富硒蟲草菌及其培養方法、富硒黃酒及其制備方法技術

本發明專利技術提供了一種富硒蟲草菌的培養方法，是在蟲草菌發酵培養過程采用兩次加入無機硒的方式進行蟲草菌的富硒培養，通過限定兩次加入無機硒的時間和加入量，解決了無機硒的毒性對富硒量的限制瓶頸，顯著提高蟲草菌的富硒量，以獲得富含有機硒的蟲草菌。另外，本發明專利技術還提供了一種富硒黃酒的制備方法，將富含有機硒的蟲草菌與大棗、枸杞復配成復合蟲草菌營養液，再與熟黍米混合，通過傳統的黃酒釀造工藝，釀造出一款色澤呈橙黃色、清亮透明、有光澤，且香氣協調的富硒蟲草保健酒，獲得的酒體豐滿協調、醇和爽口，具有黃酒和蟲草菌的典型香氣，同時兼具了蟲草菌和有機硒的營養、功效，是一款具有保健功能的新型富硒黃酒。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及富硒
，特別涉及一種富硒蟲草菌，以及該富硒蟲草菌的培養方法，同時，還涉及由該富硒蟲草菌制得的富硒黃酒及制備方法。
技術介紹
硒(Se)是人和動物生命活動所必需的微量元素之一，多存在于人體的肝、腎、胰、心、脾、牙釉質和指甲中，硒在自然界中以無機硒和有機硒兩種形式存在，無機硒毒性較大，對動植物及微生物細胞有一定的毒害作用，因此通常在食物中補充的硒以有機硒形式存在，目前，有機硒多是利用生物轉化的方法獲得。冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)，又名中華蟲草，主產于四川、西藏、云南等海拔在4000～5000米的高山草甸土中。現代藥理學研究結果證實，青海冬蟲夏草中含有蟲草酸約7％，碳水化合物約28.9％，脂肪約8.4％，蛋白質約25％，脂肪中82.2％為不飽和脂肪酸，此外還含有蟲草多糖、多種氨基酸、核苷及多種堿基、麥角甾醇及其氧化物、甘露醇、硬脂酸、揮發油以及多種礦物質元素。蟲草性甘溫平，是著名的滋補強壯藥，適用于治療肺氣虛和肺腎兩虛、改善心肌缺血、擴張支氣管、祛痰平喘，另外對中樞神經系統能起鎮靜、抗驚厥、降溫作用，是一味不可多得的珍貴藥材。然而，由于蟲草藥源緊張，價格昂貴，遠不能滿足國內外市場的需要，近年來，人們采用以天然蟲草真菌發酵法獲得人工蟲草菌，并研究證明，人工蟲草菌與天然冬蟲夏草具有相似的化學成分、藥理作用和臨床療效，且毒性比天然者小，因此蟲草菌及相關產品得到不斷發展，如蟲草菌發酵制劑、蟲草菌發酵酒等。利用蟲草菌發酵液進行硒的生物轉化、富集獲得富硒蟲草菌，對于開發蟲草功能性食品、藥品具有重要意義，但由于無機硒的毒性，在蟲草菌發酵培養過程，無機硒的加量會受到限制，無機硒量超出則會對菌絲體產生抑制或毒害作用，使菌絲生長緩慢或停止，因此限制了菌絲體中有機硒的含量，影響硒的功能性發揮。
技術實現思路
為解決現有技術中存在的不足，本專利技術提供了一種富硒蟲草菌的培養方法，可以顯著提高無機硒的加入量，以獲得高有機硒含量的富硒蟲草菌。為實現上述目的，本專利技術的富硒蟲草菌的培養方法，是在蟲草菌的發酵培養過程采用兩次加入無機硒的方式進行富硒培養，第一次加入無機硒的時間為蟲草菌進入對數生長期初期，加入量為140～150μg/mL；第二次加入無機硒的時間為蟲草菌處于對數生長期旺盛期，加入量為50～60μg/mL。本專利技術通過將無機硒加入到蟲草菌的深層液態發酵培養基中，利用蟲草菌的高效生物轉化作用對微量元素硒進行富集，以獲得富含有機硒的蟲草菌。根據蟲草菌菌絲體在不同生長階段對硒的耐受性能、吸收性能及轉化性能等影響，確定在蟲草菌的發酵培養過程采用兩次加入無機硒的方式進行富硒培養，其中第一次加入無機硒是在蟲草菌進入對數生長期初期，利用此生長階段的蟲草菌菌絲體基本適應了發酵環境，對無機硒具有較強的抗性，以及菌體的富硒能力得到較好馴化的基礎上，加入140～150μg/mL的無機硒，使第一次獲得較大的富硒量，同時避免無機硒過量造成的毒性影響；繼續發酵培養，在蟲草菌菌絲體進入對數生長期旺盛期，菌體生長較快，富硒能力較佳，此時第一次加入的無機硒已基本轉化、消耗完全，可以繼續吸收、轉化無機硒，再加入50～60μg/mL的無機硒，使蟲草菌進一步富硒，大大促進有機硒的生成，從而獲得高有機硒含量的富硒蟲草菌。通過本專利技術的富硒培養方式，可以顯著提高富硒量，解決了無機硒的毒性對富硒量的限制瓶頸，進而提高蟲草菌的功能性。該富硒培養方法中，無機硒的加入時間與加入量是與蟲草菌菌絲體的生長性能相互關聯、相互對應的，從而進行高效富硒。作為對上述方式的限定，所述第一次加入無機硒的時間為發酵培養7～8h，所述第二次加入無機硒的時間為發酵培養48～50h。明確無機硒加入操作對應的發酵時間，確定更優的富硒培養過程。作為對上述方式的限定，所述富硒蟲草菌的培養方法包括以下步驟：a、斜面培養蟲草菌；b、培養蟲草菌種子液；c、將蟲草菌種子液進行發酵培養，發酵進行到7～8h加入無機硒140～150μg/mL，攪拌均勻后繼續發酵培養，進行到48～50h再加入無機硒50～60μg/mL，攪拌均勻后繼續發酵到結束，分離得到富硒蟲草菌的菌絲體。作為對上述方式的限定，所述步驟a中斜面培養基為馬鈴薯瓊脂培養基；所述步驟b中種子培養基包括葡萄糖40g/L，蛋白胨10.0～12.0g/L，磷酸二氫鉀0.5～0.7g/L，硫酸鎂0.5～0.7g/L；所述步驟c中發酵培養基包括葡萄糖53.0～54.0g/L，蛋白胨26.0～27.0g/L，硫酸鎂2.0～3.0g/L，磷酸二氫鉀0.5～0.7g/L；蟲草菌種子液的接種量為每1L發酵培養基接種1.25～1.50mL蟲草菌種子液；所述步驟a、b、c中蟲草菌的培養溫度均為32～35℃。按常規真菌培養方法，對蟲草菌依次進行斜面培養、種子培養和發酵培養，在發酵培養過程中進行富硒，通過兩次加硒培養，顯著提高富硒量。在蟲草菌的培養中，優化各培養階段的培養基組成，利于蟲草菌的生長繁殖、及對硒的生物轉化。富硒蟲草菌菌絲體的分離可通過常規分離手段實現，其中采用離心機分離操作效果較優，以離心轉速3000～5000r/min，離心時間10～15min，重復3次進行分離，得到菌絲體。同時，本專利技術還提供了一種富硒蟲草菌，由如上所述的富硒蟲草菌的培養方法獲得，所述富硒蟲草菌的菌絲體中硒含量為0.150～0.159mg/g。通過本專利技術的培養方法獲得的富硒蟲草菌中硒含量達到0.150～0.159mg/g，相較于常規有機硒含量0.061～0.094mg/g，得到顯著提高。此外，本專利技術還提供了一種富硒黃酒的制備方法，包括以下步驟：(一)、將由如上所述的富硒蟲草菌的培養方法獲得的富硒蟲草菌菌絲體進行細胞壁破碎處理，得到富硒蟲草菌菌漿；(二)、配制復合蟲草菌營養液，所述復合蟲草菌營養液包括以下重量份組分：富硒蟲草菌菌漿5份、枸杞干粉1～2份、大棗干粉2～3份、水1份。(三)、將熟黍米、復合蟲草菌營養液與水混合，接種酒曲，進行糖化發酵，得到富硒黃酒。黃酒(Chinese rice wine)又稱老酒，是以稻米、黍米、玉米、小米、小麥等谷物為主要原料，經蒸煮、加曲、糖化發酵、壓榨、過濾、煎酒、貯存、勾兌而成的釀造酒，釀造中以麥曲或小曲做糖化發酵劑。將本專利技術的富硒蟲草菌，與黃酒相結合，經傳統制作工藝，釀造出一款色澤呈橙黃色、清亮透明、有光澤，且香氣協調的富硒蟲草保健酒，其酒體豐滿協調、醇和爽口，具有黃酒和蟲草菌的典型香氣，同時兼具了蟲草菌抗菌、抑制腫瘤細胞生長、降低血壓、擴張氣管等作用和有機硒的抗腫瘤、提高機體免疫力、具有抗衰老和預防心血管疾病、克山病和骨節病等功效，是一款具有保健功能的新型富硒蟲草黃酒。在富硒蟲草黃酒的釀造過程，將復合蟲草菌營養液與熟黍米混合后進行糖化發酵，一方面利用復合蟲草菌營養液有效掩蓋蟲草菌帶來的特殊味道，另一方面通過加入枸杞、大棗得到的復合蟲草菌營養液可以增加蟲草菌營養與有機硒之間的相須、相配伍的關系，再一方面利用枸杞、大棗還可改善酒的口感和營養價值。由于紅棗味甘性溫、歸脾胃經，有補中益氣、養血安神、緩和藥性的功能，還能提高體內吞噬細胞系統的吞噬功能，有保護肝臟、增強體力的作用；枸杞性平和，味甘甜，有滋補本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種富硒蟲草菌的培養方法，其特征在于：在蟲草菌的發酵培養過程采用兩次加入無機硒的方式進行富硒培養，第一次加入無機硒的時間為蟲草菌進入對數生長期初期，加入量為140～150μg/mL；第二次加入無機硒的時間為蟲草菌處于對數生長期旺盛期，加入量為50～60μg/mL。

【技術特征摘要】
1.一種富硒蟲草菌的培養方法，其特征在于：在蟲草菌的發酵培養過程采用兩次加入無機硒的方式進行富硒培養，第一次加入無機硒的時間為蟲草菌進入對數生長期初期，加入量為140～150μg/mL；第二次加入無機硒的時間為蟲草菌處于對數生長期旺盛期，加入量為50～60μg/mL。2.根據權利要求1所述的富硒蟲草菌的培養方法，其特征在于：所述第一次加入無機硒的時間為發酵培養7～8h，所述第二次加入無機硒的時間為發酵培養48～50h。3.根據權利要求1所述的富硒蟲草菌的培養方法，其特征在于，包括以下步驟：a、斜面培養蟲草菌；b、培養蟲草菌種子液；c、將蟲草菌種子液進行發酵培養，發酵進行到7～8h加入無機硒140～150μg/mL，攪拌均勻后繼續發酵培養，進行到48～50h再加入無機硒50～60μg/mL，攪拌均勻后繼續發酵到結束，分離得到富硒蟲草菌的菌絲體。4.根據權利要求1所述的富硒蟲草菌的培養方法，其特征在于：所述步驟a中斜面培養基為馬鈴薯瓊脂培養基；所述步驟b中種子培養基包括葡萄糖40g/L，蛋白胨10.0～12.0g/L，磷酸二氫鉀0.5～0.7g/L，硫酸鎂0.5～0.7g/L；所述步驟c中發酵培養基包括葡萄糖53.0～54.0g/L，蛋白胨26.0～27.0g/L，硫酸鎂2.0～3.0g/L，磷酸二氫鉀0.5～0.7g/L；蟲草菌種子液的接種量為每1L發酵培養基接種1.25～1.50mL蟲草菌種子液；所述步驟a、b、c中蟲草菌的培養溫度均為32～35℃。5.一種富硒蟲草菌，其特征在于：由權利要求1～4中任一項所述的富硒蟲草菌的培養方法獲得，所述富硒蟲草菌的菌絲體中硒含量為0.150～0.159mg/g。6.一種富硒黃...

【專利技術屬性】
技術研發人員：李艷，周立華，孫凱，牟德華，
申請(專利權)人：河北科技大學，
類型：發明
國別省市：河北;13