本發(fā)明專利技術(shù)涉及溶栓物質(zhì)的提取，具體的說是一種從固態(tài)發(fā)酵納豆中分離溶栓物質(zhì)的方法。將原料納豆用無菌水于在4℃-10℃下浸提5-8小時(shí)，而后過濾收集浸提液，將4℃-10℃的無水乙醇加入到浸提液中靜置沉淀3-5小時(shí)后離心，沉淀即為得到的納豆溶栓物質(zhì)。本發(fā)明專利技術(shù)通過浸提和乙醇沉淀達(dá)到從固態(tài)發(fā)酵納豆中分離溶栓物質(zhì)目的。本發(fā)明專利技術(shù)具有提取活性高、得率高、成本低和環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及溶栓物質(zhì)的提取，具體的說是。
技術(shù)介紹
在現(xiàn)代社會生活中，血栓性疾病是一種常見病，常表現(xiàn)為心肌梗死、缺血性腦梗死、靜脈血栓栓塞。據(jù)世界衛(wèi)生組織公布的數(shù)據(jù)顯示，心腦血管疾病已經(jīng)成為危害人類健康的第一殺手。目前，我國約有1.1億人患有高血壓、動脈硬化等心腦血管疾病，其發(fā)病具有高死亡率、高復(fù)發(fā)率、高致殘率的特點(diǎn)。因此，開發(fā)具有預(yù)防和治療血栓性疾病的功能食品，具有廣闊的市場前景與深遠(yuǎn)的社會意義。納豆是由黃豆經(jīng)納豆菌發(fā)酵而成的一種健康食品，其中所含豐富的納豆激酶，被公認(rèn)為是一種安全的食用血栓預(yù)防劑。它不同于目前使用的大多數(shù)以激活纖維蛋白溶酶為基礎(chǔ)的溶栓藥物，納豆激酶可直接溶解血液中的交聯(lián)形式的纖維蛋白。長期食用納豆對預(yù)防心腦血管疾病具有積極作用。此外，納豆中還富含優(yōu)質(zhì)小分子蛋白質(zhì)(多肽)、超氧化物歧化酶(S0D)、異黃酮等生理活性物質(zhì)及對人體有益的納豆菌，因而被譽(yù)為超級健康食品、“世界第一健康美食”等。特別是每天堅(jiān)持食用100克左右的納豆對人體免疫功能、調(diào)節(jié)血脂、預(yù)防心血管疾病、增加骨密度等都能起到很好的保健作用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案為將原料納豆用無菌水于在40C -10°C下浸提5-8小時(shí)，而后過濾收集浸提液，將4°C -10°C的無水乙醇加入到浸提液中靜置沉淀3-5小時(shí)后離心，沉淀即為得到的納豆溶栓物質(zhì)。所述浸提時(shí)納豆與無菌水的質(zhì)量比為1: 1-3。所述無水乙醇加入到浸提液中至乙醇終濃度體積比為70-80%，靜置沉淀3-5小時(shí)。所述無水乙醇加入到浸提液中靜置沉淀后在4-10°C，以6000-10000轉(zhuǎn)/分鐘，離心8_10min，將所得沉淀凍干，即為納豆溶栓物質(zhì)。本專利技術(shù)所具有的優(yōu)點(diǎn)1.依照本專利技術(shù)的方法提取的溶栓物質(zhì)提取純度高，其溶栓物質(zhì)是固態(tài)發(fā)酵納豆溶栓活性的30倍；2.本專利技術(shù)提取方法成本低所用試劑為可回收乙醇，比傳統(tǒng)鹽析方法節(jié)約能源；3.本專利技術(shù)提取方法中沉淀分離容易，加入冰乙醇后抽提物以膠狀聚合物的形式析出，工業(yè)操作簡單。附圖說明圖1為本專利技術(shù)實(shí)施例提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，其為以尿激酶活力(UI)為橫坐標(biāo)，溶纖圈面積的對數(shù)值為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。圖2為本專利技術(shù)實(shí)施例提供的所得溶栓物質(zhì)活性示意圖。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1納豆為原料(購自沈陽科健生物技術(shù)有限公司)，以無菌水1:1質(zhì)量6°C浸提6小時(shí)，過濾浸提物得浸提液。將4°C的無水乙醇加入到浸提液中至乙醇體積濃度為70%。靜置沉淀3小時(shí)后在4°C，以6000轉(zhuǎn)/分鐘，離心lOmin，將所得沉淀在真空條件下凍干(真空泵條件-50到-70°C，16-24h)，即為納豆溶栓物質(zhì)。實(shí)施例2在納豆中加入無菌水1 :1質(zhì)量6°C浸提8小時(shí)，過濾浸提物得浸提液。將6°C的無水乙醇加入到浸提液中至乙醇體積濃度為80%。靜置沉淀4小時(shí)后在10°C，以10000轉(zhuǎn)/分鐘，離心8min，將所得沉淀在真空條件下凍干(真空泵條件-50到_70°C，16_24h)，即為納豆溶栓物質(zhì)。實(shí)施例3在納豆中加入無菌水2 I質(zhì)量10°C浸提5小時(shí)，過濾浸提物得浸提液。將6°C的無水乙醇加入到浸提液中至乙醇體積濃度為80%。靜置沉淀5小時(shí)后在8°C，以8000轉(zhuǎn)/分鐘，離心9min，將所得沉淀在真空條件下凍干(真空泵條件-50到_70°C，16_24h)，即為納豆溶栓物質(zhì)。實(shí)施例4在納豆中加入無菌水2 I質(zhì)量10°C浸提8小時(shí)，過濾浸提物得浸提液。將4°C的無水乙醇加入到浸提液中至乙醇體積濃度為70%。靜置沉淀5小時(shí)后在9°C，以9000轉(zhuǎn)/分鐘，離心8min，將所得沉淀在真空條件下凍干(真空泵條件-50到_70°C，16_24h)，即為納豆溶栓物質(zhì)。實(shí)施例5在納豆中加入無菌水3 I質(zhì)量4°C浸提5小時(shí)，過濾浸提物得浸提液。將10°C的無水乙醇加入到浸提液中至乙醇體積濃度為80%。靜置沉淀4小時(shí)后在6°C，以7000轉(zhuǎn)/分鐘，離心9min，將所得沉淀在真空條件下凍干(真空泵條件-50到_70°C，16_24h)，即為納豆溶栓物質(zhì)。實(shí)施例6在納豆中加入無菌水3 I質(zhì)量4°C浸提6小時(shí)，過濾浸提物得浸提液。將10°C的無水乙醇加入到浸提液中至乙醇體積濃度為70%。靜置沉淀3小時(shí)后在4°C，以6000轉(zhuǎn)/分鐘，離心9min，將所得沉淀在真空條件下凍干(真空泵條件-50到_70°C，16_24h)，即為納豆溶栓物質(zhì)。測其溶栓活性。本實(shí)施例采用瓊脂糖-纖維蛋白平板法測其溶栓活性大小，在同一纖維蛋白平白內(nèi)，點(diǎn)不同濃度的尿激酶各20 μ L，37°C培養(yǎng)16小時(shí)，測量溶纖圈直徑。以尿激酶活力(UI)為橫坐標(biāo)，溶纖圈面積的對數(shù)值為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(參見圖1)。將上述各實(shí)施例所得納豆溶栓物質(zhì)，點(diǎn)于同一纖維蛋白平板上，37°C培養(yǎng)16小時(shí)，測溶圈大小，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品的活性相對于尿激酶的單位數(shù)，以單位IU/mg表示溶栓活力(參見圖2)。本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種從固態(tài)發(fā)酵納豆中分離溶栓物質(zhì)的方法，其特征在于：將原料納豆用無菌水于在4℃?10℃下浸提5?8小時(shí)，而后過濾收集浸提液，將4℃?10℃的無水乙醇加入到浸提液中靜置沉淀3?5小時(shí)后離心，沉淀即為得到的納豆溶栓物質(zhì)。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種從固態(tài)發(fā)酵納豆中分離溶栓物質(zhì)的方法，其特征在于將原料納豆用無菌水于在4°C -10°C下浸提5-8小吋，而后過濾收集浸提液，將4°C -1O0C的無水こ醇加入到浸提液中靜置沉淀3-5小時(shí)后離心，沉淀即為得到的納豆溶栓物質(zhì)。2.按權(quán)利要求1所述的從固態(tài)發(fā)酵納豆中分離溶栓物質(zhì)的方法，其特征在于所述浸提時(shí)納豆與無菌水的質(zhì)量比為1: 1-3。3....
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：付煊赫，劉曉潔，蘇振成，張惠文，
申請(專利權(quán))人：沈陽科健生物技術(shù)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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