【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及皮膚表面代謝物檢測，尤其涉及一種用于皮膚表面代謝物提取與原位檢測的貼片的制備方法。
技術介紹
1、皮膚表面代謝物通常具有特定的生理功能，其含量的改變可以提示疾病的發生或生理狀態的改變，對皮膚表面小分子化合物進行采集、檢測和量化分析可以用于皮膚屏障功能完整性的評估，在疾病診斷、健康評估方面具有一定的潛力。
2、為了實現對皮膚表面小分子化合物的研究，存在不同的皮膚標本采集和鑒定方法，常規的皮膚代謝物的取樣技術主要包括皮膚活檢、微透析、微灌注，這些方法通常被認為是耗時長、并有潛在并發癥風險。近年來一些非侵入性原位采樣技術逐漸被開發，包括汗液取樣、膠帶剝離取樣、水凝膠貼片取樣等，可以用于皮膚表面代謝物的微量收集，并進行下一步的代謝物檢測。目前，皮膚表面代謝物的主要檢測平臺是核磁共振和質譜技術，主要利用核磁共振、氣相色譜與質譜聯用、液相色譜與質譜聯用和毛細血管電泳與質譜聯用等方法對代謝物進行鑒定。這些檢測方法在代謝物分析之前需要對采集的樣本進行樣品純化、提取和分析物預濃縮等步驟，以便將生物樣品轉化為更適合分析儀器檢測的狀態，耗費時間長、價格昂貴還需要專業人員的操作，無法小型化，便攜化。
3、因此，目前需要開發一種關鍵技術以實現皮膚表面代謝物質的有效、無創提取并對其進行原位、快速檢測的方法，避免傳統有創采樣方法帶來的不適感，同時原位檢測的方法可以避免樣本提取后，在預處理、儲存和運輸過程中的繁瑣步驟和被污染的風險，進而實現對皮膚生化狀態日常簡易評估。
技術實現思路>
1、本專利技術提供了一種用于皮膚表面代謝物提取與原位檢測的貼片的制備方法，通過制備多孔聚乙烯醇水凝膠以實現對皮膚表面代謝物的高效采樣；為避免復雜的提取和進一步的儲存運輸以用于傳統的實驗室代謝物檢測，本專利技術可直接利用便攜式小型生化傳感器對水凝膠中即時提取的皮膚表面代謝物進行原位、無創檢測，同時設計一個微腔室部件放置水凝膠，防止其在空氣環境的過度失水，保證代謝物檢測的準確性。
2、為達到上述目的，本專利技術提供的用于皮膚表面代謝物提取與原位檢測的貼片的制備方法，包括：
3、步驟s1，制備多孔聚乙烯醇水凝膠；
4、步驟s2，設計和制備便攜式小型生化傳感器；
5、步驟s3，激光切割出代謝物提取與檢測貼片所需的微腔室部件；
6、步驟s4，將所述微腔室部件、所述便攜式小型生化傳感器和所述水凝膠進行組裝，得到貼片；
7、步驟s5，將所述貼片貼附到目標對象，進行皮膚表面代謝物的提取和原位檢測。
8、可選地，所述步驟s1具體包括：將聚乙烯醇溶液與堿溶液混合，并添加水溶性蔗糖作為模板分子，交聯后將聚乙烯醇凝膠浸泡在去離子水中，以將所述水溶性蔗糖和多余的堿脫出，形成所述多孔聚乙烯醇水凝膠。
9、可選地，所述步驟s1之后，還包括：將所述多孔聚乙烯醇水凝膠裁剪成所需形狀，并浸泡在特定溶劑中儲存，以便后期使用，其中，所述特定溶劑包括去離子水、磷酸鹽緩沖液或氯化鉀溶液。
10、可選地，所述步驟s2包括：選擇聚對苯二甲酸乙二醇酯或聚酰亞胺作為襯底。
11、可選地，所述步驟s2還包括：以預定方式制備電極，其中，所述預定方式包括以下中的任意一種：旋涂碳油墨、激光刻蝕石墨烯、在所述襯底上熱蒸鍍鉻/金、在所述襯底上絲網印刷碳油墨。
12、可選地，所述步驟s2還包括：根據檢測目標對所述傳感器進行設計，其中，所述傳感器包括氨基酸傳感器、尿素傳感器、鈉離子傳感器或鉀離子傳感器。
13、可選地，在步驟s3，所述微腔室部件包括：用于支撐所述傳感器的基底層；用于存儲所述水凝膠的空腔層，其中，所述空腔層的高度大于所述水凝膠；以及用于防止所述水凝膠失水的覆蓋層。
14、可選地，在步驟s5，將所述貼片貼附到目標對象之前，還包括：將所述覆蓋層撕去。
15、可選地，所述步驟s5包括：在所述貼片與皮膚接觸后，皮膚、所述水凝膠以及所述傳感器構成一個三明治結構，其中，所述水凝膠作為一個中間層，其兩側分別和皮膚以及傳感器接觸；所述水凝膠與皮膚接觸的一側可實現代謝物的提取，所述水凝膠與傳感器接觸的一側可為電極提供含有代謝物的液體環境，使得所述傳感器可同步對代謝物水平進行測定。
16、可選地，所述步驟s5還包括：在進行皮膚表面代謝物的提取和原位檢測時，采樣時間大于3min。
17、與現有技術相比，本專利技術提供的用于皮膚表面代謝物提取與原位檢測的貼片的制備方法，至少具有以下有益效果：
18、(1)相比于活檢和膠帶剝離等有創和微創的皮膚代謝物提取方式，本專利技術中的多孔水凝膠提取方法具有提取效率高，且不會引起目標的不適以及并發癥的風險；
19、(2)相比于基于核磁、質譜等設備的檢測方式，該貼片操作簡單、成本低，易于小型化；
20、(3)多孔水凝膠采集的樣本無需任何預處理，包括提純和預濃縮等繁瑣的步驟即可直接用于分析；
21、(4)檢測目標靈活、可根據需要設計不同的傳感器，用于皮膚代謝物的檢測。
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1.一種用于皮膚表面代謝物提取與原位檢測的貼片的制備方法，其特征在于，包括：
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S1具體包括：
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S1之后，還包括：
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S2包括：
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S2還包括：
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S2還包括：
7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在步驟S3，所述微腔室部件包括：
8.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于，在步驟S5，將所述貼片貼附到目標對象之前，還包括：
9.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S5包括：
10.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S5還包括：
【技術特征摘要】
1.一種用于皮膚表面代謝物提取與原位檢測的貼片的制備方法，其特征在于，包括：
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟s1具體包括：
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟s1之后，還包括：
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟s2包括：
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述步驟s2還包括：
6.根...
【專利技術屬性】
技術研發人員：王麗麗，袁穎，鐘博文，婁正，徐浩，
申請(專利權)人：中國科學院半導體研究所，
類型：發明
國別省市：
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