本發明專利技術公開了一種干酪乳桿菌Lactobacillus?casei?strain?Qian(CCTCC?No.M2013514)工作發酵劑制品及其腸道調節食療用途，該干酪乳桿菌工作發酵劑制品及其下游產品耐酸性較強，在pH3.0的人工胃液下處理3h后存活率達到了62.51±7.35％，在1.0％濃度膽鹽下可以緩慢生長，生長效率達到無膽鹽培養的7.86±0.45％，Lactobacillus?casei?strain?Qian細胞的疏水性也達到了51.30±4.28％，在人的腸道內正常生長；能夠減緩便秘引起的小鼠體重減輕趨勢，加快排黑便時間，提高小腸推進率，調低小鼠的TRPV1,NOS的基因表達水平，降低排便量、排便顆粒數和糞便含水量下降的趨勢，與便秘藥物起到相似的作用，表現出一定的便秘預防效果。
【技術實現步驟摘要】
干酪乳桿菌LactobacilluscaseistrainQian工作發酵劑制品及其腸道調節食療用途
本專利技術涉及微生物
，尤其涉及一種可調節腸道運動、預防便秘的干酪乳桿菌LactobacilluscaseistrainQian及其用途。
技術介紹
乳酸菌(lacticacidbacteria，LAB)是一類能利用可發酵碳水化合物產生大量乳酸的細菌的通稱。這類細菌在自然界分布極為廣泛，具有豐富的物種多樣性。乳酸菌不僅可以提高食品的營養價值，改善食品風味，提高食品保藏性和附加值。除極少數外，其中絕大部分都是人體內必不可少的且具有重要生理功能的菌群，其廣泛存在于人體的腸道中。大量研究表明，乳酸菌能夠調節機體胃腸道正常菌群、保持微生態平衡，提高食物消化率。乳酸菌也是益生菌株的主要來源，目前發現了如干酪乳桿菌、植物乳桿菌、雙歧桿菌屬等益生菌菌株具有多種保健功能。如降低血清膽固醇，控制內毒素，抑制腸道內腐敗菌生長繁殖和腐敗產物的產生，制造營養物質，刺激組織發育等。便秘是非常普遍的一種疾病，在人群中的患病率高達27％，它可以影響各年齡段的人。習慣性便秘因用力增加腹壓，屏氣使勁排便，是誘發中老年男性高血脂、心腦血管疾病、動脈硬化、腫瘤等疾病及其并發癥的罪魁禍首，從而導致老人心腦血管病變死亡率急劇增加，出現痔瘡、肛裂等問題，令人痛苦不堪。因便秘發病率高、病因復雜，患者常有許多苦惱，便秘嚴重時會影響生活質量。因此，尋找一種能夠代替藥物來預防便秘的生物制品有很大的現實意義，微生態療法恰是以一個嶄新的手段解決了傳統療法存在的多種問題。國內外對乳酸菌的生理功能有大量的研究報道，但對乳酸菌預防便秘的功能性研究報道很少。關于乳酸菌預防便秘的研究對食品科學、預防醫學和微生態學等許多學科都有很大價值。發酵乳制品是人們攝入乳酸菌的一條重要渠道，篩選優良的具有預防便秘和安全的乳酸菌菌株，對于開發功能性乳制品、豐富現有乳制品種類、提高乳品的附加值將具有重要意義。因此，具有預防便秘的乳酸菌具很大的研究和應用價值。在目前已經公開的文獻與專利或專利申請中，例如CN1796540A公開了具有抗腸道致病菌和抗氧化特性的雙歧桿菌及其用途，用于制備食品組合物或藥物組合物，殺死或抑制幽門螺旋桿菌或大腸桿菌，治療由其引起的各種疾病。CN101144064A公開了一種具有抗致突變活性、產胞外多糖的短乳桿菌及其用途，用于發酵食品中以改善食品品質，增加其營養學功能。CN101144065A公開了一種耐過氧化氫、清除自由基的抗氧化干酪乳桿菌及其用途，用于發酵食品及乳品膠囊制品中以開發功能性乳制品、豐富現有乳制品種類、提高乳品的附加值。CN102174450A公開了一種抗幽門螺桿菌感染的植物乳桿菌及其用途，用于制備藥物組合物、發酵劑、動物飼料添加劑和保健品中來預防或減輕幽門螺桿菌的感染。但是，這些專利或專利申請沒有完全涉及具有調節腸道運動、預防便秘等性能的微生物。因此，目前還需要有一種具有調節腸道運動、預防便秘的微生物及其含有它們的食品。
技術實現思路
為了解決上述問題，本專利技術提供了一種可調節腸道運動、預防便秘的干酪乳桿菌及其用途，主要提供一種可調節腸道運動、預防便秘的干酪乳桿菌菌株和提供一種所述干酪乳桿菌在發酵食品中的用途。從自然發酵牦牛酸乳中篩選出一株干酪乳桿菌(LactobacilluscaseistrainQian)，利用形態特征、培養性狀和生理生化特征等微生物學特性對該乳酸桿菌(LactobacilluscaseistrainQian)鑒定為干酪乳桿菌，該菌株已于2013年10月25日保藏于中國典型培養物保藏中心(中國.武漢.武漢大學)，保藏編號CCTCCNO:M2013514。所述干酪乳桿菌的形態學特征具體為：菌體特征：呈革蘭氏染色陽性，細胞桿狀，菌體約0.5-1.0μm寬，2.5-4μm長，成單、成對或者成鏈，不形成芽孢，兩端圓形。菌落特征：在MRS培養基上形成明顯的菌落，直徑在0.5-2.0mm之間，圓形，邊緣整齊，乳白色，透明，表面濕潤光滑，不產生色素。所述干酪乳桿菌體內耐受特征為：干酪乳桿菌的菌株耐酸性較強，在pH3.0的人工胃液下處理3h后存活率達到了62.51±7.35％，在1.0％濃度膽鹽下可以緩慢生長，生長效率達到無膽鹽培養的7.86±0.45％，LactobacilluscaseistrainQian細胞的疏水性也達到了51.30±4.28％，在人的腸道內正常生長。所述干酪乳桿菌來源于傳統發酵食品，屬公認安全(GenerallyRecognizedAsSafe,GRAS)菌種。本專利技術目的的實現手段為：一種干酪乳桿菌LactobacilluscaseistrainQian工作發酵劑制品，中國典型培養物保藏中心保藏編號CCTCCNO:M2013514，采用如下的步驟制得目標物：1)將上述干酪乳桿菌(LactobacilluscaseistrainQian)原始菌種接種于MRS液體培養基中，在37℃條件下培養12-16h進行活化，連續活化兩代，然后將活化培養物按2-4％(體積)接種于MRS培養基中，培養16-18h，在4℃條件下4000r/min離心15min，去除上清夜，得到細胞沉淀，將沉淀用一定量的無菌脫脂乳制成懸浮液，得到工作發酵劑；2)由1)所得目標工作發酵劑直接添加到食品中或者與可共生的制備發酵乳的商業發酵劑一起使用制備發酵乳。所述商業發酵劑為保加利亞乳桿菌或嗜熱鏈球菌。本專利技術的另一目的是提供一種干酪乳桿菌工作發酵劑制品腸道調節預防便秘食療用途。采用的具體手段為：一種干酪乳桿菌工作發酵劑制品腸道調節預防便秘食療用途，作為發酵劑添加到食品中添加或者與可共生的制備發酵乳的商業發酵劑一起使用制備發酵乳，以獲得調節腸道運動預防便秘保健作用，最佳使用劑量1.0×109CFU每公斤體重。所述干酪乳桿菌工作發酵劑制品腸道調節預防便秘食療用途，所述食品包括人類食品、動物飼料或保健品。所述食用對象包括人類和養殖動物，方法添加在日常食品中使食用對象獲得調節腸道運動預防便秘的保健作用。所述發酵食品為含有干酪乳桿菌的乳酸菌奶飲料、乳粉、膠囊制品或發酵乳中的一種或多種。所述含有干酪乳桿菌的乳酸菌奶飲料是按照下述步驟制備得到的：所述干酪乳桿菌的原始菌種在溫度-75℃下以30％(重量)甘油懸液形式保存，或者在溫度4℃下以冷凍干燥菌粉的形式保存備用；利用所述干酪乳桿菌的原始菌種制備干酪乳桿菌工作發酵劑；原料乳在95℃下加熱殺菌20min或在140℃下高溫熱殺菌2s，冷卻到4℃，加入所述干酪乳桿菌工作發酵劑，使其濃度達到106cfu/mL以上，在4℃冷藏保存。所述含有干酪乳桿菌的乳粉是按照下述步驟制備得到的：所述干酪乳桿菌的原始菌種在溫度-75℃下以30％(重量)甘油懸液形式保存，或者在溫度4℃下以冷凍干燥菌粉的形式保存備用；利用所述干酪乳桿菌的原始菌種制備干酪乳桿菌工作發酵劑，原料乳在95℃下加熱殺菌20min或在140℃下高溫熱殺菌2s，然后冷卻到37℃，再以原料乳體積的4％接菌量接種所述的干酪乳桿菌工作發酵劑，37℃下發酵16h，得到干酪乳桿菌發酵乳；所述干酪乳桿菌發酵乳和滅菌后的原料乳按照1:3(V:V)配比加入，進行均質，真空濃縮、噴霧干燥得本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種干酪乳桿菌Lactobacillus?casei?strain?Qian工作發酵劑制品，中國典型培養物保藏中心保藏編號CCTCC?NO:M2013514，采用如下的步驟制得目標物：1)將上述干酪乳桿菌(Lactobacillus?casei?strain?Qian)原始菌種接種于MRS液體培養基中，在37℃條件下培養12?16h進行活化，連續活化兩代，然后將活化培養物按2?4％(體積)接種于MRS培養基中，培養16?18h，在4℃條件下4000r/min離心15min，去除上清夜，得到細胞沉淀，將沉淀用一定量的無菌脫脂乳制成懸浮液，得到工作發酵劑；2)由1)所得目標工作發酵劑直接添加到食品中或者與可共生的制備發酵乳的商業發酵劑一起使用制備發酵乳品或食品。
【技術特征摘要】
1.一種干酪乳桿菌LactobacilluscaseistrainQian工作發酵劑制品，中國典型培養物保藏中心保藏編號CCTCCNO:M2013514，采用如下的步驟制得目標物：1)將上述干酪乳桿菌LactobacilluscaseistrainQian原始菌種接種于MRS液體培養基中，在37℃條件下培養12-16h進行活化，連續活化兩代，然后將活化培養物按2-4％體積百分比接種于MRS培養基中，培養16-18h，在4℃條件下4000r/min離...
【專利技術屬性】
技術研發人員：索化夷，李鍵，趙欣，騫宇，陳煉紅，蘭道亮，
申請(專利權)人：西南大學，
類型：發明
國別省市：重慶;85
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