具有益生菌特性的脆弱擬桿菌制造技術

本發明專利技術涉及微生物應用技術領域，具體涉及一種具有益生菌特性的脆弱擬桿菌，本發明專利技術是從發育良好的嬰兒糞便中分離純化得到具有益生菌特性的脆弱擬桿菌，實驗證明該脆弱擬桿菌對動物無害，屬于益生菌，可用于制備含有這種微生物的食物或藥品。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及微生物應用
，具體涉及一種具有益生菌特性的脆弱擬桿菌。
技術介紹
益生菌系一種對動物有益的細菌，它們可直接作為食品添加劑服用，以維持腸道菌叢的平衡。當人體住滿足夠的益生菌時，人就會處于健康的狀態，但是一旦體內菌群失去平衡，比如菌種間比例發生大幅變化或者超出正常數值時，那么腹瀉、過敏、胃口不佳、疲倦、免疫力低等一系列病癥就會隨之而來，人體的健康就會亮紅燈，而這時適當添加益生菌，協助體內菌群平衡，才能讓人重現健康狀態。在M生囷中，被廣泛關注的雙歧桿囷和乳Ife囷在攝入后對人和動物具有很好作用的菌株，它們的特定菌株能夠在腸粘膜上定居，在腸道內建群并且防止有害微生物在其上粘附，是能通過保持腸內自然微生物區系促進生物個體健康的可生長的微生物制劑，幫助維持人和動物的健康。文件CN1350460A公開了一種能夠預防腹瀉的乳酸菌菌株；文件CN1420781A公開了一種能夠預防腹瀉的雙歧桿菌。脆弱擬桿菌(Bacteroides fragilis)作為一種革蘭氏染色陰性、桿狀、兩端鈍圓而濃染，有莢膜、無芽胞、無動力的專性厭氧細菌，分產腸毒素型和非產腸毒素型。脆弱擬桿菌作為人及動物腸道正常菌群的一部分，主要存于結腸中，此外，呼吸道、胃腸道及泌尿生殖道粘膜也可定植生長。目前研究較多的是脆弱擬桿菌作為一種條件致病菌，當宿主粘膜受損時，可侵犯粘膜下層，引起感染，也可經血液流動，引起身體其它器官如腸道、腹腔、肝、肺、腦組織化膿性感染并伴發膿腫和引起急慢性腹瀉等。此外，其對結腸、直腸癌的發生也有促進作用。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種具有益生菌特性的脆弱擬桿菌。為了解決上述問題，本專利技術所采用的技術方案是: 提供一種具有益生菌特性的脆弱擬，所述的脆弱擬桿菌保藏單位名稱為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位地址為北京市朝陽區北辰西路I號院3號，保藏日期為2013年3月12日，保藏編號為CGMCC N0.7280，分類命名為fecteroiifesfragilisο該菌株16SrRNA具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列，序列長度為887bp。本專利技術的有益效果是:本專利技術是從發育良好的嬰兒糞便中分離純化得到具有益生菌特性的脆弱擬桿菌，實驗證明分離得到的脆弱擬桿菌對動物無害，屬于益生菌，可用于制備含有這種微生物的食物或藥品。附圖說明圖1為本專利技術的具有益生菌特性的脆弱擬桿菌的實施例1的菌落形態的示意圖。圖2為本專利技術的具有益生菌特性的脆弱擬桿菌的實施例1的顯微鏡下的菌落形態示意圖。圖3為本專利技術的具有益生菌特性的脆弱擬桿菌的實施例1的BLAST序列比對結果圖。具體實施例方式下面通過實施例對本專利技術做進一步詳細說明，這些實施例僅用來說明本專利技術，并不限制本專利技術的范圍。實施例1脆弱擬桿菌CGMCC N0.7280的分離純化 Cl)由嬰兒糞便中分離脆弱擬桿菌CGMCC N0.7280 按“正常菌群檢查法”稱取0.5克大便，置于先裝有4.5ml生理鹽水的試管中，以此連續稀釋成10_卜10_6，由高稀積度向低稀積度滴到Bd培養基平板上，置于厭氧產氣盒中加厭氧產氣袋進行厭氧培養。置37°C，2 7天后開罐檢查。選單一菌落進行純培養、染色鏡檢、培養特性、生理生化檢測。菌落形態如圖1所示。顯微鏡觀察如圖2所示。(2)脆弱擬桿菌CGMCC N0.7280的16SrRNA基因進行序列檢測 所得16SrRNA序列如下: GAGTCGCTACAGCCTTCGATGGATAGGGGTTCTGAGAGGAAGGTCCCCCACATTGGAACTGAGACACGGTCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGAGGAATATTGGTCAATGGGCGCTAGCCTGAACCAGCCAAGTAGCGTGAAGGATGAAGGCTCTATGGGTCGTAAACTTCTTTTATATAAGAATAAAGTGCAGTATGTATACTGTTTTGTATGTATTATATGAATAAGGATCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGATCCGAGCGTTATCCGGATTTATTGGGTTTAAAGGGAGCGTAGGTGGACTGGTAAGTCAGTTGTGAAAGTTTGCGGCTCAACCGTAAAATTGCAGTTGATACTGTCAGTCTTGAGTACAGTAGAGGTGGGCGGAATTCGTGGTGTAGCGGTGAAATGCTTAGATATCACGAAGAACTCCGATTGCGAAGGCAGCTCACTGGACTGCAACTGACACTGATGCTCGAAAGTGTGGGTATCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACACAGTAAACGATGAATACTCGCTGTTTGCGATATACAGTAAGCGGCCAAGCGAAAGCATTAAGTATTCCACCTGGGGAGTACGCCGGCAACGGTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGAGGAACATGTGGTTTAATTCGATGATACGCGAGGAACCTTACCCGGGCTTAAATTGCAGTGGAATGATGTGGAAACATGTCAGTGAGCAATCACCGCTGTGAAGGTGCTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGCCGTGAGGTGTCGGCTTAAGTGCCATAACGAGCGCAACCCTTATCTTTAGTTACTAACAGTTATGCTGAGGACTCTAGAGAGCTG (SEQ ID NO:1)。(4)進行BLAST序列比對 結果如圖3所不。(5)脆弱擬桿菌CGMCC N0.7280的增菌培養及菌液制備 選取純化后的單個菌落接種于改良的胰蛋白胨肉湯中進行增菌培養，所得菌液離心沉淀，轉速3000r/min,離心15min,去上清,沉淀物用生理鹽水洗漆后,沉淀物用生理鹽水稀釋，用麥氏比濁管做菌數測定，稀釋至IO8 cfu /ml, IO9 cfu /ml, IO10 cfu /ml，保存備用。實施例2脆弱擬桿菌毒力實驗 采用實施例1制備的脆弱擬桿菌菌液進行以下實驗: (O小鼠急性毒力實驗取體重22±2克C57BR/C小鼠(雌雄各半)60只，分成高劑量組、低劑量組和對照組，各組20只。高劑量組每只小鼠每天灌胃IO12 cfu /ml菌液0.5ml，低劑量組每天灌胃IO9 cfu/ml菌液0.5ml，對照組每天灌胃0.5ml生理鹽水。連續觀察14天。實驗結果:小鼠正常生長，未見死亡，LD50測不出。(2)大鼠毒力實驗 取150±20克SD大鼠30只(雌雄各半)，分為3組:高低劑量組和對照組。高劑量組每只大鼠每天灌胃1012cfu/ml菌液2ml,低劑量組每天灌胃109cfu/ml菌液2ml,對照組每天灌胃2ml生理鹽水。連續觀察14天，14天后抽靜脈血測血象、肝腎功。取胃腸肝脾組織做病理切片電鏡觀察。實驗結果:均未見明顯異常。(3)恒河猴毒力實驗 取恒河猴10只(雌雄各半)，分為2組:高低劑量組和對照組。高劑量組每只恒河猴每天口服1012cfu/ml菌液100ml,低劑量組每天口服109cfu/ml菌液1本文檔來自技高網...

【技術保護點】
具有益生菌特性的脆弱擬桿菌，其特征在于：所述脆弱擬桿菌保藏編號為CGMCC?NO.7280。

【技術特征摘要】
1.具有益生菌特性的脆弱擬桿菌，其特征在于:所述脆弱擬桿菌保藏編號為CGMCCN0.7280。2.如權利要求1所述的具有益...

【專利技術屬性】
技術研發人員：智發朝，白楊，劉洋洋，
申請(專利權)人：廣州知光生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：