【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于免疫，特別涉及一種磷酸鋁佐劑及其制備方法。
技術(shù)介紹
1、接種疫苗是預(yù)防傳染病的最重要的手段之一，佐劑是提高疫苗接種效果的基本成分，鋁鹽與抗原混合后注射入生物體內(nèi)，能夠誘導(dǎo)比單獨(dú)施用抗原更多的抗體產(chǎn)生，鋁鹽佐劑沿用至今已經(jīng)有90多年的歷史。盡管新型佐劑飛速發(fā)展，但大部分處于試驗(yàn)階段，由于經(jīng)食品與藥物管理局批準(zhǔn)用于人疫苗的唯一佐劑是含鋁佐劑，它們安全和有效使用的歷史悠久，使得目前市面上鋁佐劑的使用仍然占據(jù)很大一部分比例。
2、目前商品化的磷酸鋁(aluminium?phosphate,ap)佐劑粒徑為3-4μm，等電點(diǎn)為ph5，在生理?xiàng)l件下帶負(fù)電，是較好的陽離子蛋白吸附劑。研究表明，磷酸鋁佐劑的免疫效果很大部分取決于佐劑對蛋白的吸附能力，不同的鋁佐劑具有不同的顆粒大小、等電點(diǎn)和形態(tài)特征，這可能導(dǎo)致佐劑對抗原的親和力和疫苗效力的差異。免疫優(yōu)勢可以通過減小鋁佐劑顆粒的尺寸來實(shí)現(xiàn)，以產(chǎn)生更有效的佐劑刺激細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)。相比微米級(磷酸鋁顆粒的尺寸為3-4μm)的鋁佐劑，微納尺寸(磷酸鋁顆粒的尺寸為300nm-600nm)的鋁佐劑顆粒更小，比表面積更大，與抗原的結(jié)合面積更大，生物相容性更好，可以提高人體的免疫應(yīng)答，大幅降低佐劑的副作用。因此通過粒徑調(diào)控生產(chǎn)不同粒徑的磷酸鋁佐劑是研究磷酸鋁佐劑的重點(diǎn)。
3、但是微納尺寸的磷酸鋁佐劑的理化性質(zhì)受制備條件的影響較大，制備工藝重復(fù)性較差。因此，本領(lǐng)域仍舊需要一種工藝穩(wěn)定且操作簡單便捷的方法，來實(shí)現(xiàn)微納尺寸的磷酸鋁佐劑的制備。
技
1、為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本專利技術(shù)通過使用化學(xué)沉淀法制備微米級磷酸鋁佐劑后，通過置換緩沖體系調(diào)節(jié)磷酸鋁佐劑的粒徑，專利技術(shù)了一種簡單高效的調(diào)節(jié)磷酸鋁佐劑的粒徑的方法，以及制備微納尺度范圍內(nèi)的磷酸鋁佐劑的方法。
2、本專利技術(shù)第一方面提供了一種調(diào)節(jié)磷酸鋁佐劑粒徑的方法，所述方法包括將微米級磷酸鋁采用如下任意一種方式進(jìn)行重懸處理的操作：
3、1)采用cit緩沖體系作為重懸液時：
4、將微米級磷酸鋁重懸在ph為6-8的cit緩沖體系中，使得磷酸鋁佐劑中磷酸鋁的粒徑為400nm-430nm；
5、2)采用pb緩沖體系作為重懸液時：
6、將微米級磷酸鋁重懸在ph為6.5-8的pb緩沖體系中，使得磷酸鋁佐劑中磷酸鋁的粒徑為445nm-585nm；
7、3)采用tris緩沖體系作為重懸液時：
8、將微米級磷酸鋁重懸在ph為7.8-8.2的tris緩沖體系中，使得磷酸鋁佐劑中磷酸鋁的粒徑為420nm-460nm；
9、將微米級磷酸鋁重懸在ph為6.0-7.5的tris緩沖體系中，使得磷酸鋁佐劑中磷酸鋁的粒徑為3000nm-3500nm；
10、4)采用pbs緩沖體系作為重懸液時：
11、將微米級磷酸鋁重懸在ph為6-6.5的pbs緩沖體系中，使得磷酸鋁佐劑中磷酸鋁的粒徑為3300nm-4200nm；
12、將微米級磷酸鋁重懸在ph為6.8-8的pbs緩沖體系中，使得磷酸鋁佐劑中磷酸鋁的粒徑為2600nm-3300nm。
13、本專利技術(shù)第二方面提供了一種磷酸鋁佐劑的制備方法，所述方法包括將微米級磷酸鋁采用如下任意一種方式進(jìn)行重懸處理的操作：
14、1)采用cit緩沖體系作為重懸液時：
15、將微米級磷酸鋁重懸在ph為6-8的cit緩沖體系中，使得磷酸鋁佐劑中的磷酸鋁的粒徑為400nm-430nm；
16、2)采用pb緩沖體系作為重懸液時：
17、將微米級磷酸鋁重懸在ph為6.5-8的pb緩沖體系中，使得磷酸鋁佐劑中的磷酸鋁的粒徑為445-585nm；
18、3)采用tris緩沖體系作為重懸液時：
19、將微米級磷酸鋁重懸在ph為7.8-8.2的tris緩沖體系中，使得磷酸鋁佐劑中的磷酸鋁的粒徑為420nm-460nm。
20、在一個優(yōu)選的具體實(shí)施方式中，所述微米級磷酸鋁采用化學(xué)沉淀法制備得到；
21、所述化學(xué)沉淀法制備微米級磷酸鋁包括：將鋁鹽溶液和磷酸鹽溶液按照p/al摩爾比為1：1的比例混合均勻獲得初始磷酸鋁佐劑后，再進(jìn)行沉淀處理，收取沉淀即獲得微米級磷酸鋁沉淀物；
22、優(yōu)選地，所述化學(xué)沉淀法制備微米級磷酸鋁在60℃條件下操作；
23、優(yōu)選地，所述鋁鹽為氯化鋁、硫酸鋁鉀、硝酸鋁中的至少一種；
24、優(yōu)選地，所述磷酸鹽為磷酸三鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸三鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀中的至少一種。
25、在一個優(yōu)選的具體實(shí)施方式中，所述重懸處理為：按照將微米級磷酸鋁進(jìn)行沉淀處理之前的體積與重懸液的體積比為1：(0.5-5)，優(yōu)選為1：(1-3)，進(jìn)一步優(yōu)選為1：1的比例，將微米級磷酸鋁沉淀物在重懸液中進(jìn)行重懸。
26、在一個優(yōu)選的具體實(shí)施方式中，所述磷酸鋁佐劑的制備方法還包括：將微米級磷酸鋁沉淀進(jìn)行水洗之后再進(jìn)行重懸的操作；
27、優(yōu)選地，所述水洗為2-3次。
28、在一個優(yōu)選的具體實(shí)施方式中，所述磷酸鋁佐劑的制備方法還包括：將微米級磷酸鋁沉淀進(jìn)行殺菌處理之后再進(jìn)行重懸的操作；
29、優(yōu)選地，所述殺菌處理為臭氧殺菌、輻照殺菌、高溫蒸汽滅菌中的任意一種。
30、在一個優(yōu)選的具體實(shí)施方式中，所述cit緩沖體系即檸檬酸鹽緩沖液；采用檸檬酸、檸檬酸鈉和水配制而成，通過調(diào)整檸檬酸和檸檬酸鈉的相對用量來調(diào)節(jié)cit緩沖體系的ph；
31、所述pb緩沖體系即磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩沖液；采用磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉和水配制而成，通過調(diào)整磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉的相對用量來調(diào)節(jié)pb緩沖體系的ph；
32、所述tris緩沖體系即tris-hcl緩沖液；采用tris、hcl和水配制而成，通過調(diào)整tris和hcl的相對用量來調(diào)節(jié)tris緩沖體系的ph；
33、所述pbs緩沖體系即磷酸緩沖鹽溶液；采用磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氯化鈉和水配制而成，通過調(diào)整磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉的相對用量來調(diào)節(jié)pbs緩沖體系的ph。
34、本專利技術(shù)第三方面提供了根據(jù)本專利技術(shù)第二方面提供的磷酸鋁佐劑的制備方法制備得到的磷酸鋁佐劑。
35、在一個優(yōu)選的具體實(shí)施方式中，當(dāng)采用cit緩沖體系時，緩沖液的ph為6時，ap的粒徑、電位和ph依次為405nm、-45.53mv、6.22；緩沖液的ph為6.5時，ap的粒徑、電位和ph依次為403nm、-46.58mv、6.50；緩沖液的ph為7時，ap的粒徑、電位和ph依次為426nm、-48.58mv、6.65；緩沖液的ph為7.5時，ap的粒徑、電位和ph依次為417nm、-48.91mv、6.67；緩沖液的ph為8時，ap的粒徑、電位和ph依次為409nm、-47.12mv、6.69；
36、當(dāng)采用pb緩沖體系，緩沖液的本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種調(diào)節(jié)磷酸鋁佐劑粒徑的方法，其特征在于，所述方法包括將微米級磷酸鋁采用如下任意一種方式進(jìn)行重懸處理的操作：
2.一種磷酸鋁佐劑的制備方法，所述方法包括將微米級磷酸鋁采用如下任意一種方式進(jìn)行重懸處理的操作：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的磷酸鋁佐劑的制備方法，其特征在于：
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的磷酸鋁佐劑的制備方法，其特征在于：
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的磷酸鋁佐劑的制備方法，其特征在于：
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的磷酸鋁佐劑的制備方法，其特征在于：
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的磷酸鋁佐劑的制備方法，其特征在于：
8.權(quán)利要求2至7中任一項(xiàng)所述的磷酸鋁佐劑的制備方法制備得到的磷酸鋁佐劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的磷酸鋁佐劑，其特征在于：
10.含有權(quán)利要求8或9所述的磷酸鋁佐劑的疫苗。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種調(diào)節(jié)磷酸鋁佐劑粒徑的方法，其特征在于，所述方法包括將微米級磷酸鋁采用如下任意一種方式進(jìn)行重懸處理的操作：
2.一種磷酸鋁佐劑的制備方法，所述方法包括將微米級磷酸鋁采用如下任意一種方式進(jìn)行重懸處理的操作：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的磷酸鋁佐劑的制備方法，其特征在于：
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的磷酸鋁佐劑的制備方法，其特征在于：
5.根據(jù)權(quán)利要求...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：尹全義，張淑雅，韓霞，喬曼，劉志磊，安有才，
申請(專利權(quán))人：易慧生物技術(shù)上海有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。