本發(fā)明專利技術(shù)公開一種持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置，包括孵育杯、設(shè)置在孵育杯中的支架以及通氣裝置，支架上設(shè)有呈輻射狀設(shè)置的多個安放架，所述安放架上安放有組織杯，所述通氣裝置設(shè)有進氣管以及與進氣管導(dǎo)通的多個圍繞進氣管呈輻射狀設(shè)置的出氣管，多個出氣管與多個安放架一一對應(yīng)地設(shè)置且出氣管位于安放架下方，出氣管上與安放架對應(yīng)的位置處設(shè)有若干出氣孔；所述孵育杯的外側(cè)壁上設(shè)有與孵育杯內(nèi)部空腔的下部導(dǎo)通的液體進液循環(huán)機構(gòu)，所述液體進液循環(huán)機構(gòu)設(shè)有與外界導(dǎo)通的進液口。本發(fā)明專利技術(shù)的持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置能夠持續(xù)地通氧，提高氧濃度，避免細胞受損。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及醫(yī)學分析
，特別涉及一種持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置。
技術(shù)介紹
微觀生物電生理學技術(shù)是對接近生理狀態(tài)的細胞采用膜片鉗、共聚焦顯微鏡等技術(shù)觀察各種離子電流、電壓的變化。膜片鉗即采用微電極鉗制細胞電壓或電流，進行靜息電位、動作電位、離子通道、神經(jīng)電傳導(dǎo)、化學遞質(zhì)傳導(dǎo)等研究。共聚焦顯微鏡則可用于對活細胞內(nèi)的鈣、鈉、氯、氫等特定成分進行動態(tài)監(jiān)測，制作這些成分的動態(tài)變化曲線。研究的對象包括所有可興奮性細胞，如大腦、脊髓、周圍神經(jīng)、心肌、生殖細胞等。所使用的細胞可來自動物的組織塊、急性分離的原代細胞或者穩(wěn)定培養(yǎng)傳代的細胞株。為了更好地模擬在體的生理狀態(tài)，提高實驗穩(wěn)定性，避免細胞變性、凋亡等因素影響實驗結(jié)果，通常需要在持續(xù)通氧的緩沖液中培養(yǎng)上述組織塊或細胞，延長組織塊及細胞活性。相對于其他體細胞，神經(jīng)細胞缺血、缺氧6分鐘以上即進入不可逆轉(zhuǎn)的凋亡程序，更需要提供穩(wěn)定的培養(yǎng)條件和環(huán)境。·尤其是成年動物的腦片、脊髓片及急性分離的神經(jīng)元，耐受缺氧的能力更低，在離體處理的過程中實驗人員稍有疏忽即導(dǎo)致所有神經(jīng)元死亡，無法順利進行研究。而且，器械、水流、氣泡對組織塊或原代細胞的碰撞均可能對細胞造成損害，使其無法達到穩(wěn)定的生理水平。因此，有必要選用可持續(xù)通氧的孵育槽進行組織塊及細胞的培養(yǎng)。目前試驗時常用的孵育槽有三種。第一種是最常用的，即直接使用50ml的小燒杯作為孵育槽，盛滿模仿組織液的緩沖溶液，如人工腦脊液，持續(xù)通入氧混合氣。第二種為Gibb腦片孵育槽，由英國倫敦大學Alasadair J Gibb博士設(shè)計,其結(jié)構(gòu)為把35mm Petri培養(yǎng)皿及其蓋子去掉底部，把紗網(wǎng)卡在余下的兩個圓環(huán)之間，用注射器外殼去掉頭尾兩端余下的塑料管，用塑料管把卡著紗網(wǎng)的圓環(huán)卡在IOOml燒杯的中部。在塑料管中插入2-3_內(nèi)徑的小管，杯內(nèi)盛滿緩沖的孵育液后，經(jīng)小管持續(xù)通入氧混合氣。該孵育槽的優(yōu)點是氧混合氣的氣泡在塑料管內(nèi)由下而上推動緩沖液流動，在管外由上而下緩慢流動，腦片被流動的液體貼附在紗網(wǎng)上，不容易飄起。第三種孵育槽由美國耶魯大學的James R Moyer博士設(shè)計把24孔培養(yǎng)皿的底部去除，打磨周邊，避免銳利的邊緣損傷組織；每培養(yǎng)孔的四壁均打孔；以利于培養(yǎng)液循環(huán)流動；整個24孔板對半切開，置入培養(yǎng)槽，底部使用尼龍絲襪承托，持續(xù)通氧。現(xiàn)有技術(shù)的孵育槽存在以下不足之處I、由于氧氣的溶解率低，持續(xù)通入的氧混合氣的氣泡多直接上升后離開水面，難以維持整個體系的溶液呈有效氧飽和狀態(tài)，較少向下擴散至組織片或細胞，實驗證明急性分離的成年大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元在以上孵育槽中難以長時間維持正常生理狀態(tài)；2、第一、第二種孵育槽的小燒杯或單個圓環(huán)卡內(nèi)置入的多個組織片容易聚集，在液體流動、容器被搬動過程中易于因移位而無法區(qū)分；3、第三種孵育槽，液體由上向下流動，使組織片承受向下的重力和流體壓力以及向上的浮力和培養(yǎng)皿承托，所受壓力較大，易于導(dǎo)致細胞受損。由此可見，如何提供一種孵育裝置，能夠持續(xù)通氧，提高氧濃度，同時能夠避免細胞受損，這是本領(lǐng)域目前需要解決的技術(shù)問題。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于，提供一種持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置，能夠持續(xù)地通氧，提高氧濃度，避免細胞受損。為解決以上技術(shù)問題，本專利技術(shù)的技術(shù)方案是一種持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置，包括孵育杯、設(shè)置在孵育杯中的支架以及通氣裝置，支架上設(shè)有呈輻射狀設(shè)置的多個安放架，所述安放架上安放有組織杯，所述通氣裝置設(shè)有進氣管以及與進氣管導(dǎo)通的多個圍繞進氣管呈輻射狀設(shè)置的出氣管，多個出氣管與多個安放架一一對應(yīng)地設(shè)置且出氣管位于安放架下方，出氣管上與安放架對應(yīng)的位置處設(shè)有若干出氣孔；所述孵育杯的外側(cè)壁上設(shè)有與孵育杯內(nèi)部空腔的下部導(dǎo)通的液體進液循 環(huán)機構(gòu)，所述液體進液循環(huán)機構(gòu)設(shè)有與外界導(dǎo)通的進液口。優(yōu)選地，所述支架包括中心柄以及圍繞中心柄呈輻射狀設(shè)置的多個連接柄，多個安放架分別設(shè)置于不同的連接柄的端部。優(yōu)選地，所述中心柄設(shè)有一通孔，所述進氣管穿過通孔。優(yōu)選地，連接柄包括長連接柄以及短連接柄，長連接柄與短連接柄交替設(shè)置。優(yōu)選地，位于長連接柄上的安放架其靠近孵育杯內(nèi)壁的一側(cè)設(shè)有連接凸起，所述孵育杯的內(nèi)壁上相應(yīng)地設(shè)有與之配合的連接卡位。優(yōu)選地，所述孵育杯的內(nèi)壁設(shè)有用于固定進氣管的固定件。優(yōu)選地，所述孵育杯的上部開口處設(shè)有一杯蓋，所述杯蓋上設(shè)有通氣孔隙。優(yōu)選地，所述安放架為環(huán)形架。優(yōu)選地，所述液體進液循環(huán)機構(gòu)為設(shè)置在孵育杯外側(cè)壁上的中空杯耳，所述中空杯耳包括中空的垂直臂、中空的上斜臂、中空的下斜臂，所述垂直臂的上端設(shè)有開口，作為進液端，所述上斜臂一端與孵育杯的外側(cè)的上部連接并與孵育杯內(nèi)部空腔導(dǎo)通，另一端向下傾斜與垂直臂的外壁連接并與垂直臂內(nèi)部空腔導(dǎo)通，所述下斜臂一端與孵育杯的外側(cè)的下部連接并與孵育杯內(nèi)部空腔導(dǎo)通，另一端向上傾斜與垂直臂的外壁連接并與垂直臂內(nèi)部空腔導(dǎo)通。優(yōu)選地，所述組織杯的杯底為篩網(wǎng)。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置，由于包括孵育杯、設(shè)置在孵育杯中的支架以及通氣裝置，支架上設(shè)有呈輻射狀設(shè)置的多個安放架，所述安放架上安放有組織杯，這種分開不同的組織杯孵育組織片或細胞的方式，能夠避免多個組織片聚集或在液體流動、容器被搬動的過程中移位；由于通氣裝置設(shè)有進氣管以及與進氣管導(dǎo)通的多個圍繞進氣管呈輻射狀設(shè)置的出氣管，多個出氣管與多個安放架一一對應(yīng)地設(shè)置且出氣管位于安放架下方，出氣管上與安放架對應(yīng)的位置處設(shè)有若干出氣孔，這種結(jié)構(gòu)的通氣裝置能有效地提供富氧的環(huán)境，使整個體系的溶液呈有效氧飽和狀態(tài)，由出氣管散出的氧氣充分向上擴散至對應(yīng)的安放架上的組織杯中的組織片或細胞，以長時間維持其正常生理狀態(tài)；由于孵育杯的外側(cè)壁上設(shè)有與孵育杯內(nèi)部空腔的下部導(dǎo)通的液體進液循環(huán)機構(gòu)，所述液體進液循環(huán)機構(gòu)設(shè)有與外界導(dǎo)通的進液口，這使得孵育杯液流由下往上，組織片和細胞只承受自身向下的重力，無向下的流體壓力，此外還有向上的浮力和培養(yǎng)皿承托，減少組織片和細胞受損，同時能夠維持緩慢液流循環(huán)。附圖說明圖I是本專利技術(shù)持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置的結(jié)構(gòu)示意圖(不包含組織杯)；圖2為圖I中支架的俯視圖；圖3為圖I中通氣裝置的示意圖；圖4為圖3中通氣裝置的A向剖視圖；圖5為組織杯的結(jié)構(gòu)示意圖。 具體實施例方式以下結(jié)合附圖及具體實施例，對本專利技術(shù)的持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置進行詳細說明。參見圖f圖5，本實施例中的持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置包括孵育杯I、設(shè)置在孵育杯I中的支架2以及通氣裝置3、設(shè)置在孵育杯側(cè)壁上的、作為液體進液循環(huán)機構(gòu)的中空杯耳4。孵育杯I呈圓柱體形，孵育杯內(nèi)壁中上部的位置處沿內(nèi)壁的周向設(shè)有6個卡位(圖中未示出)，用于安放組織杯的支架2。孵育杯內(nèi)壁上還設(shè)有兩個固定件，該固定件為半弧形凸起(圖中未示出)，用于固定通氣裝置的進氣管，兩個半弧形凸起位于孵育杯內(nèi)壁上不同的高度處。孵育杯內(nèi)壁上靠近上部開口的位置處還設(shè)有凹槽(圖中未示出)，用于容納杯蓋la。孵育杯外壁標記為每隔200ml設(shè)一橫行刻度，其中IOOOml的刻度較長,卡位對應(yīng)的外壁分別標記第1、2、3、4、5、6號，以便區(qū)分組織塊的編碼。本實施例中，孵育杯的容積為2000ml，高度15cm，內(nèi)徑分別是10cm，壁厚2mm。6個卡位位于孵育杯內(nèi)壁上IOcm高度處。兩個半本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
一種持續(xù)通氧的細胞及組織孵育裝置，其特征在于，包括孵育杯、設(shè)置在孵育杯中的支架以及通氣裝置，支架上設(shè)有呈輻射狀設(shè)置的多個安放架，所述安放架上安放有組織杯，所述通氣裝置設(shè)有進氣管以及與進氣管導(dǎo)通的多個圍繞進氣管呈輻射狀設(shè)置的出氣管，多個出氣管與多個安放架一一對應(yīng)地設(shè)置且出氣管位于安放架下方，出氣管上與安放架對應(yīng)的位置處設(shè)有若干出氣孔；所述孵育杯的外側(cè)壁上設(shè)有與孵育杯內(nèi)部空腔的下部導(dǎo)通的液體進液循環(huán)機構(gòu)，所述液體進液循環(huán)機構(gòu)設(shè)有與外界導(dǎo)通的進液口。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陳子怡，羅彬，周列民，戴啟麟，陳樹達，蔡曉冬，方子妍，陳義書，
申請(專利權(quán))人：陳子怡，
類型：發(fā)明
國別省市：
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