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    一種核酸及其應用和藥物組合物制造技術

    技術編號:8653117 閱讀:230 留言:0更新日期:2013-05-01 19:58
    本發明專利技術提供了一種核酸,該核酸為siRNA或者插入有編碼短發夾核糖核酸的核酸片段的質粒。本發明專利技術還提供了上述核酸在制備用于預防和/或治療乙型肝炎的藥物組合物中的應用。本發明專利技術還提供了一種藥物組合物,該藥物組合物含有如上所述的核酸和藥學上可接受的載體。本發明專利技術提供的核酸和藥物組合物能夠在體內達到30%以上抑制率的干擾HBV的效果。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及生物制藥領域,具體地,涉及一種核酸、該核酸的應用和一種藥物組合物。
    技術介紹
    乙型病毒性肝炎簡稱乙型肝炎(乙肝),是一種由乙型肝炎病毒(HBV)引起的傳染病。乙型肝炎主要通過血液和體液傳播,臨床表現多樣化,包括急性、慢性、淤膽型和重癥型肝炎,并且容易發展為慢性肝炎和肝硬化,少數病例亦可轉變為原發性肝細胞癌。目前HBV感染呈世界性流行,主要侵犯兒童及青壯年。據世界衛生組織報道,全球約有4億人為慢性HBV攜帶者,每年約有100萬人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發性肝細胞癌。中國是世界范圍內感染HBV人數最多的國家,全國現有慢性乙肝病人2000萬,每年乙肝新發病人數約50萬。由此可見,乙肝已成為嚴重威脅人類健康的世界性疾病,也是我國當前流行最為廣泛、危害性最為嚴重的一種傳染病。防治乙型肝炎的藥物中,核酸干擾藥物具有良好的應用前景,但是,目前的核酸干擾藥物的體內干擾HBV的效果較差。
    技術實現思路
    本專利技術的目的是克服目前的核酸干擾藥物的體內干擾HBV的效果較差的缺陷,提供一種體內干擾HBV的效果較好的核酸干擾藥物。本專利技術的專利技術人發現,針對同一已知基因或基因組,即使根據已知的siRNA作用機制和序列規律設計出來的siRNA,并不一定能在體內具有較好的核酸干擾效果,即不經過實驗驗證,無法確定siRNA的體內效果。本專利技術的專利技術人經過創造性勞動,發現并驗證了若干在體內具有較好的核酸干擾效果的siRNA,由此得到本專利技術。為了實現上述目的,本專利技術提供了一種核酸,該核酸含有正義鏈序列為SEQ IDNO:1且反義鏈序列為SEQ ID NO:2的siRNA-8、正義鏈序列為SEQ ID NO:3且反義鏈序列為SEQ ID NO:4的siRNA-23、正義鏈序列為SEQ ID NO:5且反義鏈序列為SEQ ID NO:6的siRNA-27、正義鏈序列為SEQ ID NO:7且反義鏈序列為SEQ ID NO:8的siRNA-30、正義鏈序列為SEQ ID NO:9且反義鏈序列為SEQ ID NO:10的siRNA-32、正義鏈序列為SEQ ID NO:11且反義鏈序列為SEQ ID NO:12的siRNA-34、正義鏈序列為SEQ ID NO:34且反義鏈序列為SEQ ID NO:35的siRNA-4、正義鏈序列為SEQ ID NO:36且反義鏈序列為SEQ ID NO:37的siRNA-9、正義鏈序列為SEQ ID NO:38且反義鏈序列為SEQ ID NO:39的siRNA-17、正義鏈序列為SEQ ID NO:40且反義鏈序列為SEQ ID NO:41的siRNA-22、正義鏈序列為SEQ ID NO:42且反義鏈序列為SEQ ID NO:43的siRNA-26、正義鏈序列為SEQ ID NO:44且反義鏈序列為SEQ ID NO:45的siRNA-35、正義鏈序列為SEQ ID NO:46且反義鏈序列為SEQ ID NO:47的siRNA-3 6、正義鏈序列為SEQ ID NO:48且反義鏈序列為SEQ ID NO:49的siRNA-37、正義鏈序列為SEQ ID NO:50且反義鏈序列為SEQ ID NO:51的siRNA-38、正義鏈序列為SEQ ID NO:52且反義鏈序列為SEQ ID NO:53的siRNA-40和正義鏈序列為SEQID NO:54且反義鏈序列為SEQ ID NO:55的siRNA-45中的至少一種。本專利技術還提供了另外一種核酸,該核酸為插入有編碼短發夾核糖核酸的核酸片段的質粒,所述質粒表達所述短發夾核糖核酸,所述編碼短發夾核糖核酸的核酸片段由兩個短反向重復片段和位于所述兩個短反向重復片段之間的環片段組成;所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID N0:13和SEQ ID NO:14,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID N0:19和SEQ IDNO:20,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID NO:21和SEQ ID N0:22,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID N0:23和SEQ ID NO:24,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID N0:56和SEQ ID NO:57,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID NO:58和SEQ ID NO:59,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ IDN0:60和SEQ ID NO:61,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID N0:62和SEQ IDNO:63,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID NO:64和SEQ ID NO:65,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID N0:66和SEQ ID NO:67,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID N0:68和SEQ ID NO:69,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID N0:70和SEQ ID NO:71,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ IDN0:72和SEQ ID NO:73,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID NO:74和SEQID NO:75,或所述兩個短反向重復片段的序列分別為SEQ ID NO:76和SEQ ID NO -.1l0本專利技術還提供了上述核酸在制備用于預防和/或治療乙型肝炎的藥物組合物中的應用。本專利技術還提供了一種藥物組合物,該藥物組合物含有如上所述的核酸和藥學上可接受的載體。通過上述技術方案,本專利技術提供的核酸和藥物組合物能夠在體內達到30%以上抑制率的干擾HBV的效果。`本專利技術的其他特征和優點將在隨后的具體實施方式部分予以詳細說明。具體實施例方式以下對本專利技術的具體實施方式進行詳細說明。應當理解的是,此處所描述的具體實施方式僅用于說明和解釋本專利技術,并不用于限制本專利技術。在本專利技術中,使用的術語siRNA是指小干擾核糖核酸,使用的術語ShRNA是指短發夾核糖核酸。本專利技術提供了一種核酸,該核酸含有正義鏈序列為SEQ ID NO:1且反義鏈序列為SEQ ID NO:2的siRNA-8、正義鏈序列為SEQ ID NO:3且反義鏈序列為SEQ ID NO:4的siRNA-23、正義鏈序列為SEQ ID NO:5且反義鏈序列為SEQ ID NO:6的siRNA-27、正義鏈序列為SEQ ID NO:7且反義鏈序列為SEQ ID NO:8的siRNA-30、正義鏈序列為SEQ ID NO:9且反義鏈序列為SEQ ID NO:10的siRNA-32、正義鏈序列為SEQ ID NO: 11且反義鏈序列為SEQ ID NO: 12的siRNA-34、正義鏈序列為SEQ ID NO:34且反義鏈序列為SEQ ID N0:35的siRNA-4、正義鏈序列為SEQ ID NO:36且反義鏈序列為SEQ ID NO:37的siRNA-9、正義鏈序列為SEQ ID NO:38且反義鏈序列為SEQ ID NO:39的siRNA-17、正義鏈序列為SEQ ID N本文檔來自技高網...

    【技術保護點】
    一種核酸,該核酸含有正義鏈序列為SEQ?ID?NO:1且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:2的siRNA?8、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:3且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:4的siRNA?23、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:5且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:6的siRNA?27、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:7且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:8的siRNA?30、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:9且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:10的siRNA?32、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:11且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:12的siRNA?34、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:34且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:35的siRNA?4、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:36且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:37的siRNA?9、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:38且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:39的siRNA?17、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:40且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:41的siRNA?22、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:42且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:43的siRNA?26、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:44且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:45的siRNA?35、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:46且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:47的siRNA?36、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:48且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:49的siRNA?37、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:50且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:51的siRNA?38、正義鏈序列為SEQ?ID?NO:52且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:53的siRNA?40和正義鏈序列為SEQ?ID?NO:54且反義鏈序列為SEQ?ID?NO:55的siRNA?45中的至少一種。...

    【技術特征摘要】
    1.一種核酸,該核酸含有正義鏈序列為SEQ ID NO:1且反義鏈序列為SEQ ID NO:2的siRNA-8、正義鏈序列為SEQ ID NO:3且反義鏈序列為SEQ ID NO:4的siRNA_23、正義鏈序列為SEQ ID NO:5且反義鏈序列為SEQ ID NO:6的siRNA_27、正義鏈序列為SEQ ID NO:7且反義鏈序列為SEQ ID NO:8的siRNA_30、正義鏈序列為SEQ ID NO:9且反義鏈序列為SEQ ID NO:10的siRNA-32、正義鏈序列為SEQ ID NO: 11且反義鏈序列為SEQ ID N0:12的siRNA-34、正義鏈序列為SEQ ID NO:34且反義鏈序列為SEQ ID NO:35的siRNA_4、正義鏈序列為SEQ ID NO:36且反義鏈序列為SEQ ID NO:37的siRNA_9、正義鏈序列為SEQ ID NO:38且反義鏈序列為SEQ ID NO:39的siRNA-17、正義鏈序列為SEQ ID N0:40且反義鏈序列為SEQ ID NO:41的siRNA-22、正義鏈序列為SEQ ID NO:42且反義鏈序列為SEQ ID NO:43的siRNA-26、正義鏈序列為SEQ ID NO:44且反義鏈序列為SEQ ID NO:45的siRNA-35、正義鏈序列為SEQ ID NO:46且反義鏈序列為SEQ ID NO:47的siRNA_36、正義鏈序列為SEQID NO:48且反義鏈序列為SEQ ID NO:49的siRNA_37、正義鏈序列為SEQ ID NO:50且反義鏈序列為SEQ ID NO:51的siRNA_38、正義鏈序列為SEQ ID NO:52且反義鏈序列為SEQID NO:53的siRNA-40和正義鏈序列為SEQ ID NO:54且反義鏈序列為SEQ ID NO:55的siRNA-45中的至少一種。2.根據權利要求1所述的核酸,其中,該核酸為所述siRNA-8、所述siRNA-23、所述siRNA-27、所述 siRNA-30、所述 siRNA-32 或所述 siRNA-34 ;優選為所述 siRNA-23、所述siRNA-27 或所述 siRNA-30。3.根據權利要求1或2所述的核酸,其中,所述核酸含有至少一個修飾的核苷酸基團。4.根據權利要求3所述的核酸,其中,所述修飾的核苷酸基團為磷酸基團、核糖基團和堿基中的至少一種被修飾的核苷酸基團。5.根據權利要求4所述的核酸,其中,所述核糖基團被修飾的核苷酸基團為核糖基團的2’ -OH被甲氧基或氟取代的核苷酸基團。6.根據權利要 求5所述的核酸,其中,該核酸含有正義鏈序列為SEQIDNO:78且反義鏈序列為SEQ ID NO:79的siRNA(m)-8、正義鏈序列為SEQID NO:80且反義鏈序列為SEQID NO:81的siRNA(m)-23、正義鏈序列為SEQ ID NO:82且反義鏈序列為SEQ ID NO:83的siRNA (m)-27、正義鏈序列為 SEQ ID NO:84且反義鏈序列為 SEQ ID NO:85 的 siRNA (m)-30、正義鏈序列為SE...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:梁子才,李德毓,周春雷王茜
    申請(專利權)人:昆山市工業技術研究院小核酸生物技術研究所有限責任公司
    類型:發明
    國別省市:

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