本發(fā)明專利技術公開了一種大孔吸附樹脂的制備方法及其在恰瑪古總黃酮提取中的應用，屬于大孔吸附樹脂的制造及應用技術領域。其制備方法包括下述步驟：（1）配制油相；（2）配制水相；（3）聚合；（4）處理。本發(fā)明專利技術采用一步合成法，將具氫鍵形成能力的基團引入樹脂，工藝簡單，大大提高了樹脂的吸附選擇性及吸附能力；用于提取恰瑪古總黃酮，能大大提高其收率，得到總黃酮純度大于90%，可實現(xiàn)恰瑪古總黃酮的大規(guī)模生產(chǎn)，具有廣闊的工業(yè)化生產(chǎn)前景。
【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術涉及大孔吸附樹脂的制造及應用。
技術介紹
維藥恰瑪古是十字花科蕓薹屬蕓薹種草本植物蕪菁(Brassica rapa L.)的塊根，是維族傳統(tǒng)的藥食兼用植物。《維吾爾藥志》中記載，其味甘、辛、苦，性溫。入胃、肝、腎三經(jīng)。開胸順氣、健胃消食、解毒，用于胸悶腹胃脹痛、食欲不振、瘡癤腫毒等疾。恰瑪古中含有黃酮類、多糖類、皂甙類等化學成分。現(xiàn)代藥理研究已證實黃酮類化合物具有多種生理活性，是天然活性成分研究的熱點之一。開發(fā)具大規(guī)模生產(chǎn)可能性的高純度恰瑪古總黃酮提取物制備工藝，不僅可以為研究其確切生理活性提供實驗材料，而且可為相關保健品、藥品的開發(fā)奠定物質基礎。大孔吸附樹脂法以其性能穩(wěn)定，環(huán)境友好，操作簡單等優(yōu)勢，在黃酮類提取物的工業(yè)生產(chǎn)中被廣泛使用。近年來樹脂法提取黃酮類活性成分的相關報道很多，但普遍存在產(chǎn)品中總黃酮含量不高的問題。這是由于所選用樹脂多為聚苯乙烯系骨架結構，其吸附作用力為疏水作用力，對黃酮分子無特異性吸附。有文獻報道，以對黃酮類成分無特殊吸附選擇性的大孔吸附樹脂AB-8純化恰瑪古總黃酮，在最優(yōu)工藝條件下，所得提取物中總黃酮含量為78%，且解吸一步黃酮損失率為30%。(馬菁.新疆恰瑪古中類黃酮提取、純化及微膠囊化的研究[D].新疆:石河子大學，2010:36-41)。經(jīng)分析恰瑪古黃酮分子結構中帶有多個可形成氫鍵的功能基團。如果將具氫鍵形成能力的基團引入樹脂，無疑會提高樹脂對其的吸附選擇性。目前，具氫鍵基團的大孔吸附樹脂制備工藝多是先合成無功能基團的樹脂白球，再經(jīng)過一步或多步功能基化反應，將胺基、酰胺基等氫鍵基團引入樹脂。這種方式不但工藝繁瑣，成本較高，而且在功能基化步驟中，樹脂結構易發(fā)生改變，對樹脂比表面積、孔容、孔徑等性質均有影響，給樹脂吸附性能調控帶來困難。
技術實現(xiàn)思路
本專利技術提供一種大孔吸附樹脂的制備方法及其在恰瑪古總黃酮提取中的應用，采用一步合成法，將具氫鍵形成能力的基團引入樹脂，工藝簡單，大大提高了樹脂的吸附選擇性及吸附能力；用于提取恰瑪古總黃酮，能大大提高其收率，得到總黃酮純度大于90%，可實現(xiàn)恰瑪古總黃酮的大規(guī)模生產(chǎn)，具有廣闊的工業(yè)化生產(chǎn)前景。本專利技術所采取 的技術方案是: 一種大孔吸附樹脂的制備方法，包括下述步驟: (O配制油相:稱取4-乙烯基吡啶5-10份，N-乙烯基吡咯烷酮10-20份，丙烯酸甲酯20-30份，二甲基丙烯酸乙二醇酯30-45份，三烯丙基異氰脲酸酯5-10份，過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈的混合物0.5-2份，將上述原料混合均勻，然后加入50-250份極性溶劑與非極性溶劑的混合物，得到油相；所述過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈的混合物中過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈的質量比為1:2-4 ;所述極性溶劑與非極性溶劑質量比為1:0.5-2 ； (2)配制水相:配制水溶液，水溶液中，聚乙烯醇的質量濃度為0.3%-1.0%、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉的質量濃度為0.05%-0.1%、無機鹽類的質量濃度為8-25%的水溶液；所述無機鹽類中Na2HPO4的質量為0.2%-0.5%，其余為NaCl，NaNO3, CaCl2中的一種或幾種； (3)聚合:取質量為油相2.5-5倍的水相，加熱至40-50°C，加入油相，開啟攪拌，使油相分散為20-60目的油滴，然后以0.5-10C /min的速度升溫至65-67°C，反應4_6h，以0.5-10C /min的速度升溫 至75°C _80°C，反應2_4h，以1_2°C /min的速度升溫至90°C，反應3-6h，將珠體濾出； (4)后處理。其中，后處理方法為:用80°C以上的水充分洗滌珠體至洗液清澈，然后將珠體置于樹脂柱中，用95%乙醇淋洗，直至流出液與水以體積比1:1混合不渾濁，60-80°C常壓干燥，即得到成品樹脂。步驟(I)中極性溶劑為乙酸乙酯，環(huán)己酮，環(huán)己醇中的一種或幾種。步驟(I)中非極性溶劑為甲苯，200#汽油，正庚烷中的一種或幾種。本專利技術還提供了上述大孔吸附樹脂在恰瑪古總黃酮提取中的應用，將恰瑪古上柱液用大孔吸附樹脂進行吸附、提取恰瑪古總黃酮。大孔吸附樹脂提取恰瑪古總黃酮包括下述步驟: (1)稱取干燥的恰瑪古并粉碎為粗粉，以恰瑪古質量6-10倍的石油醚回流提取1-2次，每次l_2h，過濾；用恰瑪古質量10-20倍的乙醇水溶液回流提取濾渣2-3次，每次1_3小時，過濾；濾液合并，蒸發(fā)乙醇至提取液中乙醇體積濃度為5%以下，加水至體積為恰瑪古質量的8-10倍，以鹽酸或乙酸水溶液將pH值調至4-6，得上柱液；所述乙醇水溶液的濃度為50-80% ； (2)將恰瑪古質量6-10倍的樹脂以95%乙醇充分溶脹，裝入柱中，以體積濃度為80-95%的乙醇水溶液通入樹脂柱，流速控制在l_4BV/h，直至流出液與水以體積比1:1混合不渾濁；以3-6BV水洗樹脂柱，流速控制在l_4BV/h，得到樹脂吸附柱； (3)將步驟(I)所得上柱液以0.5-3BV/h流速通過樹脂吸附柱； (4)用2-5BV水清洗樹脂床層，依次以2-5BV體積濃度為10-30%的乙醇水溶液及3-5BV體積濃度為70-90%的乙醇水溶液分步洗脫，流速為0.5_3BV/h ； (5)將體積濃度為70-90%的乙醇洗脫液濃縮、干燥，即得恰瑪古總黃酮提取物。其中，步驟(I)中鹽酸或乙酸水溶液的體積濃度為8-10%。步驟(2)中樹脂柱的柱徑長比為1:5-1:10 本專利技術通過一步合成制備具氫鍵功能基團的大孔吸附樹脂，省去了對白球進行功能基化的步驟，制備工藝相對簡單，生產(chǎn)成本較低，同時避免了功能基化過程對樹脂結構的影響；使用混合引發(fā)劑，使聚合過程更為平穩(wěn)、可控；混合致孔劑的使用，對樹脂孔結構進行調整，使孔徑適于黃酮分子擴散，以保證樹脂純化步驟中總黃酮吸附量高，解吸損失率低；競聚率與單體差異較小的交聯(lián)劑的使用，一方面使樹脂孔結構更為均勻，穩(wěn)定，另一方面，降低了樹脂吸附表面的疏水性，將疏水吸附作用力適當減弱。本專利技術通過對引發(fā)劑、致孔劑及交聯(lián)劑的種類及比例的調整，對樹脂結構、性能加以調控，所得樹脂結構均勻、穩(wěn)定，孔徑適當，使由氫鍵基團帶來的特異性吸附作用充分顯現(xiàn)，由此對恰瑪古總黃酮類化合物具有突出的純化效果。在樹脂吸附后的梯度洗脫過程中，以水及低濃度乙醇水溶液洗脫時，水溶性大、且無氫鍵基團的成分首先被洗脫。繼而，使用洗脫能力更強的高濃度乙醇水溶液解吸黃酮，由此即可得到高純度恰瑪古總黃酮提取物。其中總黃酮含量可達90%以上，樹脂純化過程中黃酮保留率可達90%以上。采用上述技術方案所產(chǎn)生的有益效果在于: 1.采用一步合成法，將具氫鍵形成能力的基團引入樹脂，工藝簡單，大大提高了樹脂的吸附選擇性及吸附能力，為恰瑪古總黃酮的大規(guī)模生產(chǎn)奠定了基礎。2.用于提取恰瑪古總黃酮，采用梯度洗脫，將吸附作用力較弱的物質首先洗脫，然后用解吸能力較強的解吸劑洗·脫總黃酮類成分，得到的總黃酮含量可達90%以上，大大提高了恰瑪古總黃酮收率。具體實施例方式制備例I (1)稱取下述質量配比的原料:4_乙烯基吡啶5份，N-乙烯基吡咯烷酮20份，丙烯酸甲酯23份，二甲基丙烯酸乙二醇酯38份，三烯丙基異氰脲酸酯8份，過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈質量比為1:2.5的混合物1.7份，將上述原料混合均勻，然本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術保護點】
一種大孔吸附樹脂的制備方法，其特征在于其包括下述步驟：（1）配制油相：稱取4?乙烯基吡啶5?10份，N?乙烯基吡咯烷酮10?20份，丙烯酸甲酯20?30份，二甲基丙烯酸乙二醇酯30?45份，三烯丙基異氰脲酸酯5?10份，過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈的混合物0.5?2份，將上述原料混合均勻，然后加入50?250份極性溶劑與非極性溶劑的混合物，得到油相；所述過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈的混合物中過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈的質量比為1:2?4；所述極性溶劑與非極性溶劑質量比為1：0.5?2；（2）配制水相：配制水溶液，水溶液中，聚乙烯醇的質量濃度為0.3%?1.0%、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉的質量濃度為0.05%?0.1%、無機鹽類的質量濃度為8?25%的水溶液；所述無機鹽類中Na2HPO4的質量為0.2%?0.5%，其余為NaCl，NaNO3，CaCl2中的一種或幾種；（3）聚合：取質量為油相2.5?5倍的水相，加熱至40?50℃，加入油相，開啟攪拌，使油相分散為20?60目的油滴，然后以0.5?1℃/min的速度升溫至65?67℃，反應4?6h，以0.5?1℃/min的速度升溫至75℃?80℃，反應2?4h，以1?2℃/min的速度升溫至90℃，反應3?6h，將珠體濾出；（4）后處理。...
【技術特征摘要】
1.一種大孔吸附樹脂的制備方法，其特征在于其包括下述步驟: (O配制油相:稱取4-乙烯基吡啶5-10份，N-乙烯基吡咯烷酮10-20份，丙烯酸甲酯20-30份，二甲基丙烯酸乙二醇酯30-45份，三烯丙基異氰脲酸酯5-10份，過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈的混合物0.5-2份，將上述原料混合均勻，然后加入50-250份極性溶劑與非極性溶劑的混合物，得到油相； 所述過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈的混合物中過氧化苯甲酰與偶氮二異丁腈的質量比為1:2-4 ;所述極性溶劑與非極性溶劑質量比為1:0.5-2 ； (2)配制水相:配制水溶液，水溶液中，聚乙烯醇的質量濃度為0.3%-1.0%、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉的質量濃度為0.05%-0.1%、無機鹽類的質量濃度為8-25%的水溶液；所述無機鹽類中Na2HPO4的質量為0.2%-0.5%，其余為NaCl，NaNO3, CaCl2中的一種或幾種； (3)聚合:取質量為油相2.5-5倍的水相，加熱至40-50°C，加入油相，開啟攪拌，使油相分散為20-60目的油滴，然后以0.5-10C /min的速度升溫至65-67°C，反應4_6h，以0.5-10C /min的速度升溫至75°C -80°C，反應2_4h，以1-2°C /min的速度升溫至90°C，反應3-6h，將珠體濾出； (4)后處理。2.根據(jù)權利要求1所述的一種大孔吸附樹脂的制備方法，其特征在于所述的后處理方法為:用80°C以上的水充分洗滌珠體至洗液清澈，然后將珠體置于樹脂柱中，用95%乙醇淋洗，直至流出液與水以體積比1:1混合不渾濁，60-80°C常壓干燥，即得到成品樹脂。3.根據(jù)權利要求1所 述的一種大孔吸附樹脂的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述極性溶劑為乙酸乙酯，環(huán)己酮，環(huán)己醇中的一種或幾種。4.根據(jù)權利要...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：李彥軍，盧廣明，閆志軍，張全香，劉金猛，王飛，盧照金，李忠正，
申請(專利權)人：河北寶恩生物科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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