蛋白質類藥物的注射用緩釋微粒制劑及其制造方法技術

提供蛋白質類藥物的注射用緩釋微粒制劑及其制造方法，其特點是在制造時，盡量避免使用有機溶劑，避免同時使用與水不互溶的有機溶劑和水溶液，所得制劑兼有生物體內的消失性和緩釋性，在３天以上時間內，以基本一定的速度緩慢釋放所含蛋白質類藥物，而且其藥物含量在５％以上，分散性，通針性良好。使生物體內消失性高分子覆蓋或附著含有蛋白質類藥物的多孔性磷灰石或其衍生物而制成該制劑。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】?蛋白質類藥物的注射用緩釋微粒制劑及其制造方法
本專利技術涉及以生物體內緩慢消失的多孔性磷灰石或其衍生物的微粒為基質的蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑及其制造方法。
技術介紹
關于蛋白質類藥物的長時間緩釋注射用制劑，目前為止大部分對聚乳酸·乙醇酸(PLGA)作為基質的方法進行了研究(例如，參照專利文獻1，2，非專利文獻1，2，3)。另外，含有人生長激素(hGH)并以PLGA作為基質的緩釋微囊在美國已用于實際的治療(例如，參照非專利文獻4)。PLGA是在生物體內可以通過水解而緩慢消失的生物體內消失性基質，作為注射劑的基質具有優選的性質。一般情況下，制造使用PLGA的緩釋制劑時，使用溶解其的有機溶劑。另外，大多數蛋白質類藥物為水溶性，制造使用PLGA的緩釋微粒制劑時，要同時使用有機溶劑溶液與水溶液。如果同時使用這兩種溶劑，蛋白質類藥物的一部分會變性，失活。這樣的活性下降，不僅會使有效性受損，還有可能對生物體造成不良影響。另外，對于水溶性蛋白質類藥物的緩釋微粒制劑，不能避免給藥初期(剛給藥后)一過性的過量釋放。另外，已有關于使用羥基磷灰石的人類生長激素(蛋白質類藥物)的緩釋微粒制劑的報道(例如，參照非專利文獻5，6)。但是，所有制劑都是2成分系統，磷灰石的粒徑為40到80μm或200μm，很難用細針進行注射給藥。另外，其體內緩釋效果不明。另外，磷灰石中含有的人生長激素量在1％以下，藥量很小。專利文獻1：特開平10-231252專利文獻2：美國專利5656297-->非專利文獻1：O.L.Johnson?et?al：Nature?Medicine，2：795-799，(1996)非專利文獻2：M.Takenaga?et?al：J.Pharmacy?Pharmacology，54：1189-1194，(2002)非專利文獻3：S.Takada?et?al：J.Controlled?Release，88：229-242，(2003)非專利文獻4：NDA?21-075非專利文獻5：J.Guicheux?et?al：J.Biomedical?MaterialsResearch，34：165-170，(1997)非專利文獻6：H.Gautier?et?al：J.Biomedical?MaterialsResearch，40：606-613，(1998)
技術實現思路
對于蛋白質類藥物的注射用緩釋制劑，必須選擇給藥后、在藥物釋放結束后，具有從生物體內消失的生物體內消失性功能的材料。另外，關于其制造，應避免同時使用與水不互溶的有機溶劑和水溶液，必須避免蛋白質類藥物的變性。另外，還存在以下問題，微粒制劑中的藥物含量如不能達到5％以上，制劑的給藥量會過大，用較細的注射針給藥時會產生困難，而且，多數情況要反復給藥，優選能夠通過細針的制劑，另外，緩釋時間至少在3天以上，優選1周以上，同時必須盡力減少作為引起副作用的原因的初期過量釋放。因此，本專利技術的目的是提供在制造時，極力回避有機溶劑的使用，避免同時使用非水混合性的有機溶劑和水溶液，所得的制劑，兼有生物體內消失性及緩釋性機能，在3天以上時間中，以基本一定速度緩慢釋放所含蛋白質類藥物，而且其藥物含量在5％以上，分散性，通針性良好的蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑及其制造方法。本專利技術人為解決這些課題，通過利用多孔性磷灰石或其衍生物的微粒，發現不用同時使用水和有機溶劑，即可得到兼有生物體內消失性及緩釋性機能的制劑。另外，發現在蛋白質類藥物中并用水溶性2-->價金屬化合物可以抑制蛋白質類藥物的初期過剩釋放。而且，發現用蛋白質類藥物充分浸潤多孔性磷灰石中后，使生物體內消失性高分子化合物覆蓋或附著，可以有更長時間的緩慢釋放，同時初期的過剩釋放更少。這里記載的構成蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑的多孔性磷灰石及其衍生物，可以是羥基磷灰石，也可以是將其構成成分鈣的一部分置換為鋅的化合物。此時鋅的置換率優選1～20％。多孔性磷灰石及其衍生物的微粒可以通過已知方法獲得。例如，可以列舉出“山口喬、柳田博明編，牧島亮南、青木秀希著：陶瓷科學叢書7：生物陶瓷，技報堂出版(株)，7-9頁，1984”中記載的方法等。根據構成羥基磷灰石的鈣(Ca)和磷(P)的比例不同，在生物體內的消失速度也不同，如果(Ca+Zn)/P的值小于1.67則易溶于水而在生物體內的消失速度變快。(Ca+Zn)/P的值優選1.67～1.51范圍。另外，制造磷灰石時的處理溫度較低時，易溶于水，消失速度也變快。采用室溫～800℃的處理溫度，優選150～600℃。進而更優選150～400℃。如果在800℃以上燒制則不能在生物體內消失。另外，如在100℃以下處理，粒子之間易于凝集，會引起難以進行通常的注射給藥。對于粒徑優選使用平均值50μm以下的粒子。但是，如果粒徑過小，蛋白質類藥物的封入率有可能降低，優選使用0.1～50μm，更優選0.5～30μm，進一步優選0.5～10μm。覆蓋該多孔性磷灰石的生物體內消失性高分子化合物，包括聚乳酸(PLA)或聚乳酸·乙醇酸(PLGA)，在聚乙二醇(PEG)中結合了PLA及/或PLGA的嵌段共聚物，膠原，聚氰基丙烯酸，聚氨基酸衍生物等，但是使用高濃度的PLA或PLGA，覆蓋了生物體內消失性高分子的磷灰石之間會發生凝集。另外，由于此時使用不與水混合的有機溶劑，如不完全除去，在最終工藝中的冷凍干燥時，由于加水，蛋白質類藥物有可能發生變性。因此，經過各種研究，結果確定在PEG中結合PLA或PLGA的嵌段共聚物是優選的。這一結合樣式中，可以是PEG的兩個末端的羥基與PLA或PLGA形成酯鍵結合的化合物，也可以是-->PEG的單末端形成酯鍵結合的化合物。單末端酯的情況，優選用OCH3，烷氧基等保護其他末端，但也可以結合氨基，羧基等官能基。PEG和PLA或PLGA的比例，優選PEG以重量比為20～90％，特別優選25～65％。嵌段共聚物的分子量優選全部為3,000～20,000，特別優選5,000～12,000。生物體內消失性高分子的用量，在磷灰石衍生物的3～100重量％的范圍使用，優選在5～30％的范圍使用。作為水溶性2價金屬化合物，可以列舉出氯化鋅，醋酸鋅，碳酸鋅，氯化鈣，氫氧化鈣，氯化鐵，氫氧化鐵，氯化鈷等。其中優選使用氯化鋅。除了氯化鋅也可以并用碳酸鈉或碳酸氫鈉等。其用量根據內封的蛋白質類藥物的不同而不同，一般來說，優選使用多孔性磷灰石的2～100重量％的范圍。進一步的優選范圍為2～30％。作為蛋白質類藥物，適用分子量5,000以上的化合物。例如，可以列舉出人類生長激素，肝細胞生長因子(HGF)，成纖維細胞生長因子(FGF)，IGF-1，EGF，NK4，VEGF，NGF，BDNF，BMP，脂聯素(adiponectin)，干擾素(INF-α)，白介素(IL-2，IL-4，IL-5等)，EPO，G-CSF，胰島素，ANP，TNF-α，抗體等。其用量根據蛋白質類藥物及緩釋時間而異，向多孔性磷灰石內的封入量優選盡可能多。向多孔性磷灰石內穩定地封入的量一般為磷灰石的5～50％。本專利技術的蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑的制造方法，一般按下面操作進行。將多孔性磷灰石或其衍生物的微粒分散于蛋白質類藥物水溶液本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑，其特征是使生物體內消失性高分子覆蓋或附著含有蛋白質類藥物的多孔性磷灰石或其衍生物。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】JP 2004-2-26 051526/20041.一種蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑，其特征是使生物體內消失性高分子覆蓋或附著含有蛋白質類藥物的多孔性磷灰石或其衍生物。2.權利要求1中記載的蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑，其特征是前述生物體內消失性高分子為由聚乙二醇和聚乳酸或聚乳酸·乙醇酸構成的嵌段共聚物。3.權利要求2中記載的蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑，其特征是前述由聚乙二醇和聚乳酸或聚乳酸·乙醇酸構成的嵌段共聚物為由聚乳酸或聚乳酸·乙醇酸-聚乙二醇-聚乳酸或聚乳酸·乙醇酸構成的嵌段共聚物。4.權利要求2中記載的蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑，其特征是前述由聚乙二醇和聚乳酸或聚乳酸·乙醇酸構成的嵌段共聚物的重均分子量為3,000到20,000。5.權利要求2或3中記載的蛋白質類藥物的注射用緩釋性微粒制劑，其特征是前述由聚乙二醇和聚乳酸或聚乳酸·乙醇酸構成的嵌段共聚物中，聚乙二醇的重量...

【專利技術屬性】
技術研發人員：小川泰亮，宮本陽子，新美純，藤井隆雄，
申請(專利權)人：獨立行政法人科學技術振興機構，格蘭尼探索研究所，
類型：發明
國別省市：JP[日本]