本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種兔竇房結(jié)慢性損傷模型的建立方法，該方法是將兔麻醉后，背位固定于兔臺上，記錄體表心電圖；于胸前區(qū)備皮，沿胸骨右緣第三肋處縱行開胸，逐層分離表皮及肌肉組織，鉗斷右側(cè)第三肋，經(jīng)縱膈打開心包，暴露右心耳；將連接心電圖v1導(dǎo)聯(lián)的電極置于兔的近竇房結(jié)區(qū)并緩慢移動，當(dāng)心電圖顯示出竇房結(jié)區(qū)電圖特征時，即向電極所在區(qū)施加20％的甲醛溶液，待兔心率下降至原心率的50％～70％時，靜脈注射硫酸阿托品2mg，至心率停止回升時，停止施加甲醛；沖洗胸腔，逐層關(guān)胸，飼養(yǎng)備用。本發(fā)明專利技術(shù)還提供一種實施所述方法的竇房結(jié)定位注射滲透電極。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明專利技術(shù)方法造模成功率高，且模型較穩(wěn)定，可行性、重復(fù)性好。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的動物模型領(lǐng)域，具體涉及一種兔竇房結(jié)慢性損傷模型的建立方法。
技術(shù)介紹
病態(tài)竇房結(jié)綜合征(Sick Sinus Syndrome, SSS)是一種臨床常見的難治性心律失常疾病，其發(fā)病機制尚未明確，已有研究表明，竇房結(jié)細胞損傷導(dǎo)致起搏及傳導(dǎo)功能障礙是其直接原因。建立穩(wěn)定、可重復(fù)的竇房結(jié)慢性損傷(Chronic Sinus Node Dysfunction,CSND)模型是對SSS進行實驗研究的前提。CSND模型成功的關(guān)鍵是在盡可能減少動物竇房結(jié)周圍組織及其他組織器官損傷·的前提下，造成竇房結(jié)慢性損傷，使心臟電生理各項指標(biāo)在造模后一段時間內(nèi)趨于穩(wěn)定，符合臨床SSS的特征。目前CSND模型的建立方法主要通過冰凍消融竇房結(jié)區(qū)法、射頻消融竇房結(jié)區(qū)法、結(jié)扎竇房結(jié)血供動脈法、甲醛濕敷竇房結(jié)區(qū)法等造成竇房結(jié)細胞損傷來實現(xiàn)。這些方法存在較難精確定位竇房結(jié)區(qū)、損傷范圍較大、存活率較低的弊端。例如，冰凍消融竇房結(jié)區(qū)法及射頻消融法依賴于大型設(shè)備，操作難度較大，不適宜建立類似兔這樣較小動物的CSND模型；結(jié)扎竇房結(jié)血供動脈法可成功建立竇房結(jié)急性損傷模型，兔竇房結(jié)主要血供來源于右冠脈，但兔竇房結(jié)區(qū)面積較小，暴露右冠脈部位欠佳，使用該法易造成心臟其他組織損傷，對建立CSND模型難度較大；甲醛濕敷法雖然能夠建立CSND模型，但需在體表進行3 5cm切口并鉗斷2根肋骨，損傷較大，此外，甲醛濕敷法難以精確定位竇房結(jié)區(qū)，容易造成心臟其他組織的損傷，并易造成右心耳出血及胸膜破裂導(dǎo)致氣胸，不利于模型動物術(shù)后存活。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供一種兔竇房結(jié)慢性損傷模型的建立方法。本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案是一種兔竇房結(jié)慢性損傷模型的建立方法，包括以下步驟(一 )將兔麻醉后，背位固定于兔臺上，記錄體表心電圖；( 二)胸前區(qū)備皮，沿胸骨右緣第三肋處縱行開胸I. 5-2. 5cm,逐層分離表皮及肌肉組織，鉗斷右側(cè)第三肋，經(jīng)縱膈打開心包，暴露右心耳；(三)將連接心電圖Vl導(dǎo)聯(lián)的電極置于兔心臟的近竇房結(jié)區(qū)表面并緩慢移動，根據(jù)心電圖的特征(即心電圖顯示出竇房結(jié)區(qū)電圖特征)定位竇房結(jié)區(qū)的準(zhǔn)確位置，向該位置施加20%的甲醛溶液，待兔心率下降至原心率的50% 70%時，停止施加甲醛溶液，靜脈注射硫酸阿托品2mg，如兔心率穩(wěn)定于原心率的50% 70%，則可實施步驟(四)；如注射硫酸阿托品后兔心率回升到原心率的70%以上，則需再次施加甲醛溶液，當(dāng)兔心率又下降至原心率的50% 70%時，停止施加甲醛溶液，再次靜脈注射硫酸阿托品2mg，如此交替施加兩種藥物，直至靜脈注射硫酸阿托品后兔心率仍穩(wěn)定于原心率的50% 70% ;(四)沖洗胸腔，逐層關(guān)胸，飼養(yǎng)備用。優(yōu)選地,所述兔為大耳白兔。優(yōu)選地,所述步驟(一)中，所述麻醉采用以3%戍巴比妥鈉按30mg/kg劑量耳緣靜脈麻醉實施。優(yōu)選地，所述步驟(三)中，所述向竇房結(jié)區(qū)施加甲醛溶液的方法是通過注射器向竇房結(jié)區(qū)表面推注甲醛溶液。這樣可以根據(jù)需要隨時啟動或停止施加甲醛溶液，并且便于準(zhǔn)確控制甲醛溶液的用量和推注速度。更優(yōu)選地，所述甲醛溶液通過直徑不超過4_的無菌棉球施加至竇房結(jié)區(qū)表面。這樣的設(shè)計不僅使甲醛溶液對竇房結(jié)區(qū)的浸潤位置更加準(zhǔn)確，而且可以將甲醛溶液鎖住而不致外流，以減少甲醛溶液對周圍組織的損傷。優(yōu)選地，在完成步驟(三)后，應(yīng)待兔心率穩(wěn)定于原心率的50% 70%達2小時后再實施步驟(四)。 為了更好地實施本專利技術(shù)兔竇房結(jié)慢性損傷模型的建立方法，本專利技術(shù)同時還提供一種用于實施步驟(三)的竇房結(jié)定位注射滲透電極裝置。一種竇房結(jié)定位注射滲透電極裝置，所述裝置包括儲液器(I)、注液接口(2)、金屬電極針(3);其中儲液器(I)包括儲液器主體(Ia)和儲液器頸(Ib);儲液器主體(Ia) —端封閉，另一端與儲液器頸(Ib)連通；儲液器頸(Ib) —端與儲液器主體(Ia)連通，另一端開放；注液接口(2)的一端與儲液器主體(Ia)連通，另一端開放，且該開放端可與醫(yī)用注射器實現(xiàn)密閉連接；金屬電極針(3)從內(nèi)部貫穿儲液器主體(Ia)和儲液器頸(Ib)，且其兩端從儲液器(I)中伸出；金屬電極針(3)從儲液器主體(Ia)伸出的一端用于連接心電圖Vl導(dǎo)聯(lián)，金屬電極針(3)從儲液器頸(Ib)伸出的一端用于將儲液器(I)內(nèi)的液體導(dǎo)至竇房結(jié)區(qū)。優(yōu)選地，金屬電極針(3)與所述儲液器頸(Ib)內(nèi)壁之間的空隙使儲液器主體(Ia)中的液體僅憑重力作用不能流出，需在所述注射器的推力作用下沿金屬電極針(3)的下端流出。這樣不僅可以用注射器精確控制施加液體的用量，而且可以控制液體流出的速度。優(yōu)選地，金屬電極針(3)從儲液器頸(Ib)端伸出的一端的末端纏繞無菌棉。這樣可將多余甲醛溶液鎖住而不致外流，減小了對周圍組織的損傷；且電極一直固定于竇房結(jié)區(qū)，確保了竇房結(jié)區(qū)定位的一致性。優(yōu)選地，所述金屬電極針(3)從儲液器頸(Ib)端伸出的一端的末端彎成圓環(huán)(3b)或爪鉤，所述圓環(huán)(3b)或爪鉤的內(nèi)徑不超過4mm。以本專利技術(shù)竇房結(jié)定位注射滲透電極的上述優(yōu)選實施方式實施制備兔竇房結(jié)慢性損傷模型的步驟(三)時，金屬電極針下端的金屬圓環(huán)(3b)纏繞有無菌棉，棉球有效直徑不超過4_，將所述金屬電極針的上端(3a)連接心電圖vl導(dǎo)聯(lián)，然后將金屬圓環(huán)(3b)置于近竇房結(jié)區(qū)并緩慢移動，當(dāng)心電圖顯示出竇房結(jié)區(qū)電圖特征時，停止移動金屬圓環(huán)(3b)并固定位置，使用注射器(例如規(guī)格為Iml的注射器)與注液接口(2)密閉連接并緩慢向儲液器主體(Ia)中注入20%的甲醛溶液，在注射壓力的作用下，甲醛溶液進入儲液器頸(lb)，并沿金屬電極針(3)到達金屬圓環(huán)(3b)上的無菌棉球，從而在竇房結(jié)區(qū)直徑4mm的局部位置內(nèi)發(fā)揮藥效。與現(xiàn)有的各種兔竇房結(jié)慢性損傷模型建立方法相比，本專利技術(shù)的方法具有如下優(yōu)占-^ \\\ ·I.方法簡單，易于操作，不依賴于大型設(shè)備；2.采用注射器進行甲醛溶液的推注，易于控制甲醛溶液的使用量；3.金屬圓環(huán)(3b)上纏繞的直徑不超過4mm的無菌棉球，可將多余甲醛溶液鎖住而不致外流，減小了對周圍組織的損傷；且電極一直固定于竇房結(jié)區(qū)，避免了因直接使用注射器注射藥物時反復(fù)插拔而感染的機會及竇房結(jié)定位的不一致性；4.通 過竇房結(jié)電圖準(zhǔn)確定位竇房結(jié)區(qū)，使甲醛溶液的施加靶位更加準(zhǔn)確、具體，相比于甲醛濕敷法中直接用棉球敷藥，可顯著降低因竇房結(jié)周圍組織及心臟其他組織損傷而造成心臟出血的幾率；5.相比于甲醛濕敷法，由于施藥靶位準(zhǔn)確，因此可將胸部切口的長度由原來的3-5cm減小到2cm左右，需鉗斷的肋骨也由原來的2根減少到I根，從而可有效避免手術(shù)造成的右心耳出血及胸膜破裂導(dǎo)致的氣胸，提高了模型動物的術(shù)后存活率；6.造模成功率高，且模型較穩(wěn)定；7.可行性、重復(fù)性好。附圖說明圖I為兔竇房結(jié)電圖；圖中所示信息包括心率為164次/分、最大值O. 79mV、最小值-O. 99mV、峰峰值I. 78mV ;特征為出現(xiàn)深大負向之P波及相對較小的QRS波群。圖2為竇房結(jié)定位注射滲透電極裝置的縱向剖面圖的簡化示意圖。附圖標(biāo)記列表I儲液器Ia儲液器主體Ib儲液器頸2儲液器上的注液接口3金屬電極針(全針通常用不銹鋼制成)3a金屬電極針的上端3b金屬電極針下端的金屬圓環(huán)具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本專利技術(shù)做進一步本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
一種兔竇房結(jié)慢性損傷模型的建立方法，包括以下步驟：(一)將兔麻醉后，背位固定于兔臺上，記錄體表心電圖；(二)胸前區(qū)備皮，沿胸骨右緣第三肋處縱行開胸1.5？2.5cm，逐層分離表皮及肌肉組織，鉗斷右側(cè)第三肋，經(jīng)縱膈打開心包，暴露右心耳；(三)將連接心電圖v1導(dǎo)聯(lián)的電極置于兔心臟的近竇房結(jié)區(qū)表面并緩慢移動，當(dāng)心電圖顯示出竇房結(jié)區(qū)電圖特征時，向電極所處的竇房結(jié)區(qū)表面局部施加20％的甲醛溶液，待兔心率下降至原心率的50％～70％時，停止施加甲醛溶液，靜脈注射硫酸阿托品2mg，如兔心率穩(wěn)定于原心率的50％～70％，則可實施步驟(四)；如注射硫酸阿托品后兔心率回升到原心率的70％以上，則再次施加甲醛溶液，當(dāng)兔心率又下降至原心率的50％～70％時，停止施加甲醛溶液，再次靜脈注射硫酸阿托品2mg，如此交替施加兩種藥物，直至靜脈注射硫酸阿托品后兔心率仍穩(wěn)定于原心率的50％～70％；(四)沖洗胸腔，逐層關(guān)胸，飼養(yǎng)備用。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種兔竇房結(jié)慢性損傷模型的建立方法，包括以下步驟 (一)將兔麻醉后，背位固定于兔臺上，記錄體表心電圖； (二)胸前區(qū)備皮，沿胸骨右緣第三肋處縱行開胸1.5-2.5cm，逐層分離表皮及肌肉組織，鉗斷右側(cè)第三肋，經(jīng)縱膈打開心包，暴露右心耳； (三)將連接心電圖Vl導(dǎo)聯(lián)的電極置于兔心臟的近竇房結(jié)區(qū)表面并緩慢移動，當(dāng)心電圖顯示出竇房結(jié)區(qū)電圖特征時，向電極所處的竇房結(jié)區(qū)表面局部施加20%的甲醛溶液，待兔心率下降至原心率的50% 70%時，停止施加甲醛溶液，靜脈注射硫酸阿托品2mg，如兔心率穩(wěn)定于原心率的50% 70*%，則可實施步驟(四)；如注射硫Ife阿托品后兔心率回升到原心率的70%以上，則再次施加甲醛溶液，當(dāng)兔心率又下降至原心率的50% 70%時，停止施加甲醛溶液，再次靜脈注射硫酸阿托品2mg，如此交替施加兩種藥物，直至靜脈注射硫Ife阿托品后兔心率仍穩(wěn)定于原心率的50% 70% ； (四)沖洗胸腔，逐層關(guān)胸，飼養(yǎng)備用。2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，所述步驟(一)中，所述麻醉是以3%戊巴比妥鈉按30mg/kg劑量耳緣靜脈注射實施的。3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于，所述步驟(三)中，所述施加甲醛溶液的方法是通過用注射器向電極所處的竇房結(jié)區(qū)表面局部推注甲醛溶液而實現(xiàn)。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述注射器的尖端附有直徑不超過4mm的無菌棉球。...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：劉如秀，
申請(專利權(quán))人：中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國別省市：
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