本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種波茨坦短芽孢桿菌HHL
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
波茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001及其應(yīng)用
[0001]本專利技術(shù)涉及微生物
，具體而言，涉及一種波茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
[0002]愈創(chuàng)木酚是一種揮發(fā)性酚類化合物，又稱鄰甲氧基苯酚，無色或淡黃色晶體,或淡黃色油狀液體,具有特有的尖刺的木香和藥香香氣,帶酚類的特殊氣息，其是決定白酒、啤酒、葡萄酒和醬油等食品品位及質(zhì)量的一個重要風(fēng)味物質(zhì)。同時，其不僅可以作為白酒等中的重要風(fēng)味物質(zhì)，也能作為一種天然自由基清除劑而被大家視為重要健康因子，其具有促進微循環(huán)，增強人體免疫力的作用，且可抗氧化和預(yù)防心血管等多種疾病的發(fā)生。
[0003]目前，化學(xué)合成法是生產(chǎn)愈創(chuàng)木酚的常用方法，但隨著人們對綠色食品要求的日益提高，利用生物技術(shù)生產(chǎn)愈創(chuàng)木酚的方法因具有產(chǎn)品綠色天然、安全可靠、反應(yīng)條件溫和、環(huán)境污染小等優(yōu)點而逐漸受到人們的重視。我國是白酒生產(chǎn)大國，隨著菌種篩選、誘變等技術(shù)的成熟，我國各地區(qū)先后篩選出了可應(yīng)用于實際生產(chǎn)愈創(chuàng)木酚的菌株。隨著菌種篩選技術(shù)的不斷成熟，菌種庫的不斷擴大，越來越多的高產(chǎn)愈創(chuàng)木酚的菌株被進一步研究，但目前的高產(chǎn)愈創(chuàng)木酚的菌株的數(shù)量仍在少數(shù)，并且現(xiàn)有的菌株存在菌種活力不穩(wěn)定的問題，十分影響菌株產(chǎn)愈創(chuàng)木酚的能力。
技術(shù)實現(xiàn)思路
[0004]本專利技術(shù)旨在解決現(xiàn)有技術(shù)中產(chǎn)愈創(chuàng)木酚的菌株的數(shù)量少，以及現(xiàn)有的產(chǎn)愈創(chuàng)木酚的菌株存在菌種活力不穩(wěn)定的問題，提供一株波茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001，并提供了該菌株在白酒發(fā)酵等領(lǐng)域的應(yīng)用。
[0005]為解決上述問題，本專利技術(shù)第一方面提供一株波茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001，保藏編號為CCTCC M 20221275，于2022年8月15日保藏于湖北省武漢市武昌區(qū)武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
[0006]本專利技術(shù)第二方面提供一種茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001的篩選方法，包括如下步驟：
[0007]配制清香型白酒大曲的菌懸液；
[0008]將所述菌懸液梯度稀釋后，得到稀釋液，將所述稀釋液均勻涂布于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，根據(jù)所述固體培養(yǎng)基上菌落的形態(tài)和透明圈，挑選目標(biāo)菌落，將所述目標(biāo)菌落進行劃線純化，制備得到純化后的單菌落；
[0009]從所述單菌落中篩選出透明圈最大的菌株，并將所述透明圈最大的菌株接種于半固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中，培養(yǎng)完成后，篩選出愈創(chuàng)木酚產(chǎn)量最高的菌株，保藏備用，得到所述茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001。
[0010]進一步地，所述根據(jù)所述固體培養(yǎng)基上菌落的形態(tài)和透明圈，挑選目標(biāo)菌落包括：先挑選所述固體培養(yǎng)基上有明顯透明圈的菌落，再挑選出不同形態(tài)的菌落，作為目標(biāo)菌落。
[0011]進一步地，所述從所述單菌落中篩選出透明圈最大的菌株包括：將所述單菌落單
獨點至所述固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并測量各菌的透明圈比值，選取透明圈最大的菌株。
[0012]進一步地，所述固體培養(yǎng)基包括：牛肉膏1.25g/250mL、蛋白胨2.5g/250mL、氯化鈉1.25g/250mL、瓊脂5g/250mL和脫脂奶粉6.25g/250mL、制霉菌素500μL/250mL，所述固體培養(yǎng)基為自然pH。
[0013]進一步地，所述稀釋液在所述固體培養(yǎng)基上的培養(yǎng)溫度為35℃～37℃，培養(yǎng)時間為24h～48h。
[0014]進一步地，所述半固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基包括：高粱50g、淀粉酶(4萬μ/g)0.25g、糖化酶(10萬μ/g)2g和水60mL，所述半固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基為自然pH，所述半固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基的糖度為8BX至10BX。
[0015]進一步地，所述單菌落在所述半固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基上的培養(yǎng)溫度為35℃，培養(yǎng)時間為24h至48h。
[0016]本專利技術(shù)第三方面提供了如上所述的茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001在白酒發(fā)酵中的應(yīng)用。
[0017]進一步地，所述茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001用于生產(chǎn)愈創(chuàng)木酚和酸，所述酸包括檸檬酸和乳酸。
[0018]本專利技術(shù)的有益效果：
[0019]1、本專利技術(shù)提供的茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001能夠生產(chǎn)愈創(chuàng)木酚、對乙烯基愈創(chuàng)木酚、檸檬酸和乳酸，將其用于白酒中能夠提高白酒中的揮發(fā)性組分和功能性組分，從而有利于提高白酒的風(fēng)味和品質(zhì)，并提高白酒的優(yōu)品率；
[0020]2、本專利技術(shù)提供的茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001分離于清香型白酒曲中，將其應(yīng)用于白酒釀造中，易于與釀酒過程中的原有微生物共生共存，對原有微生態(tài)的影響較小，其使用對環(huán)境是無害的。
附圖說明
[0021]為了更清楚地說明本專利技術(shù)實施例中的技術(shù)方案，下面將對實施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本專利技術(shù)的一些實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
[0022]圖1為波茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001在固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h后的菌落形態(tài)圖；
[0023]圖2為波茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001在100倍油鏡顯微鏡下的結(jié)果圖；
[0024]圖3為波茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001的系統(tǒng)進化樹。
具體實施方式
[0025]下面將結(jié)合具體實施例對本專利技術(shù)的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述。顯然，所描述的實施例僅僅是本專利技術(shù)的一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本專利技術(shù)的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本專利技術(shù)保護的范圍。
[0026]需要說明的是，在不沖突的情況下，本專利技術(shù)中的實施例及實施例中的特征可以相互組合。另外，術(shù)語“包括”、“含有”、“具有”的含義是非限制性的，即可加入不影響結(jié)果的其
它步驟和其它成分。如無特殊說明的，材料、設(shè)備、試劑均為市售。
[0027]本申請實施例的第一方面提供了一種波茨坦短芽孢桿菌，具體為波茨坦短芽孢桿菌(Brevibacillus borstelensis)，菌株號為HHL
?
001，保藏編號為CCTCC M 20221275，于2022年8月15日保藏于湖北省武漢市武昌區(qū)武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
[0028]本實施例中的波茨坦短芽孢桿菌(Brevibacillus borstelensis)HHL
?
001分離于湖北黃鶴樓有限公司的清香型白酒曲，其能夠生產(chǎn)愈創(chuàng)木酚、對乙烯基愈創(chuàng)木酚、檸檬酸和乳酸，將其用于白酒中能夠提高白酒中的揮發(fā)性組分和功能性組分，從而有利于提高白酒的風(fēng)味和品質(zhì)，并提高白酒的優(yōu)品率。
[0029]波茨坦短芽孢桿菌(Brevibacillus borstelensis)HHL
?
001的特性如下：
[0030]形態(tài)特征：菌株革蘭氏陽性，需氧，可水解淀粉，V<本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
【技術(shù)特征摘要】
1.一種茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001，其特征在于，保藏編號為CCTCC M20221275。2.一種茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001的篩選方法，其特征在于，包括如下步驟：配制清香型白酒大曲的菌懸液；將所述菌懸液梯度稀釋后，得到稀釋液，將所述稀釋液均勻涂布于固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，根據(jù)所述固體培養(yǎng)基上菌落的形態(tài)和透明圈，挑選目標(biāo)菌落，將所述目標(biāo)菌落進行劃線純化，制備得到純化后的單菌落；從所述單菌落中篩選出透明圈最大的菌株，并將所述透明圈最大的菌株接種于半固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中，培養(yǎng)完成后，篩選出愈創(chuàng)木酚產(chǎn)量最高的菌株，保藏備用，得到所述茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001的篩選方法，其特征在于，所述根據(jù)所述固體培養(yǎng)基上菌落的形態(tài)和透明圈，挑選目標(biāo)菌落包括：先挑選所述固體培養(yǎng)基上有明顯透明圈的菌落，再挑選出不同形態(tài)的菌落，作為目標(biāo)菌落。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的茨坦短芽孢桿菌HHL
?
001的篩選方法，其特征在于，所述從所述單菌落中篩選出透明圈最大的菌株包括：將所述單菌落單獨點至所述固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并測量各菌的透明圈比值，選取透明圈最大的菌株。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的茨坦短芽孢桿菌HHL
?
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：董孝元，李俊薇，李良，方尚玲，張玉，劉占奇，凌荔，
申請(專利權(quán))人：黃鶴樓酒業(yè)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。