...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：權(quán)利要求書一頁說明書一二頁附圖一六頁，
申請(專利權(quán))人：大韓民國動植物檢疫局，
類型：發(fā)明
國別省市：