本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種連續(xù)酶解與二級膜過濾提純制備大米蛋白活性多肽的方法。該方法是以堿性蛋白酶和大米蛋白為主要原料進(jìn)行酶解反應(yīng)，通過超濾膜、納濾膜、噴霧干燥，得到大米蛋白活性多肽。本發(fā)明專利技術(shù)與現(xiàn)有技術(shù)比較的益效：本發(fā)明專利技術(shù)可避免過度酶解導(dǎo)致產(chǎn)品呈苦味的現(xiàn)象，蛋白酶經(jīng)固定化后，可循環(huán)利用，提高酶的利用率，并可實(shí)現(xiàn)連續(xù)化生產(chǎn)。該方法制備的活性多肽純度高，安全無害，原料來源廣泛，制造成本低，在食品、化妝保健、醫(yī)藥領(lǐng)域具有很高推廣價(jià)值。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于谷物副產(chǎn)物深加工
，具體是。
技術(shù)介紹
人體新陳代謝產(chǎn)生的自由基對機(jī)體組織細(xì)胞具有很強(qiáng)的殺傷作用，可引起細(xì)胞死亡和組織損傷，如動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥、肺損傷和衰老等。抗氧化肽類作為一種非酶促類抗氧化劑，因其生物活性和安全性高而成為近年來研究的熱點(diǎn)。我國的稻谷產(chǎn)量居世界首位，稻谷深加工環(huán)節(jié)中產(chǎn)生的大米蛋白具有較高的生物學(xué)價(jià)值。大米蛋白是一種優(yōu)質(zhì)的植物蛋白，具有氨基酸組成平衡合理，口感溫和，低過敏性和降低膽固醇等優(yōu)點(diǎn)；而且大米多肽中含有人體所需定額的各種氨基酸，配比合理，符合WH0/FA0推薦的理想模式。大米活性多肽除了具有一般大米蛋白的營養(yǎng)作用外，在消化吸收和保健功能方面有了進(jìn)一步的提高。從消化過程來看，大米多肽粉中的小肽在人體內(nèi)消化吸收比蛋白質(zhì)、游離氨基酸消化吸收速度要快。通過控制酶解條件，獲得具有生物活性的多肽，能有效清除羥自由基的、修復(fù)受損病變細(xì)胞、激活衰老細(xì)胞、調(diào)節(jié)細(xì)胞生命周期、延緩衰老及修復(fù)細(xì)胞間離子代謝通道，對人體各大系統(tǒng)的綜合調(diào)節(jié)促進(jìn)作用；應(yīng)用于食品、化妝品保健、醫(yī)藥領(lǐng)域有很好市場前景。 但現(xiàn)有大米蛋白活性多肽的制備方法是間歇酶解法，然后進(jìn)行真空濃縮、干燥制備工藝，間歇酶解法存在以下不足蛋白酶利用率低，酶解過度導(dǎo)致產(chǎn)品苦味重，活性多肽的提取率低，能耗較高，顏色深，不能連續(xù)化生產(chǎn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是為了克服上述現(xiàn)有方法的不足，提供。本專利技術(shù)解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下—種連續(xù)酶解與二級膜過濾提純制備大米蛋白活性多肽的方法是以堿性蛋白酶和大米蛋白為主要原料進(jìn)行酶解反應(yīng)，通過超濾膜、納濾膜、噴霧干燥，得到大米蛋白活性多肽，操作步驟如下(I)將堿性蛋白酶溶于質(zhì)量濃度為廣4%的海藻酸鈉溶液中，經(jīng)多孔離心盤的旋轉(zhuǎn)離心，將酶液分散成小液滴并落入質(zhì)量濃度為1. (Γ3. 5%的CaCl2溶液中形成球狀固定化酶，固化反應(yīng)30min，40目濾網(wǎng)過濾回收固定化酶，酶活力為500(Tl5000IU/g，裝入酶解反應(yīng)器中；(2)配置質(zhì)量濃度為4 8%的大米蛋白溶液，用2mol/L的NaOH調(diào)節(jié)pH值至9，加熱到55°C，然后倒入步驟(I)的酶解反應(yīng)器中；(3)酶解反應(yīng)器與截留分子量為200(T7000Da、工作壓力為O. 08MPa的超濾膜系統(tǒng)通過循環(huán)泵連接，反應(yīng)器排出料液經(jīng)循環(huán)泵進(jìn)入超濾膜進(jìn)料口，料液連續(xù)循環(huán)進(jìn)行酶解和膜過濾分離，同時(shí)往酶解反應(yīng)器中補(bǔ)加大米蛋白溶液保持液位恒定，并用2mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)器中的料液pH值為9. O ;收集超濾膜透過液即得大米蛋白活性多肽溶液。(4)上步驟的大米蛋白活性多肽溶液經(jīng)截留分子量為30(T600Da的納濾膜系統(tǒng)，濃縮至原蛋白溶液體積的1ΑΓ1/3，經(jīng)離心噴霧干燥得到粉狀大米蛋白活性多肽；其中離心噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度為180°c，出風(fēng)溫度為80°C，進(jìn)料速度2. (Γ5. Okg/h，進(jìn)風(fēng)量100 150m3/h。本專利技術(shù)與現(xiàn)有技術(shù)比較的益效本專利技術(shù)制備大米蛋白活性多肽的方法可實(shí)現(xiàn)連續(xù)化生產(chǎn)，安全無害，節(jié)能減排，成本低。產(chǎn)品具有抗氧化性、抗疲勞、降低膽固醇等功效；可廣泛用于應(yīng)用于食品加工、化妝保健品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對本專利技術(shù)作進(jìn)一步描述。實(shí)施例1連續(xù)酶解與二級膜過濾提純制備大米蛋白活性多肽的方法，步驟如下(I)將堿性蛋白酶溶于質(zhì)量濃度為4%的海藻酸鈉溶液中，分散成小液滴并落入質(zhì)量濃度為1. 5%的CaCl2溶液中形成球狀固定化酶，固化反應(yīng)30min，40目濾網(wǎng)過濾回收固定化酶，酶活力為15000IU/g，裝入酶解反應(yīng)器中。堿性蛋白酶酶活力測定采用福林一 )方法。 (2)配置質(zhì)量濃度為4%大米蛋白溶液，用2mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為9. 0，加熱恒溫55°C，然后倒入酶解反應(yīng)器中。(3)酶解反應(yīng)器與截留分子量為7000Da、工作壓力為O. 08MPa的超濾膜系統(tǒng)通過循環(huán)泵連接，反應(yīng)器排出料液經(jīng)循環(huán)泵進(jìn)入超濾膜進(jìn)料口，料液連續(xù)循環(huán)進(jìn)行酶解和膜過濾分離，同時(shí)往酶解反應(yīng)器中補(bǔ)加大米蛋白溶液保持液位恒定，并用2mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)器中的料液pH值為9. O。收集超濾膜透過液即得大米蛋白活性多肽溶液。當(dāng)固定化酶活力下降到7000IU/g，更換固定化酶。(4)大米蛋白活性多肽溶液經(jīng)截留分子量為300Da的納濾膜系統(tǒng)，濃縮至原蛋白溶液體積的1/3，經(jīng)離心噴霧干燥得到粉狀大米蛋白活性多肽。其中離心噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為80°C，進(jìn)料速度5. Okg/h，進(jìn)風(fēng)量150m3/h。分子量范圍為30(T7000Da大米蛋白活性多肽的提取率達(dá)到73%。實(shí)施例2連續(xù)酶解與二級膜過濾提純制備大米蛋白活性多肽的方法，步驟如下(I)將堿性蛋白酶溶于質(zhì)量濃度為1. 0%的海藻酸鈉溶液中，分散成小液滴并落入質(zhì)量濃度為1. 0%的CaCl2溶液中形成球狀固定化酶，固化反應(yīng)30min，40目濾網(wǎng)過濾回收固定化酶，酶活力為5000IU/g，裝入酶解反應(yīng)器中。堿性蛋白酶酶活力測定采用福林一酹方法。(2)配置質(zhì)量濃度為8%大米蛋白溶液，用2mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為9. 0，加熱恒溫55°C，然后倒入酶解反應(yīng)器中。(3)酶解反應(yīng)器與截留分子量為2000Da、工作壓力為O. 08MPa的超濾膜系統(tǒng)通過循環(huán)泵連接，反應(yīng)器排出料液經(jīng)循環(huán)泵進(jìn)入超濾膜進(jìn)料口，料液連續(xù)循環(huán)進(jìn)行酶解和膜過濾分離，同時(shí)往酶解反應(yīng)器中補(bǔ)加大米蛋白溶液保持液位恒定，并用2mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)器中的料液pH值為9. O。收集超濾膜透過液即得大米蛋白活性多肽溶液。當(dāng)固定化酶活力下降到3000IU/g，更換固定化酶。(4)大米蛋白活性多肽溶液經(jīng)截留分子量為600Da的納濾膜系統(tǒng)，濃縮至原蛋白溶液體積的1/6，經(jīng)離心噴霧干燥得到粉狀大米蛋白活性多肽。其中離心噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為80°C，進(jìn)料速度2. Okg/h，進(jìn)風(fēng)量100m3/h。分子量范圍為60(T2000Da大米蛋白活性多肽的提取率達(dá)到46%。實(shí)施例3連續(xù)酶解與二 級膜過濾提純制備大米蛋白活性多肽的方法，步驟如下(I)將堿性蛋白酶溶于質(zhì)量濃度為2. 5%的海藻酸鈉溶液中，經(jīng)多孔離心盤的旋轉(zhuǎn)離心，分散成小液滴并落入質(zhì)量濃度為3. 5%的CaCl2溶液中形成球狀固定化酶，固化反應(yīng)30min,40目濾網(wǎng)過濾回收固定化酶，酶活力為9000IU/g，裝入酶解反應(yīng)器中。堿性蛋白酶酶活力測定采用福林一 )方法。(2)配置質(zhì)量濃度為6%大米蛋白溶液，用2mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為9. 0，加熱恒溫55°C，然后倒入酶解反應(yīng)器中。(3)酶解反應(yīng)器與截留分子量為4000Da、工作壓力為O. 08MPa的超濾膜系統(tǒng)通過循環(huán)泵連接，反應(yīng)器排出料液經(jīng)循環(huán)泵進(jìn)入超濾膜進(jìn)料口，料液連續(xù)循環(huán)進(jìn)行酶解和膜過濾分離，同時(shí)往酶解反應(yīng)器中補(bǔ)加大米蛋白溶液保持液位恒定，并用2mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)器中的料液pH值為9. O。收集超濾膜透過液即得大米蛋白活性多肽溶液。當(dāng)固定化酶活力下降到5500IU/g，更換固定化酶。(4)大米蛋白活性多肽溶液經(jīng)截留分子量為400Da的納濾膜系統(tǒng)，濃縮至原蛋白溶液體積的1/5，經(jīng)離心噴霧干燥得到粉狀大米蛋白活性多肽。其中離心噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種連續(xù)酶解與二級膜過濾提純制備大米蛋白活性多肽的方法，其特征在于，以堿性蛋白酶和大米蛋白為主要原料進(jìn)行酶解反應(yīng)，通過超濾膜、納濾膜、噴霧干燥，得到大米蛋白活性多肽，操作步驟如下：(1)將堿性蛋白酶溶于質(zhì)量濃度為1~4%的海藻酸鈉溶液中，經(jīng)多孔離心盤的旋轉(zhuǎn)離心，將酶液分散成小液滴并落入質(zhì)量濃度為1.0~3.5%的CaCl2溶液中形成球狀固定化酶，固化反應(yīng)30min，40目濾網(wǎng)過濾回收固定化酶，酶活力為5000~15000IU/g，裝入酶解反應(yīng)器中；(2)配置質(zhì)量濃度為4~8%的大米蛋白溶液，用2mol/L的NaOH調(diào)節(jié)pH值至9，加熱到55℃，然后倒入步驟（1）的酶解反應(yīng)器中；(3)酶解反應(yīng)器與截留分子量為2000~7000Da、工作壓力為0.08MPa的超濾膜系統(tǒng)通過循環(huán)泵連接，反應(yīng)器排出料液經(jīng)循環(huán)泵進(jìn)入超濾膜進(jìn)料口，料液連續(xù)循環(huán)進(jìn)行酶解和膜過濾分離，同時(shí)往酶解反應(yīng)器中補(bǔ)加大米蛋白溶液保持液位恒定，并用2mol/L?NaOH溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)器中的料液pH值為9.0；收集超濾膜透過液即得大米蛋白活性多肽溶液；(4)上步驟的大米蛋白活性多肽溶液經(jīng)截留分子量為300~600Da的納濾膜系統(tǒng)，濃縮至原蛋白溶液體積的1/6~1/3，經(jīng)離心噴霧干燥得到粉狀大米蛋白活性多肽；其中離心噴霧干燥進(jìn)風(fēng)溫度為180℃，出風(fēng)溫度為80℃，進(jìn)料速度2.0~5.0kg/h，進(jìn)風(fēng)量100~150m3/h。...
【技術(shù)特征摘要】
1.一種連續(xù)酶解與二級膜過濾提純制備大米蛋白活性多肽的方法，其特征在于，以堿性蛋白酶和大米蛋白為主要原料進(jìn)行酶解反應(yīng)，通過超濾膜、納濾膜、噴霧干燥，得到大米蛋白活性多肽，操作步驟如下 (1)將堿性蛋白酶溶于質(zhì)量濃度為f4%的海藻酸鈉溶液中，經(jīng)多孔離心盤的旋轉(zhuǎn)離心，將酶液分散成小液滴并落入質(zhì)量濃度為1. (Γ3. 5%的CaCl2溶液中形成球狀固定化酶，固化反應(yīng)30min，40目濾網(wǎng)過濾回收固定化酶，酶活力為500(Tl5000IU/g，裝入酶解反應(yīng)器中； (2)配置質(zhì)量濃度為4 8%的大米蛋白溶液，用2mol/L的NaOH調(diào)節(jié)pH值至9，加熱到55°C，然后倒入步驟(I)的酶解反應(yīng)器中； (3)酶解...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：夏寧，滕建文，勞泰財(cái)，
申請(專利權(quán))人：廣西大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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