本發明專利技術公開了辛基葡聚糖微球及其制備方法和蛋白吸附應用，采用葡聚糖微球為主體，利用辛基縮水甘油醚和葡聚糖微球反應，以實現辛基對葡聚糖微球上官能團的改性，以辛基葡聚糖多孔微球作為包覆載體，利用多孔微球的吸附作用吸附蛋白，其蛋白吸附量為32.5～110.1mg/g。本發明專利技術制備多孔微球所需成本較低，且微球制備工藝簡單，容易操作，所得微球的蛋白吸附量大，具有良好的蛋白吸附性能。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及醫藥
，更加具體地說，涉及一種吸附蛋白的微球及其制備方 法，特別是一種具有親水性、生物相容性和可生物降解性高分子材料吸附牛血清白蛋白 (BSA)微球及其制備方法。
技術介紹
蛋白質的吸附一般在液固界面上進行，蛋白質與吸附介質間的相互作用是實現吸 附與分離的依據，主要分為以下三類：物理吸附、化學吸附以及離子交換。其中物理吸附的 原理是基于范德華力，即吸附劑與溶質之間的分子間力，溶質在吸附劑上吸附與否以及吸 附量的多少，主要取決于吸附劑與溶質之間極性的相似性以及溶劑的極性。一般而言，物理 吸附發生在吸附劑的整個表面，被吸附的溶質可通過改變溶劑的pH值以及鹽濃度等物理 條件洗脫。物理吸附通常較溫和，因而能用于蛋白質等生物物質的分離純化。本文所合成 的葡聚糖微球對蛋白質的吸附主要通過物理吸附實現的。 吸附平衡行為是評價吸附劑性能的重要指標。常見的用于描述吸附行為的吸附 模型主要有Langmuir型、Henry型、Freundlich型和Toth型等。當液固兩相間蛋白質分 子分配達到平衡，流動相中蛋白質平衡濃度很低時，溶質分配系數可近似看作一個常數， Langmuir模型常被用來描述這種吸附平衡。該模型建立在Langmuir單分子層吸附的理論 基礎上，其要點是：吸附劑上具有活性點，每個活性點僅能吸附一個分子，而被吸附的分子 間無相互作用。其方程如下：【主權項】1. 辛基葡聚糖微球，其特征在于，利用辛基縮水甘油醚和葡聚糖微球反應，以實現辛基 對葡聚糖微球上官能團的改性，按照下述步驟進行： 步驟1，將葡聚糖溶于去離子水中作為水相，將環氧氯丙烷和司班溶于液體石蠟中作為 油相；加熱至70°C時，將水相加入油相中攪拌均勻，然后加入氫氧化鈉水溶液，反應2小時 后升溫至90°C，固化5小時后停止反應，將所得產物過濾，洗漆，真空抽濾，其中葡聚糖使用 量為5質量份，葡聚糖使用量為3質量份，環氧氯丙烷使用量為5-6質量份，水相和油相的 體積比為1 :5 ; 步驟2,將步驟1制備的葡聚糖微球和辛基縮水甘油醚混合，在堿性條件pH為10 -12， 溫度為60~80°C下反應4~9h制備辛基葡聚糖微球，葡聚糖使用量為1一3質量份，辛基 縮水甘油醚使用量為葡聚糖微球質量的5%~17. 5%; 步驟3,將步驟2制備的辛基葡聚糖微球浸泡在環己烷中，通過辛基和環己烷的相互作 用以及環己烷的揮發，制備辛基葡聚糖多孔微球。2. 根據權利要求1所述的辛基葡聚糖微球，其特征在于，在所述步驟1中，將5g葡聚糖 溶于IOml去離子水中攪拌至透明作為水相；5ml環氧氯丙烷和3g司班80溶解于50ml液 體石蠟中作為油相；水浴加熱至70°C時，將油相加入到三口瓶中進行攪拌，然后加入水相 進一步攪拌均勻；加入質量分數50%的NaOH溶液3ml，反應2小時后升溫至90°C，固化5小 時后停止反應；將所得產物過濾，洗滌，真空抽濾。3. 根據權利要求1所述的辛基葡聚糖微球，其特征在于，在所述步驟2中，所述辛基縮 水甘油醚使用量為葡聚糖微球質量的10 -15%，使用Imol/mL氫氧化鈉水溶液4mL為體系 提供喊性條件。4. 根據權利要求1所述的辛基葡聚糖微球，其特征在于，在所述步驟3中，將步驟2制 備的辛基葡聚糖微球浸泡在10~30ml有機溶劑環己烷中，通過辛基和有機溶劑的相互作 用以及溶劑的揮發，制備辛基葡聚糖多孔微球。5. 辛基葡聚糖微球的制備方法，其特征在于，按照下述步驟進行： 步驟1，將葡聚糖溶于去離子水中作為水相，將環氧氯丙烷和司班溶于液體石蠟中作為 油相；加熱至70°C時，將水相加入油相中攪拌均勻，然后加入氫氧化鈉水溶液，反應2小時 后升溫至90°C，固化5小時后停止反應，將所得產物過濾，洗漆，真空抽濾，其中葡聚糖使用 量為5質量份，葡聚糖使用量為3質量份，環氧氯丙烷使用量為5-6質量份，水相和油相的 體積比為1 :5 ; 步驟2,將步驟1制備的葡聚糖微球和辛基縮水甘油醚混合，在堿性條件pH為10 -12， 溫度為60~80°C下反應4~9h制備辛基葡聚糖微球，葡聚糖使用量為1一3質量份，辛基 縮水甘油醚使用量為葡聚糖微球質量的5%~17. 5% ; 步驟3,將步驟2制備的辛基葡聚糖微球浸泡在環己烷中，通過辛基和環己烷的相互作 用以及環己烷的揮發，制備辛基葡聚糖多孔微球。6. 根據權利要求5所述的辛基葡聚糖微球的制備方法，其特征在于，在所述步驟1中， 將5g葡聚糖溶于IOml去離子水中攪拌至透明作為水相；5ml環氧氯丙烷和3g司班80溶解 于50ml液體石蠟中作為油相；水浴加熱至70°C時，將油相加入到三口瓶中進行攪拌，然后 加入水相進一步攪拌均勻；加入質量分數50%的NaOH溶液3ml，反應2小時后升溫至90°C， 固化5小時后停止反應；將所得產物過濾，洗滌，真空抽濾。7. 根據權利要求5所述的辛基葡聚糖微球的制備方法，其特征在于，在所述步驟2中， 所述辛基縮水甘油醚使用量為葡聚糖微球質量的10 -15 %，使用Imol/mL氫氧化鈉水溶液 4mL為體系提供堿性條件。8. 根據權利要求5所述的辛基葡聚糖微球的制備方法，其特征在于，在所述步驟3中， 將步驟2制備的辛基葡聚糖微球浸泡在10~30ml有機溶劑環己烷中，通過辛基和有機溶 劑的相互作用以及溶劑的揮發，制備辛基葡聚糖多孔微球。9. 如權利要求1一4之一所述的辛基葡聚糖微球在吸附蛋白質領域的應用。10. 根據權利要求9所述的應用，其特征在于，所述蛋白質為牛血清白蛋白。【專利摘要】本專利技術公開了，采用葡聚糖微球為主體，利用辛基縮水甘油醚和葡聚糖微球反應，以實現辛基對葡聚糖微球上官能團的改性，以辛基葡聚糖多孔微球作為包覆載體，利用多孔微球的吸附作用吸附蛋白，其蛋白吸附量為32.5～110.1mg/g。本專利技術制備多孔微球所需成本較低，且微球制備工藝簡單，容易操作，所得微球的蛋白吸附量大，具有良好的蛋白吸附性能。【IPC分類】B01J20-28, G01N21-33, B01J20-22, B01J20-30【公開號】CN104759255【申請號】CN201410008360【專利技術人】侯信, 王艷榮 【申請人】天津大學【公開日】2015年7月8日【申請日】2014年1月2日本文檔來自技高網...
【技術保護點】
辛基葡聚糖微球，其特征在于，利用辛基縮水甘油醚和葡聚糖微球反應，以實現辛基對葡聚糖微球上官能團的改性，按照下述步驟進行：步驟1，將葡聚糖溶于去離子水中作為水相，將環氧氯丙烷和司班溶于液體石蠟中作為油相；加熱至70℃時，將水相加入油相中攪拌均勻，然后加入氫氧化鈉水溶液，反應2小時后升溫至90℃，固化5小時后停止反應，將所得產物過濾，洗滌，真空抽濾，其中葡聚糖使用量為5質量份，葡聚糖使用量為3質量份，環氧氯丙烷使用量為5—6質量份，水相和油相的體積比為1：5；步驟2，將步驟1制備的葡聚糖微球和辛基縮水甘油醚混合，在堿性條件pH為10—12，溫度為60～80℃下反應4～9h制備辛基葡聚糖微球，葡聚糖使用量為1—3質量份，辛基縮水甘油醚使用量為葡聚糖微球質量的5%～17.5%；步驟3，將步驟2制備的辛基葡聚糖微球浸泡在環己烷中，通過辛基和環己烷的相互作用以及環己烷的揮發，制備辛基葡聚糖多孔微球。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：侯信，王艷榮，
申請(專利權)人：天津大學，
類型：發明
國別省市：天津;12
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