本發明專利技術公開了一種金錢菇三螺旋多糖的制備及其結構，提供了一種金錢菇多糖的制備方法和其結構特征，擴大了金錢菇的應用范圍和利用價值，包括金錢菇材料的準備、多糖提取液的配制、提取過程、中和脫色、透析、離心、純化、結構鑒定等特征步驟。所提取的金錢菇三螺旋多糖為雜多糖，主要由葡萄糖組成，同時含有少量的甘露糖、半乳糖和木糖。糖鏈主鏈結構為β-(1→3)-D-葡聚糖，帶有(1→6)連接支鏈。本發明專利技術具有如下優點：（1）本發明專利技術用的是水提金錢菇之后的殘渣，可以持續利用，節省成本，擴展了金錢菇的應用領域；（2）本發明專利技術用堿提殘渣中的多糖，擴寬了糖的范圍，可以更加明確金錢菇的藥用價值；（3）本發明專利技術對提取的多糖進行了結構確定，為更好地開發利用金錢菇多糖提供了重要的理論支撐。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及多糖的制備和結構鑒定領域，確切地說是一種金錢菇三螺旋多糖的制備及其結構。
技術介紹
多糖是由單糖分子通過糖苷鍵連接而成的高分子化合物。多糖具有多種生物活性，例如，抗氧化、抗腫瘤、降血糖、抗菌等。同時多糖的生物活性與其化學結構和空間結構有著密切的聯系，因此研究其結構能夠為進一步研究其生物活性提供基礎和如提。金錢菇，是香菇的一種，因其外形像古時的金幣，因此取名金錢菇。它含有多種化學成分，具有調節人體新陳代謝、幫助消化、降低血壓、減少膽固醇、預防肝硬變、消除膽結石、防治佝僂病等功效。近年來，人們越來越關注金錢菇的藥用價值，開始認識到金錢菇多糖的生物活性。目前，水提殘渣直接被遺棄，沒有得到很好地利用，而在水提殘渣中還含有活性物質多糖，研究殘渣中的活性多糖具有重要的意義。
技術實現思路
本專利技術的目的是在于提供一種從金錢菇三螺旋多糖的制備其結構表征方法，通過以下步驟實現: 一種金錢菇三螺旋多糖的制備，其特征在于包括以下步驟: (O 金錢菇水提殘渣的制備:將金錢菇粉碎過6(Γ100目篩，用乙醇脫色脫脂后，依次經過25 ° C左右水提、90 ° C左右水提后得到的殘渣即為水提殘渣； (2)多糖混合提取液的配制 :配制5% NaOH與0.05% NaBH4混合溶液； (3)提取過程:往水提殘渣中加入料液比為l:3(Tl:40的多糖混合提取液，提取2^3 h，三層紗布過濾，提取兩次，離心，合并提取液； (4)中和脫色:加入乙酸中和至中性后再用H2O2脫色； (5)透析:使用透析袋進行透析處理，然后通過旋轉蒸發儀濃縮至原體積的1/3 1/5 ； (6)離心:在濃縮液中加入丙酮，靜置、離心，收集沉淀； (7)多糖的獲得:沉淀用蒸餾水溶解后進行透析、濃縮、冷凍干燥處理，得到多糖.所述的一種金錢菇三螺旋多糖的制備，其特征在于步驟(4)中所用乙酸的濃度為5%，H2O2的濃度為30%，脫色溫度為45 55 ° C，脫色時間為I 2 h。所述的一種金錢菇三螺旋多糖的制備，其特征在于步驟(5)中使用的透析袋的截留分子量為3500 Da，先用自來水流水透析3飛天，再改用蒸餾水透析3飛天。所述的一種金錢菇三螺旋多糖的制備，其特征在于步驟(6)中加入丙酮的量為濃縮液的I 1.5倍，靜置時間為24 36 h，離心轉速為8000 10000 r/min，離心時間為30 60min。所述的金錢菇三螺旋多糖的結構，其特征在于:(1)三螺旋結構的確定:采用黏度測定實驗和剛果紅實驗確定其螺旋結構； (2)結構表征:用FT-1R、GC、NMR確定其一級結構。所述的一種金錢菇三螺旋多糖的結構，其特征在于步驟(I)中剛果紅實驗中配置的多糖溶液濃度為2 mg/mL，剛果紅溶液濃度為80 Mmol/L和NaOH溶液濃度范圍為0.00^0.50 mol/L，梯度為 0.05 mol/L，測量波長范圍為 200 nm 800 nm。所述的一種金錢菇三螺旋多糖的結構，其特征在于步驟(2)中FT-1R的波長掃描范圍為400(T400 cnT1，采用KBr壓片法測試；GC處理方法為糖醇乙酰酯法；NMR中的溶劑為DMS0-1/6。本專利技術所提取的金錢菇三螺旋多糖為雜多糖，主要由葡萄糖組成，同時含有少量的甘露糖、半乳糖和木糖。糖鏈主鏈結構為盧-(I — 3)-D-葡聚糖，帶有(1 — 6)連接支鏈。本專利技術具有如下優·點:(1)本專利技術用的是水提金錢菇之后的殘渣，可以持續利用，節省成本，擴展了金錢菇的應用領域；(2)本專利技術用堿提殘渣中的多糖，擴寬了糖的范圍，可以更加明確金錢菇的藥用價值；(3)本專利技術對提取的多糖進行了結構鑒定，為更好地開發利用金錢菇多糖提供了重要的理論支撐。附圖說明圖1為實施例剛果紅實驗結果； 圖2為實施例金錢菇堿提多糖的紅外光譜； 圖3為實施例金錢菇多糖的氣相色譜圖4為實施例金錢菇堿提多糖的核磁共振圖。具體實施例方式下面將進一步說明本專利技術的實質內容: (1)金錢菇水提殘渣的制備:將金錢菇粉碎過60目篩，用乙醇脫色脫脂后，依次經過25° C、90 ° C水提后得到的殘渣即水提殘渣； (2)多糖提取液的配制:配制含5%Na0H/0.05% NaBH4混合溶液； (3)提取過程:往水提殘渣中加入料液比為1:40的混合提取液，提取2h，三層紗布過濾，提取兩次，離心，合并提取液； (4)中和脫色:加入5%的乙酸中和至中性后再用30%的H2O2在50° C下脫色I h，直至顏色變為無色為止； (5)透析:使用截留分子量為3500Da的透析袋進行透析處理，先用自來水流水透析5天，再改用蒸餾水透析5天，然后通過旋轉蒸發儀濃縮至原體積的1/3 1/5 ； (6)離心:在濃縮液中緩慢加入濃縮液f1.5倍體積的丙酮，靜置24 h后，離心并收集沉淀，其中離心轉速為10000 r/min,離心時間為30 min ； (7)多糖樣品的獲得:沉淀用蒸餾水溶解后進行透析、濃縮、冷凍干燥處理，得到多糖樣品; (8)三螺旋結構的確定:通過黏度測定實驗測得其特性粘度為1380cm3/g，剛果紅實驗中，金錢菇多糖與剛果紅試劑形成的絡合物的最大吸收波長相對于剛果紅試劑發生紅移，綜合表明該糖具有三螺旋結構；(9)結構表征:用FT-1R、GC、NMR確定其一級結構，FT-1R的波長掃描范圍為400(Γ400cnT1，采用KBr壓片法測試；GC處理方法為糖醇乙酰酯法；NMR中的溶劑為DMSO-式。紅外分析結果表明，在3380 cnT1處出現了一寬峰，是由于-OH的伸縮振動；在2919 cnT1處出現的吸收峰，是由于C-H伸縮振動引起的，這一吸收峰是糖類的特征吸收峰，在1057 cnT1處的吸收峰是吡喃糖苷的特征吸收峰，而在897 cnT1處的特征吸收峰，說明該糖樣中含有β-D-葡聚糖。氣相色譜分析發現該糖主要由葡萄糖組成，同時還含有少量的甘露糖、半乳糖和木糖。核磁共振實驗表明葡萄糖鏈上的C原子的化學位移為5 103.47 (Cl), δ74.169(C2), δ 86.754 (C3), δ 68.850 (C4)，δ 76.568 (C5)，δ 61.331 (C6), δ103.370 (Cl，), ^ 70.390 (C6，)，經分析及與文獻對比表明制備的金錢菇多糖為主鏈結構為β-(I — 3)-D-葡聚糖，并帶有(1 — 6)連接支鏈的葡聚糖。本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種金錢菇三螺旋多糖的制備，其特征在于包括以下步驟：（1）金錢菇水提殘渣的制備：將金錢菇粉碎過60~100目篩，用乙醇脫色脫脂后，依次經過25?°C左右水提、90?°C左右水提后得到的殘渣即為水提殘渣；（2）多糖混合提取液的配制：配制5%?NaOH與0.05%?NaBH4混合溶液；（3）提取過程：往水提殘渣中加入料液比為1:30~1:40的多糖混合提取液，提取2~3?h，三層紗布過濾，提取兩次，離心，合并提取液；（4）中和脫色：加入乙酸中和至中性后再用H2O2脫色；（5）透析：使用透析袋進行透析處理，然后通過旋轉蒸發儀濃縮至原體積的1/3~1/5；?（6）離心：在濃縮液中加入丙酮，靜置、離心，收集沉淀；?(7)???多糖的獲得：沉淀用蒸餾水溶解后進行透析、濃縮、冷凍干燥處理，得到多糖。
【技術特征摘要】
1.一種金錢菇三螺旋多糖的制備，其特征在于包括以下步驟: (1)金錢菇水提殘渣的制備:將金錢菇粉碎過6(Γιοο目篩，用乙醇脫色脫脂后，依次經過25 ° C左右水提、90 ° C左右水提后得到的殘渣即為水提殘渣； (2)多糖混合提取液的配制:配制5%NaOH與0.05% NaBH4混合溶液； (3)提取過程:往水提殘渣中加入料液比為l:3(Tl:40的多糖混合提取液，提取2 3h，三層紗布過濾，提取兩次，離心，合并提取液； (4)中和脫色:加入乙酸中和至中性后再用H2O2脫色； (5)透析:使用透析袋進行透析處理，然后通過旋轉蒸發儀濃縮至原體積的1/3 1/5； (6)離心:在濃縮液中加入丙酮，靜置、離心，收集沉淀； (7)多糖的獲得:沉淀用蒸餾水溶解后進行透析、濃縮、冷凍干燥處理，得到多糖。2.根據權利要求1所述的 一種金錢菇三螺旋多糖的制備，其特征在于步驟(4)中所用乙酸的濃度為5%，H2O2的濃度為30%，脫色溫度為45 55 ° C，脫色時間為I 2 h。3.根據權利要求1所述的一種金錢菇三螺旋多糖的制備，其特征在于步驟(5)中使...
【專利技術屬性】
技術研發人員：王軍輝，余順火，杜逸群，劉詠，姚玉飛，許浩，單亮，
申請(專利權)人：合肥工業大學，
類型：發明
國別省市：
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