抗皮膚真菌復方制劑制造技術

抗皮膚真菌復方制劑，命名為“復方抗癬劑”，其特征在于，該制劑是通過以下方法制備而成的：（１）取黃芩、玄參、川芎、土槿皮、厚樸生藥各５０ｇ，加水１０００～１５００ｍＬ，大火開鍋、文火煮３０ｍｉｎ，藥汁用４層潔凈、滅菌紗布過濾，保留濾液；所獲濾渣再重復煎煮２次后棄渣；合并３次濾液，經文火加熱濃縮至不足２５０ｍＬ，加水定容至２５０ｍＬ即為復方中藥原液；（２）取復方中藥原液作２０倍稀釋，按１．２５ｍｇ／ｍＬ添加冰醋酸，即成抗皮膚真菌復方制劑藥液。

【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種抗皮膚真菌復方制劑，屬于寵物臨床藥物研制和開發領域。二
技術介紹
在獸醫臨床實踐中，犬皮膚真菌病是一種十分常見和多發的疾病。致病真菌過量黏 附于犬皮膚，侵入皮膚毛發或趾甲、大量增殖，引起皮膚器質性病變的發生。犬皮膚真 菌病的病程長、治愈難、易復發，并可在動物與動物，人與人、人與動物間互相傳播， 造成嚴重的公共衛生問題。其平均發病率約為10% 40%，發病率高、復發率亦高，已 日益受到獸醫臨床工作者的關注。目前，常用的抗真菌藥主要有多烯類、哇類、丙烯胺 類、細胞壁抑制劑等；這些藥物和相關療法雖都有一定的療效，但多數藥物價格較貴、 具有毒副作用，并且因耐藥菌株的增多，使此類藥物的應用和療效受到限制。中藥是我國的傳統優勢資源。研究表明，具有較好抑真菌活性的中藥多達300多種； 中藥價格低廉、效果確實。近幾十年來，隨著科技水平的不斷提高，中藥的開發和利用 已受到更多的重視和關注。在利用中藥進行抗真菌作用研究方面，也已取得了不少進展。 中藥用于真菌病的防治，不僅效果好、副作用少，也不易產生耐藥性。如何充分利用這 一優勢，研制出新型的抗真菌藥物，不僅有助于發揮我國傳統醫學和資源的優勢，而且 有助于滿足寵物市場臨床藥物的快速需求，具有重要的應用價值。遺憾的是，至今尚未 形成確實、可靠的中藥抗真菌制劑。針對犬皮膚真菌病常見病原，篩選出一種具有臨床防治作用的復方中西結合制劑， 是一項十分繁雜的工作。首先要調査、分離犬皮膚真菌病原，進行中藥的制備和篩選， 其次進行組方和抑真菌實驗，再次進行藥物的刺激性和毒性實驗，最后進行藥效學實驗。 以期研制一種藥效穩定、可靠，經濟、實用、有效的復方抗真菌制劑，為寵物臨床藥物 的研制和開發作出貢獻。三
技術實現思路
技術問題-本專利技術的目的是針對目前獸醫臨床上尚缺乏抗真菌中藥復方的現實，研制一種復方 中西結合抗真菌制劑。所獲復方無毒性及皮膚刺激性，抑殺真菌效率高，用藥后抑菌率 達80%以上。技術方案抗皮膚真菌復方制劑，命名為復方抗癬劑，其特征在于，通過以下方法制成的(1) 采用中藥水提取法按如下流程制備中藥原液取黃芩、玄參、川芎、土槿皮、厚樸各50g，加水1000 1500 mL，大火開鍋、文 火煮30 min，藥汁用4層潔凈、滅菌紗布過濾，保留濾液；所獲濾渣再重復煎煮2次 后棄渣；合并3次濾液，經文火加熱濃縮至不足250 mL，加水定容至250 mL即為復方 中藥原液；(2) 取復方中藥原液作20倍稀釋，按1.25 mg/mL添加冰醋酸，即成抗皮膚真菌 復方制劑藥液。抗皮膚真菌復方制劑用法其噴劑直接均勻噴涂患部，2次/d，連用14 d;藥浴時， 2次/周，卩0 min/次；噴涂和藥浴單獨使用，或配合使用。有益效果-本成果針對目前獸醫臨床上尚缺乏抗真菌中藥復方的現實，研制出復方中西結合抗 真菌制劑一復方抗癬劑，提供了一種有效的犬皮膚真菌病臨床防治藥物。其主要優點和有益效果如下1、 藥物來源豐富復方中5味中藥和冰醋酸均屬普通藥物。來源豐富，價格便宜， 生產成本相對較低，適于廣泛的臨床應用。2、 藥效顯著實驗研究表明，復方抗癬劑對4種病原真菌均有100%的抑菌效果， 藥物在較低濃度時即可起到理想的抑菌作用。臨床用藥后，對犬體表真菌的抑菌率達90.9%。3、 無毒性、無皮膚刺激性復方抗癬劑既可用于噴劑，也可用于藥浴。復方的安全性和刺激性實驗表明，該復方安全無毒，對皮膚無刺激性。4、 組方科學合理中醫理論認為，真菌病的病因多是濕熱蘊蒸，濕熱下注，蟲毒 侵襲。復方以黃芩、玄參、川芎、土荊皮、厚樸等藥物組成。黃芩具有廣譜抗真菌和抗 炎作用；玄參具有抗微生物及其毒素的作用；川芎活血行氣，有抑真菌作用，紫荊皮能 殺蟲止癢、清熱燥濕，具有止痛作用；厚樸有治肌膚壞死之功、驅蟲之效。它們相互協 同，具有比較明顯的體外抑真菌效果。復方中添加有1.25 mg/mL冰醋酸，冰醋酸單獨 使用時即具有抗真菌作用，3%濃度有直接殺菌作用，可治療各種皮膚淺部真菌感染， 組方時添加濃度為0.125%，中西藥結合的體外抑菌效果表明，該方對4種常見皮膚真 菌有較好的抑制作用。四附圖說明圖l.真菌的分離與鑒定(l.犬小孢子菌培養；2.犬小孢子菌鏡檢;3.石膏樣小孢子菌培養4. 石膏樣小孢子菌鏡檢；5.絮狀表皮癬菌培養；6.絮狀表皮癬菌鏡檢；7.馬拉色菌培養；8.馬拉色菌鏡檢)圖2.中藥抗真菌與皮膚刺激性試驗(l.部分中藥抗真菌MIC測定；2.部分單味中藥篩選試驗； 3.破損皮膚顯示輕微紅斑；4.完整皮膚無明顯異常變化)五具體實施例方式(一)抗皮膚真菌復方制劑的評價方法及指標1、 31味中藥體外抑真菌作用1) 中藥選擇31味中藥的選擇主要根據現有報道中具有抑真菌活性的中藥，結合其作用效果、來源、價格等因素，用于作為組方的候選藥物。其中包括(1) 清熱解毒藥生黃芩、熟地黃、苦參、黃柏、白頭翁(2) 活血化淤藥川芎、玄參、丹參、夏枯草、漏蘆(3) 殺蟲藥土槿皮、土茯苓、使君子、白芍、百部、檳榔、地膚子、拔契、蛇 床子、虎杖、白癬皮、青蒿(4) 理氣藥厚樸、丁香、菖蒲(5) 芳香化濕藥霍香(6) 收斂藥烏梅(7) 利水藥木通(8) 解表藥防風、蒿本、紫蘇葉各取50 g，分別加水200 300 mL，開鍋后煮20 min，將藥汁用紗布濾出。再重 復煎煮2次，合并濾液，濃縮至50 mL。制得水煎液用于實驗，濃度IOOO mg/mL。2) 病原真菌分離培養門診犬皮膚真菌病病例，經刮片檢查為真菌陽性或伍氏燈檢査見熒光者，于患部采 集毛發數根接種于平皿。第1階段培養用沙氏培養基(SDA)于28'C培養3 4周后， 作菌落宏觀檢驗(菌落生長快慢、色澤、表面形狀等)，并通過鏡檢(微觀檢査)進行真 菌鑒定；未鑒定出則進入第2階段培養，換用其他培養基(DTM、 PDA)培養3 4周， 再根據宏觀、微觀檢查作真菌鑒定。共分離鑒定出4種常見病原真菌犬小孢子菌(必'craspor^7ca/7J^5oA'77, 1902)、 石膏樣小孢子菌(iZ/cmsTWiTw/gj^seu/z/i^i/ , 1907)、絮狀表皮癬菌(加Vejyc。p/^0/3 /7occos腿泡r&， 1870).和馬拉色菌(ife/assezi3 /r/i/r o6i/^泡i^朋)《以上 真菌見魏景超.真菌鑒定手冊.上海科學技術出版社.1979》。3) 31味中藥體外抑真菌實驗(1)真菌菌液制備常規制取SDA培養基，將分離保存的病原真菌接種于SDA培 養基中央，28。C活化培養7 10d;加含0. 1%吐溫-20的生理鹽水2 mL于活化好的菌苔表面；刮取菌苔，置于組織研磨器中研磨10 min，至懸液呈毛玻璃狀；利用血細胞 計數板，調整菌液濃度為(2 6) X106cfu/mL，備用。(2)藥基制備常規制取SDA培養基，分裝至132只試管內，每管1.5mL，置斜 面，冷卻備用；生藥濃度為1000 mg/mL的中藥水溶液，加入上述試管內各1.5ml;每 味中藥作4只試管，共計31X4=124只，分別編號；設陽性對照組4只試管，分別加 入濃度為25mg/mL的特比萘芬1. 5 mL，終濃度為12. 5 mg/mL;設陰性對照組4只試管， 分別加入生理鹽水1. 5 mL;共本文檔來自技高網...

【技術保護點】
抗皮膚真菌復方制劑，命名為“復方抗癬劑”，其特征在于，該制劑是通過以下方法制備而成的：（１）取黃芩、玄參、川芎、土槿皮、厚樸生藥各５０ｇ，加水１０００～１５００ｍＬ，大火開鍋、文火煮３０ｍｉｎ，藥汁用４層潔凈、滅菌紗布過濾，保留濾液；所獲濾渣再重復煎煮２次后棄渣；合并３次濾液，經文火加熱濃縮至不足２５０ｍＬ，加水定容至２５０ｍＬ即為復方中藥原液；（２）取復方中藥原液作２０倍稀釋，按１．２５ｍｇ／ｍＬ添加冰醋酸，即成抗皮膚真菌復方制劑藥液。

【技術特征摘要】
1、抗皮膚真菌復方制劑，命名為“復方抗癬劑”，其特征在于，該制劑是通過以下方法制備而成的(1)取黃芩、玄參、川芎、土槿皮、厚樸生藥各50g，加水1000～1500mL，大火開鍋、文火煮30min，藥汁用4層潔凈、滅菌紗布過濾，保留濾液；所獲濾渣再重復煎煮2次后棄渣；合并3次濾液，經文火加熱濃縮至不足250mL，加水定容至2...

【專利技術屬性】
技術研發人員：芮榮，馬琪，宋大魯，
申請(專利權)人：南京農業大學，
類型：發明
國別省市：84