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    一種膽紅素的檢測方法及檢測試劑盒技術

    技術編號:8592786 閱讀:258 留言:0更新日期:2013-04-18 05:51
    一種膽紅素的檢測方法,采用速率測定法,根據在波長440~465nm處,反應體系吸光度的降低速率與樣本中膽紅素的濃度成正比,延遲30~60秒后,測定30~180秒內的吸光度下降速率,得到膽紅素的含量。本發明專利技術使用酶速率測定法,測定的是反應的速率,在反應過程中的線性期進行讀數,可完全排除血清樣品本底的干擾,提高了結果的準確度;延遲時間短,讀數時間也很短,使整個反應時間大大縮短,提高了效率;無需考慮血清樣品本底的去除,操作簡便,儀器參數設置也很簡單,無需復雜的計算公式;可以使用雙試劑模式進行測定,也可以使用單試劑模式進行測定,適用于各種自動、半自動生化分析儀器及分光光度計,適用范圍廣。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及一種膽紅素的檢測方法,具體地說是一種酶速率法人血清膽紅素的檢測方法及檢測試劑盒,用于體外定量測定人血清、血漿中的膽紅素的濃度,屬于醫用臨床生化診斷試劑領域。
    技術介紹
    膽紅素是由四個吡咯環通過分子中央的2-次甲基橋相連而成的復雜線形有機化合物,是血紅素的代謝產物。在血液中,膽紅素的存在有結合膽紅素和非結合膽紅素兩種形式,結合膽紅素的吸收峰為422nm,非結合膽紅素的吸收峰為459nm。正常生理條件下結合膽紅素為與白蛋白形成非共價的可逆結合,但在部分肝臟病人血液中膽紅素與白蛋白以共價鍵結合形成吸收峰為433nm的中間物質??偰懠t素是結合(直接)膽紅素與非結合(間接)膽紅素的總和,血清總膽紅素的測定在臨床上有著重要的意義,主要在肝臟代謝,是一項重要的常規肝功能測定指標??偰懠t素增加,通常是由于膽道阻塞、肝炎、肝硬化、肝衰竭、溶血性綜合癥和某些遺傳性酶缺乏。間接膽紅素增加常見于肝前或肝內原因,如溶血性綜合癥,導致膽紅素攝取、運輸或結合缺損的肝臟疾病。膽紅素的生理性降低見于孕婦。血清總膽紅素的降低與冠心病危險增加相關。膽紅素監測對于新生兒,尤其是早產兒極為重要。此時肝細胞內膽紅素代謝常常不成熟,由于非結合膽紅素上升而引起的黃疸是很常見的。非結合膽紅素如未能與白蛋白結合,則極易通過血腦屏障,增加腦損傷的危險。目前臨床常用測定膽紅素的方法有重氮試劑法、化學氧化法、膽紅素氧化酶終點法等。重氮試劑法應用最早,但線性較低,質量不好控制,結果差異大;化學氧化法近年發展比較迅速,但也易受干擾,結果常出現負值;酶法測定是最先進的方法,線性高,近幾年備受業界推崇,但目前使用的膽紅素氧化酶終點法計算公式繁瑣,反應時間長,也易受血清本底干擾,只在高端市場有使用,沒有大面積推廣使用。以上方法應用都比較廣泛,均為終點法測定,有一個共同的缺點就是易受血清本底干擾,大大影響了結果的準確性。
    技術實現思路
    本專利技術要解決的技術問題是針對以上不足,提供一種酶速率法人血清膽紅素的檢測方法及檢測試劑盒,用于體外定量測定人血清、血漿中的膽紅素的濃度,克服了現有檢測方法易受血清本底干擾的缺陷,本專利技術檢測方法以酶催化氧化法,使用速率測定法,完全排除了血清本底的干擾,縮短了反應時間,操作簡便,結果準確可靠,適用于各種生化分析儀器。為解決以上問題,本專利技術采用的技術方案是一種膽紅素的檢測方法,其特征在于所述檢測方法為采用速率測定法,根據在波長440 465nm處,反應體系吸光度的降低速率與樣本中膽紅素的濃度成正比,延遲30 60秒后,測定30 180秒內的吸光度下降速率,得到膽紅素的含量;本文檔來自技高網
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    【技術保護點】
    一種膽紅素的檢測方法,其特征在于:所述檢測方法為采用酶速率測定法,根據在波長440~465nm處,反應體系吸光度的降低速率與樣本中膽紅素的濃度成正比,延遲30~60秒后,測定30~180秒內的吸光度下降速率,得到膽紅素的含量。

    【技術特征摘要】
    1.一種膽紅素的檢測方法,其特征在于所述檢測方法為采用酶速率測定法,根據在波長440 465nm處,反應體系吸光度的降低速率與樣本中膽紅素的濃度成正比,延遲30 60秒后,測定30 180秒內的吸光度下降速率,得到膽紅素的含量。2.如權利要求1所述的ー種膽紅素的檢測方法,其特征在于所述吸光度下降速率測定步驟首先根據測定取所需要的樣本管、空白管及標準管,分別加入緩沖液;然后在樣本管、空白管及標準管內對應加入待測樣本、蒸餾水及標準液,混勻,37°C條件下保溫3 10分鐘,再加入酶試劑,混勻,得到反應液; 或先將緩沖液和酶試劑配成試劑工作液,穩定3 10分鐘;然后根據測定取所需要的樣本管、空白管及標準管,分別加入試劑工作液;再分別在樣本管、空白管及標準管內對應加入待測樣本、蒸懼水及標準液,得到反應液; 反應液在37°C條件下反應,延遲30 60秒后,在波長440 465nm處讀取反應液的吸光度變化,讀數間隔時間為30 180秒,計算平均每分鐘吸光度變化率AA/分鐘,得到空白管、標準管及樣本管內反應液的姆分鐘吸光度變化率AA/分鐘。3.如權利要求2所述的ー種膽紅素的檢測方法,其特征在于所述4.如權利要求2所述的ー種膽紅素的檢測方法,其特征在于所...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:孫希武,秦英,王永慶,吐爾洪·買買提,
    申請(專利權)人:濰坊鑫澤生物科技有限公司,
    類型:發明
    國別省市:

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