【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及到DNA的一種提取方法,尤其涉及到一種水稻葉片和谷粒等植物品種的DNA提取的方法。
技術(shù)介紹
SSR標記具有快速、準確,信息含量高、呈共顯性遺傳、易于分析和重復(fù)可靠等特點。因此,自1989年該技術(shù)產(chǎn)生以來,己被廣泛應(yīng)用于水稻基因定位和QTL分析,水稻品種 DNA指紋圖譜構(gòu)建、群體遺傳多樣性分析、分子標記輔助育種、雜交組合真實性和純度鑒定、 轉(zhuǎn)基因品種檢測等方面。DNA提取是PCR分析的前提。目前以水稻葉片或種子為研究材料進行DNA提取的過程主要是采用2ml離心管,在每個單管中進行研磨、離心、轉(zhuǎn)管、單槍加樣等。提取步驟多,時間長,且每次轉(zhuǎn)管都需要寫編號,不適合DNA樣品的大量快速制備。
技術(shù)實現(xiàn)思路
為了解決現(xiàn)有技術(shù)不適合DNA樣品的大量快速制備的缺陷,本專利技術(shù)提供一種快速、簡便高通量提取水稻D NA的方法。為了實現(xiàn)上述的技術(shù)目的,本專利技術(shù)的技術(shù)方案是提出一種提取水稻DNA的方法。在本專利技術(shù)中,涉及到的植物材料優(yōu)選為水稻的幼苗或種子或成株的葉片。本專利技術(shù)采用的步驟包括a)、采用96孔深孔板對植物材料進行取樣;b)、在深孔板的每個孔中加入I粒小鋼珠,放入液氮中凍2-3分鐘;C)、安裝96深孔板適配器;d)、采用混合研磨儀對在96深孔板內(nèi)的植物材料進行研磨、粉碎;e)、利用8槍頭的排槍對深孔板內(nèi)的植物材料進行萃取;f)、萃取后的DNA進行室溫干燥;g)、干燥后的DNA加入滅菌雙蒸水溶解;h)、利用RM520進行PCR,并在瓊脂糖電泳上進行檢測。本專利技術(shù)的一種優(yōu)選方案是,所述萃取使用的萃取液的順序依次為I單位的I.5XCTAB (十六烷基三甲 ...
【技術(shù)保護點】
一種提取水稻DNA的方法,其步驟包括:a)、采用96孔深孔板對植物材料進行取樣;b)、在深孔板的每個孔中加入1粒小鋼珠,放入液氮中凍2?3分鐘;c)、安裝96深孔板適配器;d)、采用混合研磨儀對在96深孔板內(nèi)的植物材料進行研磨、粉碎;e)、利用8槍頭的排槍對深孔板內(nèi)的植物材料進行萃取;f)、萃取后的DNA進行室溫干燥;g)、干燥后的DNA加入滅菌雙蒸水溶解;h)、利用RM520進行PCR,并在瓊脂糖電泳上進行檢測。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種提取水稻DNA的方法,其步驟包括 a)、采用96孔深孔板對植物材料進行取樣; b)、在深孔板的每個孔中加入I粒小鋼珠,放入液氮中凍2-3分鐘; C)、安裝96深孔板適配器; d)、采用混合研磨儀對在96深孔板內(nèi)的植物材料進行研磨、粉碎; e)、利用8槍頭的排槍對深孔板內(nèi)的植物材料進行萃取; f)、萃取后的DNA進行室溫干燥; g)、干燥后的DNA加入滅菌雙蒸水溶解; h)、利用RM520進行PCR,并在瓊脂糖電泳上進行檢測。...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員:劉國蘭,劉毅,王飛名,王加紅,張安寧,余新橋,羅利軍,
申請(專利權(quán))人:上海市農(nóng)業(yè)生物基因中心,
類型:發(fā)明
國別省市:
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