一種甜瓜白粉病菌的保存方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開一種甜瓜白粉病菌的保存方法。首先將感病的甜瓜或黃瓜品種的種子播種，待植株5片真葉長(zhǎng)出后備用。在超凈工作臺(tái)上，剪取帶1片展開真葉的幼苗莖尖，莖尖滅菌后用無菌水沖洗3次。用滅菌鑷子將莖尖扦插在盛有苯并咪唑-甘露醇瓊脂培養(yǎng)基的500毫升三角瓶?jī)?nèi)，用滅菌的洗耳球?qū)⒓兓囵B(yǎng)的甜瓜白粉病菌吹到莖尖的葉片上。將三角瓶放入光照培養(yǎng)箱，白粉病菌菌落生成后調(diào)整培養(yǎng)條件，可有效保存約200天。本發(fā)明專利技術(shù)提供的甜瓜白粉病菌的保存方法，保存周期長(zhǎng)可達(dá)200天以上，大大提高保存效率，獲得良好的應(yīng)用效果。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及一種生物病原菌的保存方法
，具體的說，本專利技術(shù)涉及

技術(shù)介紹
甜瓜是葫蘆科ifucurbitaceae)甜瓜屬{Cucumis Linn) 一年生蔓性草本植物,在國內(nèi)外廣泛栽培，是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國甜瓜播種面積約為15. 3萬公頃， 年總產(chǎn)量在300萬噸以上，居世界首位(劉君璞等，2000)。目前，各種病蟲害對(duì)甜瓜的生產(chǎn)造成了不同程度的影響，甜瓜白粉病是甜瓜生產(chǎn)中重要的病害之一，我國露地和保護(hù)地甜瓜每年都因甜瓜白粉病造成大量減產(chǎn)，并嚴(yán)重的影響到了產(chǎn)品的品質(zhì)。據(jù)資料報(bào)道，瓜類白粉病主要由瓜單囊殼{S. fuliginea)和二孢白粉菌(萬.cichoracearum)引起,我國以瓜單囊殼危害較為普遍(呂佩珂，1996)。甜瓜白粉病是一種廣泛發(fā)生的世界性病害，在我國各甜瓜產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生。白粉病菌主要侵染甜瓜植株的葉片，在甜瓜植株幼苗期和成株期都可發(fā)病。在適宜的條件下，甜瓜白粉病發(fā)展很快，幾天或一周時(shí)間蔓延到整個(gè)瓜田或溫室，造成葉片發(fā)黃、失去功能、漸漸枯死，嚴(yán)重影響了甜瓜果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)。由于是專性寄生菌，甜瓜白粉病菌無性世代只能在活體上繁殖保存。傳統(tǒng)的保存方法是將白粉病菌接種到感病的甜瓜植株上，將接種后的植株放置在合適的條件下。傳統(tǒng)的保存方法時(shí)間短，現(xiàn)有技術(shù)報(bào)道的采用不同貯藏方法處理新鮮的白粉病菌，用摩擦接種法和噴霧法將該病原接種于葉片上，觀察不同接種方法對(duì)白粉病發(fā)病的影響，結(jié)果顯示用陰干低溫4°C方法貯藏白粉病菌可保持3周左右，現(xiàn)有技術(shù)報(bào)道中最多僅能保存一個(gè)月左右，而且容易造成病菌污染，因此掌握一種合適的甜瓜白粉病菌的保存方法十分重要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中甜瓜白粉病菌保存時(shí)間太短的技術(shù)現(xiàn)狀，本專利技術(shù)的目的旨在于提供一種保存甜瓜白粉病菌的方法，可以使甜瓜白粉病菌的保存時(shí)間更長(zhǎng)、保存效率更聞。本專利技術(shù)的主要技術(shù)方案 采用感病的甜瓜或黃瓜品種的種子播種至5片真葉長(zhǎng)出，在超凈工作臺(tái)上取幼苗莖尖，莖尖帶I片展開的真葉，莖尖用3%雙氧水消毒2分鐘，再用無菌水沖洗3次；用滅菌鑷子將莖尖扦插在盛有苯并咪唑-甘露醇瓊脂培養(yǎng)基的500毫升三角瓶?jī)?nèi)，用滅菌的洗耳球?qū)⒓兓囵B(yǎng)的甜瓜白粉病菌吹到莖尖的葉片上；將三角瓶放入光照培養(yǎng)箱，白粉病菌菌落生成后調(diào)整培養(yǎng)條件，可有效保存約200天。本專利技術(shù)具體提供，具體保存方法步驟如下 (I)感病的甜瓜或黃瓜品種播種至5片真葉長(zhǎng)出，在超凈工作臺(tái)上取幼苗莖尖，莖尖帶I片展開的真葉，莖尖用3%雙氧水消毒2分鐘，再用無菌水沖洗3次；用滅菌鑷子將莖尖扦插在盛有苯并咪唑-甘露醇瓊脂培養(yǎng)基的500毫升三角瓶?jī)?nèi)，用滅菌的洗耳球?qū)⒓兓囵B(yǎng)的甜瓜白粉病菌吹到莖尖的葉片上；將三角瓶放入光照培養(yǎng)箱，白粉病菌菌落生成后調(diào)整培養(yǎng)條件，可有效保存約200天。(2)上述步驟中的苯并咪唑-甘露醇瓊脂培養(yǎng)基每升含有甘露醇10克，苯并咪唑150克，每毫克5000個(gè)單位的Nystatin 50毫克，溶劑為酒精、體積百分比濃度為O. 1%的Botran75ff 2. 5毫升，瓊脂8克。(3)上述步驟(I)中的扦插莖尖培養(yǎng)條件白粉病菌菌落生成前，光周期，12小時(shí)光照/12小時(shí)暗培養(yǎng)；光照強(qiáng)度，2000勒克斯；溫度，12小時(shí)光照時(shí)22°C /12小時(shí)暗培養(yǎng)時(shí)180C ;白粉病菌菌落生成后，光周期，12小時(shí)光照/12小時(shí)暗培養(yǎng)；光照強(qiáng)度，1500勒克斯；溫度，12小時(shí)光照時(shí)20°C /12小時(shí)暗培養(yǎng)時(shí)15°C。 通過實(shí)施本專利技術(shù)具體的
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
，可以達(dá)到以下有益效果 本專利技術(shù)與傳統(tǒng)方法比較，無需每隔一個(gè)月播種感病品種得到幼苗，并將白粉病菌每隔一個(gè)月轉(zhuǎn)接在感病品種幼苗上。本專利技術(shù)具有不易污染、保存時(shí)間長(zhǎng)、保存效率高等優(yōu)點(diǎn)。為甜瓜抗白粉病新品種選育奠定基礎(chǔ)。具體實(shí)施例方式下面，舉實(shí)施例說明本專利技術(shù)，但是，本專利技術(shù)并不限于下述的實(shí)施例。本專利技術(shù)中選用的所有原輔材料和用具、設(shè)備都為本領(lǐng)域熟知選用的，但不限制本專利技術(shù)的實(shí)施，其他本領(lǐng)域熟知的一些試劑和設(shè)備都可適用于本專利技術(shù)以下實(shí)施方式的實(shí)施。實(shí)施例一甜瓜白粉病菌的保存方法 甜瓜白粉病菌的保存方法具體步驟如下 (I)感病的甜瓜或黃瓜品種播種至5片真葉長(zhǎng)出，在超凈工作臺(tái)上取幼苗莖尖，莖尖帶I片展開的真葉，莖尖用3%雙氧水消毒2分鐘，再用無菌水沖洗3次；用滅菌鑷子將莖尖扦插在盛有苯并咪唑-甘露醇瓊脂培養(yǎng)基的500毫升三角瓶?jī)?nèi)，用滅菌的洗耳球?qū)⒓兓囵B(yǎng)的甜瓜白粉病菌吹到莖尖的葉片上；將三角瓶放入光照培養(yǎng)箱，白粉病菌菌落生成后調(diào)整培養(yǎng)條件，可有效保存約200天。(2)上述步驟中的苯并咪唑-甘露醇瓊脂培養(yǎng)基每升含有甘露醇10克，苯并咪唑150克，每毫克5000個(gè)單位的Nystatin 50毫克，溶劑為酒精、體積百分比濃度為O. 1%的Botran75ff 2. 5毫升，瓊脂8克。(3)上述步驟(I)中的扦插莖尖培養(yǎng)條件白粉病菌菌落生成前，光周期，12小時(shí)光照/12小時(shí)暗培養(yǎng)；光照強(qiáng)度，2000勒克斯；溫度，12小時(shí)光照時(shí)22°C /12小時(shí)暗培養(yǎng)時(shí)180C ;白粉病菌菌落生成后，光周期，12小時(shí)光照/12小時(shí)暗培養(yǎng)；光照強(qiáng)度，1500勒克斯；溫度，12小時(shí)光照時(shí)20°C /12小時(shí)暗培養(yǎng)時(shí)15°C。上述提供的技術(shù)方案與現(xiàn)有技術(shù)提供的方法比較，無需每隔一個(gè)月播種感病品種得到幼苗，并將白粉病菌每隔一個(gè)月轉(zhuǎn)接在感病品種幼苗上，本專利技術(shù)提供的技術(shù)方案具有不易污染、保存時(shí)間長(zhǎng)、保存效率聞等優(yōu)點(diǎn)。權(quán)利要求1.，其特征在于，具體保存方法步驟如下 (1)感病的甜瓜或黃瓜品種播種至5片真葉長(zhǎng)出，在超凈工作臺(tái)上取幼苗莖尖，莖尖帶I片展開的真葉，莖尖用3%雙氧水消毒2分鐘，再用無菌水沖洗3次；用滅菌鑷子將莖尖扦插在盛有苯并咪唑_甘露醇瓊脂培養(yǎng)基的500毫升三角瓶?jī)?nèi)，用滅菌的洗耳球?qū)⒓兓囵B(yǎng)的甜瓜白粉病菌吹到莖尖的葉片上；將三角瓶放入光照培養(yǎng)箱，白粉病菌菌落生成后調(diào)整培養(yǎng)條件，可有效保存約200天； (2)上述步驟中的苯并咪唑-甘露醇瓊脂培養(yǎng)基每升含有甘露醇10克，苯并咪唑150克，每毫克5，000個(gè)單位的Nystatin 50毫克，溶劑為酒精、體積百分比濃度為0. 1%的Botran75ff 2. 5毫升，瓊脂8克； (3)上述步驟(I)中的扦插莖尖培養(yǎng)條件白粉病菌菌落生成前，光周期，12小時(shí)光照/12小時(shí)暗培養(yǎng)；光照強(qiáng)度，2000勒克斯；溫度，12小時(shí)光照時(shí)22°C /12小時(shí)暗培養(yǎng)時(shí)18°C ；白粉病菌菌落生成后，光周期，12小時(shí)光照/12小時(shí)暗培養(yǎng)；光照強(qiáng)度，1500勒克斯；溫度，12小時(shí)光照時(shí)20°C /12小時(shí)暗培養(yǎng)時(shí)15°C。全文摘要本專利技術(shù)公開。首先將感病的甜瓜或黃瓜品種的種子播種，待植株5片真葉長(zhǎng)出后備用。在超凈工作臺(tái)上，剪取帶1片展開真葉的幼苗莖尖，莖尖滅菌后用無菌水沖洗3次。用滅菌鑷子將莖尖扦插在盛有苯并咪唑-甘露醇瓊脂培養(yǎng)基的500毫升三角瓶?jī)?nèi)，用滅菌的洗耳球?qū)⒓兓囵B(yǎng)的甜瓜白粉病菌吹到莖尖的葉片上。將三角瓶放入光照培養(yǎng)箱，白粉病菌菌落生成后調(diào)整培養(yǎng)條件，可有效保存約200天。本專利技術(shù)提供的甜瓜白粉病菌的保存方法，保存周期長(zhǎng)可達(dá)200天以上，大大提高保存效率，獲得良好的應(yīng)用效果。文檔編號(hào)A01H4/00GK102972302SQ20121057804公開日2013本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種甜瓜白粉病菌的保存方法，其特征在于，具體保存方法步驟如下：（1）感病的甜瓜或黃瓜品種播種至5片真葉長(zhǎng)出，在超凈工作臺(tái)上取幼苗莖尖，莖尖帶1片展開的真葉，莖尖用3%雙氧水消毒2分鐘，再用無菌水沖洗3次；用滅菌鑷子將莖尖扦插在盛有苯并咪唑?甘露醇瓊脂培養(yǎng)基的500毫升三角瓶?jī)?nèi)，用滅菌的洗耳球?qū)⒓兓囵B(yǎng)的甜瓜白粉病菌吹到莖尖的葉片上；將三角瓶放入光照培養(yǎng)箱，白粉病菌菌落生成后調(diào)整培養(yǎng)條件，可有效保存約200天；（2）上述步驟中的苯并咪唑?甘露醇瓊脂培養(yǎng)基每升含有：甘露醇10克，苯并咪唑150克，每毫克5，000個(gè)單位的Nystatin?50?毫克，溶劑為酒精、體積百分比濃度為0.1%的Botran75W?2.5毫升，瓊脂8克；（3）上述步驟（1）中的扦插莖尖培養(yǎng)條件：白粉病菌菌落生成前，光周期，12小時(shí)光照/12小時(shí)暗培養(yǎng)；光照強(qiáng)度，2000勒克斯；溫度，12小時(shí)光照時(shí)22℃/12小時(shí)暗培養(yǎng)時(shí)18℃；白粉病菌菌落生成后，光周期，12小時(shí)光照/12小時(shí)暗培養(yǎng)；光照強(qiáng)度，1500勒克斯；溫度，12小時(shí)光照時(shí)20℃/12小時(shí)暗培養(yǎng)時(shí)15℃。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張永兵，張學(xué)軍，伊鴻平，季娟，李寐華，郭麗霞，吳明珠，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈密瓜研究中心，
類型：發(fā)明
國別省市：