金霉素預混劑的制備方法技術

本發明專利技術公開了一種金霉素預混劑的制備方法，是將金色鏈霉菌采用純種二級發酵培養，培養基采用實罐滅菌法，在整個培養過程中嚴格保持無菌狀態并保持一定的罐溫、罐壓，通入無菌空氣并不斷攪拌，根據發酵代謝過程中的pH和糖量變化，采用通氨和補料的方式保持一定的酸堿度及營養，所得發酵液再經過鈣化、板框過濾、旋轉閃蒸干燥、粉碎、過篩、混合等過程，最終制得金霉素預混劑；本發明專利技術方法大大提高了發酵單位和提取收率，提高了產品質量和活性成分含量，同時生產工藝簡單、快速、穩定。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于獸藥領域，涉及一種抗生素預混劑的制備方法。
技術介紹
金霉素預混劑屬四環類抗生素藥物飼料添加劑，主要活性成分為金霉素鈣鹽，其抗菌譜廣，對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、螺旋體、立克次體、支原體、衣原體等均有較強的抑制作用，不僅可以預防和治療禽畜疾病如細菌性肺炎、細菌性腸炎、鉤端螺旋體病、豬鏈球菌性頰部膿腫、雞傳染性滑膜炎等，而且可以促進禽畜對營養物質的吸收，提高飼料轉化率，促進禽畜生長。此外，金霉素預混劑還具有生產工藝較成熟，效價較高，使用成本相對較低；人畜不交叉使用，避免了交叉耐藥；使用安全性高，低劑量長期使用不會引起藥物殘留；與其它獸藥之間少有配伍禁忌，可用作基礎藥物與其它獸藥制成復合藥物飼料添加劑·等優點。隨著畜牧業的進一步發展，近年來金霉素預混劑的市場需求量不斷擴大，預計在未來較長一段時間內也是藥物飼料添加劑的主力產品之一，而國外客戶對金霉素預混劑的質量要求越來越高(如金霉素含量大于23%)，且產品價格與活性成分含量直接相關，因此，有必要改進和完善。
技術實現思路
有鑒于此，本專利技術的目的在于提供一種改進的制備金霉素預混劑的方法，提高發酵單位和提取收率，提高產品質量和活性成分含量，同時生產工藝簡單、快速、穩定。為達到上述目的，本專利技術采用如下技術方案 ，包括以下步驟 a.種子培養將金色鏈霉菌atfreo/acie/75·)斜面孢子懸浮液接種入種子罐，用種子培養基在溫度30-33°C、通氣量1:1. 5-2.0 v/v/min、罐壓O. 03-0. 05 MPa、攪拌速度150-230 rpm/min的條件下培養20-26小時；所述種子培養基按質量百分濃度計由以下組分組成淀粉酶0-0. 05%、硫酸銨O.2-0. 6%、碳酸鈣O. 2-0. 6%、氯化鈣0-0. 3%、玉米蛋白0_1%、玉米淀粉3_5%、玉米漿0-0. 8%、葡萄糖0-0. 6%、硫酸鎂O. 02-0. 04%、花生餅粉0-4%、磷酸二氫鉀O. 01-0. 06%、氯化鈉0-0. 3%、黃豆餅粉0-4%、植物油或豆油0-0. 6%、酵母粉0-2%、余量為水； b.發酵培養將步驟a制得的種子培養液接入發酵罐，用發酵培養基在溫度28-33°C、通氣量 1:0. 8-1. O v/v/min、罐壓 O. 02-0. 05 MPa、攪拌速度 120-180 rpm/min 的條件下發酵培養80-160小時，在發酵培養過程中通過添加氨水確保發酵液pH在5. 6-6. 2之間，并根據發酵液的總糖濃度和總糖濃度控制指標添加補料培養基； 所述總糖濃度控制指標為發酵培養0-40小時控制總糖質量百分濃度不低于4. 0%,發酵培養40-80小時控制總糖質量百分濃度低于4. 0%但高于2. 5%，發酵培養80小時后控制總糖質量百分濃度不高于2. 5% ；所述發酵培養基按質量百分濃度計由以下組分組成淀粉酶O. 002-0. 02%、硫酸銨O. 5-1%、消泡劑0-0. 06%、碳酸鈣O. 4-0. 7%、氯化鈣0_1%、玉米蛋白0_1%、玉米淀粉0_8%、玉米漿0-2%、葡萄糖0-1%、硫酸鎂O. 001-0. 3%、花生餅粉0-4%、磷酸二氫鉀O. 01-0. 03%、氯化鈉O. 1-0. 4%、黃豆餅粉0-5%、植物油或豆油0-0. 3%、酵母粉0-2%、余量為水； 所述補料培養基按質量百分濃度計由以下組分組成淀粉酶0-0. 08%、硫酸銨0-0. 7%、消泡劑O. 02-0. 08%、碳酸鈣O. 2-0. 6%、氯化鈣0-1. 0%、玉米蛋白0-1. 0%、玉米淀粉0_50%、玉米漿0-2. 6%、葡萄糖0-0. 6%、硫酸鎂0-0. 03%、花生餅粉0_1%、磷酸二氫鉀0-0. 02%、氯化鈉0.2-0. 5%、黃豆餅粉0-1%、植物油或豆油0-0. 6%、酵母粉0-0. 5%、余量為水； c.提取取步驟b制得的發酵液，加入相當于發酵液體積0-12%的碳酸鈣，攪拌20-40分鐘，板框壓濾，壓濾完畢后，將板框濾餅在進風溫度210-26(TC、排風溫度90-120°C條件下進行旋轉閃蒸干燥，干燥物料經振動篩篩分，篩上的大顆粒經粉碎機粉碎后重新篩分，最后混合，即得金霉素預混劑。·優選的，所述種子培養基按質量百分濃度計由以下組分組成硫酸銨O. 4-0. 5%、碳酸鈣O. 4%、玉米淀粉3. 6-4%、硫酸鎂O. 02%、花生餅粉I. 6-1. 8%、磷酸二氫鉀O. 03%、氯化鈉O. 12%、黃豆餅粉I. 3-1. 5%、植物油或豆油O. 5%、酵母粉I. 0-1. 1%、余量為水。優選的，所述發酵培養基按質量百分濃度計由以下組分組成淀粉酶O. 006%、硫酸銨O. 88%、消泡劑O. 02%、碳酸鈣O. 6%、氯化鈣O. 6%、玉米淀粉6. 05%、玉米漿I. 4-1. 8%、硫酸鎂O. 16%、花生餅粉I. 7%、磷酸二氫鉀O. 03%、氯化鈉O. 22%、黃豆餅粉I. 0-1. 5%、植物油或豆油O. 2%、酵母粉O. 8-1. 2%、余量為水。優選的，所述補料培養基按質量百分濃度計由以下組分組成淀粉酶O. 03%、硫酸銨O. 25%、消泡劑O. 03%、碳酸鈣O. 375%、氯化鈣O. 25%、玉米淀粉40%、玉米漿I. 7-2. 0%、氯化鈉O. 375%、植物油或豆油O. 075%、余量為水。更優選的，所述包括以下步驟 a.種子培養將金色鏈霉菌atfreo/acie/75·)斜面孢子懸浮液接種入種子罐，用種子培養基在溫度30-33°C、通氣量1:1. 5-2.0 v/v/min、罐壓O. 03-0. 05 MPa、攪拌速度150-230 rpm/min的條件下培養24小時； 所述種子培養基按質量百分濃度計由以下組分組成硫酸銨O. 42%、碳酸鈣O. 4%、玉米淀粉3. 67%、硫酸鎂O. 02%、花生餅粉I. 67%、磷酸二氫鉀O. 03%、氯化鈉O. 12%、黃豆餅粉1.33%、植物油O. 5%、酵母粉I. 04%、余量為水； b.發酵培養將步驟a制得的種子培養液接入發酵罐，用發酵培養基在溫度28-33°C、通氣量 1:0. 8-1. O v/v/min、罐壓 O. 02-0. 05 MPa、攪拌速度 120-180 rpm/min 的條件下發酵培養85小時，在發酵培養過程中通過添加氨水確保發酵液pH在5. 6-6. 2之間，并根據發酵液的總糖濃度和總糖濃度控制指標添加補料培養基； 所述總糖濃度控制指標為發酵培養0-40小時控制總糖質量百分濃度不低于4. 0%,發酵培養40-80小時控制總糖質量百分濃度低于4. 0%但高于2. 5%，發酵培養80小時后控制總糖質量百分濃度不高于2. 5% ； 所述發酵培養基按質量百分濃度計由以下組分組成淀粉酶O. 006%、硫酸銨O. 88%、消泡劑O. 02%、碳酸鈣O. 6%、氯化鈣O. 6%、玉米淀粉6. 05%、玉米漿I. 4%、硫酸鎂O. 16%、花生餅粉I. 7%、磷酸二氫鉀O. 03%、氯化鈉O. 22%、黃豆餅粉1%、植物油O. 2%、酵母粉O. 88%、余量為水； 所述補料培養基按質量百分濃度計由以下組分組成淀粉酶O. 03%、硫酸銨O. 25%、消泡本文檔來自技高網...

【技術保護點】
金霉素預混劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：a．種子培養：將金色鏈霉菌（Streptomyces？aureofaciens）斜面孢子懸浮液接種入種子罐，用種子培養基在溫度30？33℃、通氣量1:1.5？2.0？v/v/min、罐壓0.03？0.05？MPa、攪拌速度150？230？rpm/min的條件下培養20？26小時；所述種子培養基按質量百分濃度計由以下組分組成：淀粉酶0？0.05%、硫酸銨0.2？0.6%、碳酸鈣0.2？0.6%、氯化鈣0？0.3%、玉米蛋白0？1%、玉米淀粉3？5%、玉米漿0？0.8%、葡萄糖0？0.6%、硫酸鎂0.02？0.04%、花生餅粉0？4%、磷酸二氫鉀0.01？0.06%、氯化鈉0？0.3%、黃豆餅粉0？4%、植物油或豆油0？0.6%、酵母粉0？2%、余量為水；b．發酵培養：將步驟a制得的種子培養液接入發酵罐，用發酵培養基在溫度28？33℃、通氣量1:0.8？1.0？v/v/min、罐壓0.02？0.05？MPa、攪拌速度120？180？rpm/min的條件下發酵培養80？160小時，在發酵培養過程中通過添加氨水確保發酵液pH在5.6？6.2之間，并根據發酵液的總糖濃度和總糖濃度控制指標添加補料培養基；所述總糖濃度控制指標為：發酵培養0？40小時控制總糖質量百分濃度不低于4.0%，發酵培養40？80小時控制總糖質量百分濃度低于4.0%但高于2.5%，發酵培養80小時后控制總糖質量百分濃度不高于2.5%；所述發酵培養基按質量百分濃度計由以下組分組成：淀粉酶0.002？0.02%、硫酸銨0.5？1%、消泡劑0？0.06%、碳酸鈣0.4？0.7%、氯化鈣0？1%、玉米蛋白0？1%、玉米淀粉0？8%、玉米漿0？2%、葡萄糖0？1%、硫酸鎂0.001？0.3%、花生餅粉0？4%、磷酸二氫鉀0.01？0.03%、氯化鈉0.1？0.4%、黃豆餅粉0？5%、植物油或豆油0？0.3%、酵母粉0？2%、余量為水；所述補料培養基按質量百分濃度計由以下組分組成：淀粉酶0？0.08%、硫酸銨0？0.7%、消泡劑0.02？0.08%、碳酸鈣0.2？0.6%、氯化鈣0？1.0%、玉米蛋白0？1.0%、玉米淀粉0？50%、玉米漿0？2.6%、葡萄糖0？0.6%、硫酸鎂0？0.03%、花生餅粉0？1%、磷酸二氫鉀0？0.02%、氯化鈉0.2？0.5%、黃豆餅粉0？1%、植物油或豆油0？0.6%、酵母粉0？0.5%、余量為水；c．提取：取步驟b制得的發酵液，加入相當于發酵液體積0？12%的碳酸鈣，攪拌20？40分鐘，板框壓濾，壓濾完畢后，將板框濾餅在進風溫度210？260℃、排風溫度90？120℃條件下進行旋轉閃蒸干燥，干燥物料經振動篩篩分，篩上的大顆粒經粉碎機粉碎后重新篩分，最后混合，即得金霉素預混劑。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：謝昌賢，劉運添，鄧維康，郝新樂，王鵬飛，
申請(專利權)人：金河生物科技股份有限公司，
類型：發明
國別省市：