一種用于測定多糖的苯酚試劑的制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種用于測定多糖的苯酚試劑的制備方法，屬于多糖測定試劑領(lǐng)域，本發(fā)明專利技術(shù)制備苯酚試劑的方法，包括以下步驟：取苯酚、氫氧化鈉和鋁片，置于反應(yīng)容器中蒸餾，收集180~182℃的餾分，得餾出液；向餾出液中加入亞硫酸溶液，充分混勻后，得到苯酚試劑母液；量取苯酚試劑母液用蒸餾水稀釋至苯酚的質(zhì)量濃度為6%得到用于多糖測定的苯酚試劑。本發(fā)明專利技術(shù)在苯酚溶液中加入亞硫酸作為苯酚的保護劑，能夠有效防止苯酚氧化，從而保證了測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時延長了苯酚試劑的保存時間。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及一種測定多糖試劑的制備方法，具體涉及ー種用于多糖測定的苯酚試劑的制備方法。
技術(shù)介紹
多糖是存在于自然界的醛糖和(或)酮糖通過糖苷鍵連接在一起的聚合物(一般10個以上)。它一般都是天然高分子化合物，是一切有生命的有機體必不可少的成分。多糖包括活性多糖和膳食纖維兩大類。活性多糖專指具有某種特殊生物活性的多糖化合物，如真菌多糖、植物多糖和殼聚糖等。這些多糖具有復(fù)雜的、多方面的生理活性和功能，如免疫調(diào)節(jié)功能、抗腫瘤作用、延緩衰老作用、降血脂、抗血栓作用等功能，因而越來越引起人們的關(guān)注。 多糖的測定方法目前還沒有國家規(guī)定的方法，文獻報道的多糖含量常規(guī)檢測的方法有很多，ー類是利用多糖的還原性，測定還原性多糖的方法有3，5- ニ硝基水楊酸鹽比色法和Somogy1-Nelson法。另ー類測定方法，也是現(xiàn)在普遍使用的方法，是利用多糖在強酸性條件下脫水生成糠醛或其衍生物，然后再與酚類或胺類化合物縮合，生成有特殊顔色的物質(zhì)的這一性質(zhì)進行測定，這類方法有地衣酚-硫酸法、苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法。其中苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法是用得較多的方法，但由于蒽酮有劇毒，因此多糖的測定主要還是苯酚硫酸法。其原理為濃硫酸水合放出大量熱量，在酸性條件下多糖水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛衍生物，然后與苯酚生成橙黃色化合物，此衍生物在波長490nm處出現(xiàn)最大吸收峰。并且在一定濃度范圍內(nèi)，濃度和光密度之間的關(guān)系遵守Beer’ s Law，因此可以用標(biāo)準(zhǔn)糖制作標(biāo)準(zhǔn)曲線后，再通過多糖的顯色反應(yīng)測定吸光度，然后根據(jù)其在曲線上的位置推算出多糖的濃度從而推算其含量。此法操作簡單，具有需溫度低、快速、穩(wěn)定、靈敏度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點，對每種糖僅需制作一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。但苯酚易氧化，見光或暴露在空氣中呈粉紅色，如果配制的苯酚試劑被氧化，將直接影響多糖測定的準(zhǔn)確性。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供一種用于測定多糖的苯酚試劑的制備方法，能夠有效防止苯酚氧化，從而保證了測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時延長了苯酚試劑的保存時間。為達到上述目的，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案包括以下步驟I)按質(zhì)量比為1000:0. 5:1，稱取苯酚、氫氧化鈉和鋁片，置于反應(yīng)容器中蒸餾，收集18(Tl82°C的餾分，得餾出液；2)向餾出液中加入質(zhì)量濃度為6%的亞硫酸溶液，所述餾出液與亞硫酸溶液的體積比為10:1，充分混勻后，得到苯酚試劑母液；3)量取苯酚試劑母液用蒸餾水稀釋至苯酚的質(zhì)量濃度為6%得到用于多糖測定的苯酚試劑。所述步驟I)的鋁片是經(jīng)鹽酸除去表面氧化鋁后的鋁片。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)具有以下有益的技術(shù)效果由于亞硫酸具有還原性，可以用作還原劑。因此往苯酚溶液中加入少量亞硫酸，可以起到保護劑的作用，從而防止苯酚的氧化。本專利技術(shù)在苯酚溶液中加入亞硫酸作為苯酚的保護劑，有效地解決了苯酚易氧化的問題，從而提高了多糖測定的準(zhǔn)確性；若苯酚試劑保存不善或時間過久，會發(fā)生輕微的氧化變成粉紅色，加入少量亞硫酸后，溶液的顔色可消失變成無色，從而延長了苯酚溶液的保存時間，本專利技術(shù)的制備方法操作簡單，易實現(xiàn)。具體實施例方式下面結(jié)合具體的實施例對本專利技術(shù)做進ー步的詳細說明實施例1I)按質(zhì)量比為1000:0. 5:1，稱取苯酚、氫氧化鈉和鋁片，置于反應(yīng)容器中蒸餾，收集18(T182°C的餾分，得餾出液；其中鋁片是經(jīng)鹽酸除去表面氧化鋁后的鋁片；2)向餾出液中加入質(zhì)量濃度為6%的亞硫酸溶液，所述餾出液與亞硫酸溶液的體積比為10:1，充分混勻后，得到苯酚試劑母液；3)量取苯酚試劑母液用蒸餾水稀釋至苯酚的質(zhì)量濃度為6%得到用于多糖測定的苯酚試劑。本專利技術(shù)在苯酚溶液中加入少量亞硫酸作為苯酚的保護劑，能夠有效解決苯酚易氧化的問題，從而提高了多糖測定的準(zhǔn)確性，同時也延長了苯酚溶液的保存時間；在用苯酚-硫酸法測定多糖時，濃硫酸過量，反應(yīng)為放熱反應(yīng)，在這個過程中苯酚溶液中所加入的亞硫酸分解放出的SO2氣體可以從反應(yīng)體系中逸出，所以，在苯酚溶液中加入少量的6%的亞硫酸，對實驗結(jié)果并無影響，用加有亞硫酸的苯酚溶液做標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以保證測量的準(zhǔn)確性。本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
一種用于測定多糖的苯酚試劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1）按質(zhì)量比為1000:0.5:1，稱取苯酚、氫氧化鈉和鋁片，置于反應(yīng)容器中蒸餾，收集180~182℃的餾分，得餾出液；2）向餾出液中加入質(zhì)量濃度為6%的亞硫酸溶液，所述餾出液與亞硫酸溶液的體積比為10:1，充分混勻后，得到苯酚試劑母液；3）量取苯酚試劑母液用蒸餾水稀釋至苯酚的質(zhì)量濃度為6%，得到用于多糖測定的苯酚試劑。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種用于測定多糖的苯酚試劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟1)按質(zhì)量比為1000:0.5:1，稱取苯酚、氫氧化鈉和鋁片，置于反應(yīng)容器中蒸餾，收集 180 182°C的餾分，得餾出液；2)向餾出液中加入質(zhì)量濃度為6%的亞硫酸溶液，所述餾出液與亞硫酸...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：楊輝，閆明明，
申請(專利權(quán))人：陜西科技大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：