一種石蠟制片粘片劑配方及其制備方法組成比例

本發明專利技術公開了一種石蠟制片粘片劑配方及其制備方法，該配方為每100mL含有以下組成成分：糯米粉乳液3～5mL、雞蛋清1～3mL、明膠0.4～0.6g，余量為蒸餾水。本發明專利技術還公開了一種石蠟制片粘片劑配方的制備方法，本發明專利技術技術方案目的明確，效果可靠，制備過程通俗易懂，便于操作，可作為動植物材料石蠟制片顯微觀察時的備選粘片劑，適合推廣應用。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于制片
，涉及一種石蠟制片粘片劑配方及其制備方法。
技術介紹
制片技術是生物顯微觀察技術的一個重要組成部分，而石蠟制片技術又是生物制片技術中應用最為普遍的一種，它適合于絕大部分生物材料的光學顯微鏡觀察，對硬件要求較低，實驗成本也很低，是各層次研究人員比較鐘愛的一種顯微觀察手段。粘片劑是石蠟制片技術中的一個重要環節，脫片現象是石蠟制片中極為常見的一種情況，很多時候因為脫片而導致整個制片過程失敗，既浪費了大量試劑，也消耗了寶貴的時間；當實驗材料比較稀有和珍貴時，因粘片劑不良而導致的制片失敗，更會造成無法挽回的損失和遺憾。石蠟制片技術中最為常用的粘片劑主要有火棉膠粘片劑、明膠粘片劑和蛋白粘片劑，但他們存在的最突出的共性問題是脫片率較高，實驗失敗率也隨之增高，尤其是對于技術不嫻熟的操作者來說，脫片始終是一個頗令人煩惱的問題。所以，探索適用性更廣、效果能夠得到更好保障的粘片劑新配方及其制備方法，對豐富和完善生物制片技術具有積極的意義，實際推廣應用前景廣闊。目前，各類文獻記載的石蠟切片制片過程中用到的粘片劑有三種，即火棉膠粘片劑、明膠粘片劑和蛋白粘片劑，其配方如下：火棉膠粘片劑：火棉膠1～2g溶解在純酒精和乙醚各半的混合液中即成。明膠粘片劑：溶液甲(明膠1g+100mL蒸餾水+石炭酸2g+甘油15mL)，溶液乙(40％甲醛4mL+100mL蒸餾水)，使用時先滴加溶液甲，再滴加溶液乙。蛋白粘片劑：雞蛋清25mL+甘油25mL+石炭酸0.5g。以上三種傳統的火棉膠粘片劑、明膠粘片劑和蛋白粘片劑在石蠟制片中都有應用，但存在的問題也較為突出，這些不足集中體現在：(1)三種粘片劑的脫片率均比較高，應用效果難以把握；(2)明膠粘片劑涉及試劑較多，而且使用步驟較為繁瑣；(3)三種粘片劑均涉及毒性較強的化學試劑，如石炭酸、乙醚，對長時間操作制片人員存在潛在的人身危害；(4)三種粘片劑通用性比較欠缺，如火棉膠粘片劑更加適合大型材料和切片較厚的材料，對小型或要求切片較薄時使用效果較差；蛋白粘片劑更加適合動物材料等。
技術實現思路
本專利技術的目的在于克服現有技術中存在的缺陷，提供一種石蠟制片粘片劑配方及其制備方法，達到以下目的：(1)提高石蠟制片過程中粘片劑的廣譜性；(2)提高粘片劑使用效果，改善石蠟制片過程中傳統粘片劑黏固不牢固、易于脫落的問題；(3)提高石蠟制片的成功率。其具體技術方案為：一種石蠟制片粘片劑配方，每100mL含有以下組成成分：糯米粉乳液3～5mL、雞蛋清1～3mL、明膠0.4～0.6g，余量為蒸餾水。優選地，每100mL含有以下組成成分：糯米粉乳液4mL、雞蛋清2mL、明膠0.5g，余量為蒸餾水。一種本專利技術所述的石蠟制片粘片劑配方的制備方法，包括以下步驟：步驟1.糯米粉乳液的制備：稱取糯米粉3g，于烘箱中130℃干熱1h，放入10mL離心管中，加7mL蒸餾水，在渦旋振蕩器震蕩10min后，2000r/min離心2min，上清液即為糯米粉乳液；步驟2.粘片劑混合液的制備過程：①稱取明膠0.4～0.6g，放入燒杯，加入蒸餾水70mL，置于36℃烘箱至明膠完全溶解，再冷卻至室溫，備用；②吸取1～3mL雞蛋清加入10mL離心管，在渦旋振蕩器震蕩10min，靜置10min后加入步驟①的冷卻至室溫的明膠液；再加入步驟1所述的糯米粉乳液3～5mL，室溫下混合均勻，用5層紗布過濾，將濾液用蒸餾水定容至100mL，即制得的片劑，粘片劑于4℃保存備用。與現有技術相比，本專利技術的有益效果為：本專利技術通過不斷的探索、優化，摸索出了一種新型粘片劑配方及其制備技術，豐富了石蠟制片技術途徑，在石蠟制片、微生物形態觀察中具有很強的實用性。1.在本專利技術技術方案中，將糯米粉乳液引入粘片劑配方中，是基于糯米粉的主要成分是支鏈淀粉、蛋白質和少量脂肪，當糯米粉干熱糊化后，分子之間的相互作用力增加，可促進淀粉成分和蛋白成分的結合，形成新的更加復雜的網絡結構，其結構也更加致密，且膠凝性和穩定性均有較大提高，更加符合粘片劑對成分特征的要求。2.本專利技術粘片劑配方中的雞蛋清含有0.3％的纖維狀粘蛋白，這是作為粘片劑成分之一的本質原因。但要充分發揮蛋清的效果，要對蛋清進行充分的震蕩處理，以使纖維狀蛋白分散均勻。3.明膠是膠原變性產物，是一種熱可逆性混合物，其沒有固定的結構，分子量分布在幾萬到幾十萬，具有較好的持水性、成膜性特征，這些特征有利于對不同切片材料進行物理黏附和和固定。但使用濃度要準確把握，濃度不宜過高，否則會掩填切片材料，降低觀察效果；另外，當濃度過高時，涂抹到載玻片上后會形成較厚的凝固層，反而會造成更加嚴重的脫片現象。明膠融化時，溫度以不超過38℃為宜，因為較高的溫度會使明膠分子均一化，不利于對不同切片材料的黏附。4.糯米粉乳液、雞蛋清和明膠三者混合過程中，要在室溫條件下進行，因為較高溫度下，雞蛋清比較容易形成絮狀沉淀，降低粘片效果。5.糯米粉乳液、雞蛋清和明膠混合使用，為生物切片材料提供了更加豐富的物理黏附背景，可大大降低石蠟制片時脫片情況的發生，進而提高生物材料顯微觀察實驗的成功率。具體使用時也可根據實驗材料的大小、細胞組成特征等情況適當調整成分用量，以達到最佳的使用效果。總之，本專利技術技術方案目的明確，效果可靠，制備過程通俗易懂，便于操作，可作為動植物材料石蠟制片顯微觀察時的備選粘片劑，適合推廣應用。附圖說明圖1為使用本專利技術粘片劑獲得的石蠟制片觀察效果示例，其中A.棉花根橫切面；B.棉花莖橫切面；C.棉花葉橫切面；D.昆蟲復眼縱切面。具體實施方式下面結合具體實施例對本專利技術的技術方案作進一步詳細地說明。實施例1一種石蠟制片粘片劑配方，每100mL含有以下組成成分：糯米粉乳液3mL、雞蛋清1mL、明膠0.4g，余量為蒸餾水。一種本專利技術所述的石蠟制片粘片劑配方的制備方法，包括以下步驟：步驟1.糯米粉乳液的制備：稱取糯米粉3g，于烘箱中130℃干熱1h，放入10mL離心管中，加7mL蒸餾水，在渦旋振蕩器震蕩10min后，2000r/min離心2min，上清液即為糯米粉乳液；步驟2.粘片劑混合液的制備過程：①稱取明膠0.4g，放入燒杯，加入蒸餾水70mL，置于36℃烘箱至明膠完全溶解，再冷卻至室溫，備用；②吸取1mL雞蛋清加入10mL離心管，在渦旋振蕩器震蕩10min，靜置10min后加入步驟①的冷卻至室溫的明膠液；再加入步驟1所述的3mL糯米粉乳液，室溫下混合均本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種石蠟制片粘片劑配方，其特征在于，每100mL含有以下組成成分：糯米粉乳液3～5mL、雞蛋清1～3mL、明膠0.4～0.6g，余量為蒸餾水。

【技術特征摘要】
1.一種石蠟制片粘片劑配方，其特征在于，每100mL含有以下組成成分：糯米粉乳液
3～5mL、雞蛋清1～3mL、明膠0.4～0.6g，余量為蒸餾水。
2.根據權利要求1所述的石蠟制片粘片劑配方，其特征在于，每100mL含有以下組成
成分：糯米粉乳液4mL、雞蛋清2mL、明膠0.5g，余量為蒸餾水。
3.一種權利要求1所述的石蠟制片粘片劑配方的制備方法，其特征在于，包括以下步
驟：
步驟1.糯米粉乳液的制備：稱取糯米粉3g，于烘箱中130℃干熱1h，放入10mL離心
管中，加7mL蒸餾水，在渦旋...

【專利技術屬性】
技術研發人員：孫會忠，宋月芹，王小東，侯小改，
申請(專利權)人：河南科技大學，
類型：發明
國別省市：河南;41