一種菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液、測(cè)試瓶及其制備方法、菌數(shù)測(cè)試方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液，組分包括：氯化鈉、硝酸銨、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、酵母膏、水、原油。并進(jìn)一步提供了菌數(shù)測(cè)試瓶及其制備方法，以及采用該菌數(shù)測(cè)試瓶的菌數(shù)測(cè)試方法。本發(fā)明專利技術(shù)能夠快速準(zhǔn)確地測(cè)定樣品中的產(chǎn)表面活性劑菌的菌數(shù)，生長(zhǎng)指示明顯、操作簡(jiǎn)單、可大大提高工作效率，方便判斷，大大降低測(cè)試誤差，提高準(zhǔn)確率。且本發(fā)明專利技術(shù)采用的培養(yǎng)液為產(chǎn)表面活性劑菌專用，測(cè)試工作不會(huì)受其它微生物的干擾，結(jié)果準(zhǔn)確、特異性高，適用于油藏微生物生態(tài)分布分析和微生物采油等工作領(lǐng)域，在油藏水質(zhì)檢測(cè)和微生物采油現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)監(jiān)控等方面具有廣泛的應(yīng)用前景。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)屬于微生物檢測(cè)
，特別是涉及一種菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液、測(cè)試瓶及其制備方法、菌數(shù)測(cè)試方法。
技術(shù)介紹
在科研和生產(chǎn)實(shí)際工作中，常常需要對(duì)微生物的數(shù)量進(jìn)行測(cè)定。如對(duì)水體、空氣、土壤等環(huán)境中的微生物的測(cè)定有利于監(jiān)測(cè)和評(píng)價(jià)其污染程度；對(duì)飲用水中和工業(yè)循環(huán)冷卻水中的微生物的測(cè)定可評(píng)價(jià)其是否達(dá)標(biāo)；對(duì)油田污水注水中微生物數(shù)量的測(cè)定則有助于評(píng)價(jià)污水注水的水質(zhì)；對(duì)油井采出液和微生物采油菌劑中的微生物數(shù)量進(jìn)行測(cè)定有助于分析微生物分布狀況和產(chǎn)品質(zhì)量等。因此，微生物數(shù)量的測(cè)定對(duì)科研和生產(chǎn)實(shí)際工作具有十分重要的指導(dǎo)作用和現(xiàn)實(shí)意義。微生物數(shù)量測(cè)定常用的方法有平板菌落計(jì)數(shù)法和絕跡稀釋法。平板菌落計(jì)數(shù)法是根據(jù)每個(gè)活的微生物能長(zhǎng)出一個(gè)菌落的原理設(shè)計(jì)，取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù)及稀釋倍數(shù)，計(jì)算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)；而絕跡稀釋法是將待測(cè)定的水樣逐級(jí)注入到試管中進(jìn)行接種稀釋，直到最后一個(gè)試管中無(wú)菌生長(zhǎng)為止，然后根據(jù)微生物生長(zhǎng)情況和稀釋倍數(shù)，計(jì)算出水樣中微生物的數(shù)量。這兩種方法都有明顯的不足，平板菌落計(jì)數(shù)法測(cè)定結(jié)果誤差較大，絕跡稀釋法操作極為繁瑣、費(fèi)時(shí)。在微生物采油過(guò)程中產(chǎn)表面活性劑菌是重要的采油功能菌。產(chǎn)表面活性劑菌普遍存在于采油菌劑和油藏環(huán)境中。在微生物采油過(guò)程中，產(chǎn)表面活性劑菌是一群能以原油為碳源產(chǎn)生生物表面活性劑、使原油分散乳化進(jìn)而改善原油流動(dòng)性提高石油采收率的細(xì)菌的統(tǒng)稱。因此，在油藏微生物生態(tài)分布分析、微生物采油菌劑等實(shí)驗(yàn)和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)、產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)控過(guò)程中，常常需對(duì)產(chǎn)表面活性劑菌菌數(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定。目前，國(guó)內(nèi)外普遍采用絕跡稀釋法測(cè)定水體中的產(chǎn)表面活性劑菌菌數(shù)，測(cè)定結(jié)果誤差較大，并繁瑣、費(fèi)時(shí)。因此，傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)存在明顯缺陷，亟待研究開發(fā)產(chǎn)表面活性劑菌檢測(cè)的新方法、新工具。因此，研制用于水體中產(chǎn)表面活性劑菌菌數(shù)的測(cè)試瓶具有重要的實(shí)際意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
有鑒于此，本專利技術(shù)提供了一種菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液、測(cè)試瓶及其制備方法、菌數(shù)測(cè)試方法，使所生產(chǎn)的針對(duì)產(chǎn)表面活性劑菌的菌數(shù)測(cè)試瓶能夠快速準(zhǔn)確地測(cè)定水樣中的產(chǎn)表面活性劑菌菌量，可用于油藏微生物生態(tài)分布分析和微生物采油等工作領(lǐng)域，具有生長(zhǎng)指示明顯、操作簡(jiǎn)單、提高工作效率的特點(diǎn)。本專利技術(shù)第一方面提供了一種菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液，所述培養(yǎng)液組分包括：氯化鈉、硝酸銨、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、酵母膏、水、原油。本專利技術(shù)第二方面提供了一種菌數(shù)測(cè)試瓶，包括上述菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液及瓶體。本專利技術(shù)第三方面提供了上述菌數(shù)測(cè)試瓶的制備方法，其步驟包括：a、配制培養(yǎng)液：以重量百分比計(jì)，氯化鈉0.3-0.6％，硝酸銨0.1-0.3％，磷酸氫二鉀0.05-0.15％，硫酸鎂0.01-0.03％，酵母膏0.03-0.07％，余量為水，再滴加原油至水溶液中，即得培養(yǎng)液；b、將培養(yǎng)液加至瓶體中后密封，110-130℃下滅菌10-20min，即得菌數(shù)測(cè)試瓶。本專利技術(shù)第四方面提供了采用上述菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液的菌數(shù)測(cè)試方法，其步驟包括：將待測(cè)樣品注入到菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液內(nèi)，根據(jù)原油分散乳化、振蕩后培養(yǎng)液變黑色來(lái)判斷微生物存在情況，采用絕跡稀釋法計(jì)算菌數(shù)。本專利技術(shù)的有益效果是：1、本專利技術(shù)所生產(chǎn)的針對(duì)產(chǎn)表面活性劑的菌數(shù)測(cè)試瓶,能夠快速準(zhǔn)確地測(cè)定水樣中的產(chǎn)表面活性劑菌的菌數(shù)，根據(jù)原油分散乳化情況、培養(yǎng)液顏色變化來(lái)判斷微生物存在情況，生長(zhǎng)指示明顯、操作簡(jiǎn)單、可大大提高工作效率，方便判斷，大大降低測(cè)試誤差，提高準(zhǔn)確率。2、培養(yǎng)液為產(chǎn)表面活性劑菌專用培養(yǎng)液，只適合產(chǎn)表面活性劑菌生長(zhǎng)，所培養(yǎng)出的微生物只是產(chǎn)表面活性劑菌，測(cè)試工作不會(huì)受其它微生物的干擾，結(jié)果準(zhǔn)確、特異性高。3、本專利技術(shù)可準(zhǔn)確測(cè)定水樣中的產(chǎn)表面活性劑菌數(shù),可用于油藏微生物生態(tài)分布分析和微生物采油等工作領(lǐng)域，在油藏水質(zhì)檢測(cè)和微生物采油現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)監(jiān)控等方面具有廣泛的應(yīng)用前景。具體實(shí)施方式本專利技術(shù)第一方面提供了一種菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液，所述培養(yǎng)液組分包括：氯化鈉、硝酸銨、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、酵母膏、水、原油。具體的，以占培養(yǎng)液的重量百分比計(jì)，所述氯化鈉含量為0.3-0.6％，所述硝酸銨含量為0.1-0.3％，所述磷酸氫二鉀含量為0.05-0.15％，所述硫酸鎂含量為0.01-0.03％，所述酵母膏含量為0.03-0.07％，所述原油含量為0.5-1.5％。培養(yǎng)液的組分及配比為產(chǎn)表面活性劑菌專用，只適合產(chǎn)表面活性劑菌的生長(zhǎng)，所培養(yǎng)出的微生物只是產(chǎn)表面活性劑菌，有效排除測(cè)試工作中其它微生物的干擾，明顯提高測(cè)試的準(zhǔn)確度。更加具體的，所述培養(yǎng)液的pH值為7.2-7.5。上述菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液用于測(cè)定產(chǎn)表面活性劑的微生物。本專利技術(shù)第二方面提供了一種菌數(shù)測(cè)試瓶，包括上述菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液及瓶體。本專利技術(shù)第三方面提供了上述菌數(shù)測(cè)試瓶的制備方法，其步驟包括：a、配制培養(yǎng)液：以重量百分比計(jì)，氯化鈉0.3-0.6％，硝酸銨0.1-0.3％，磷酸氫二鉀0.05-0.15％，硫酸鎂0.01-0.03％，酵母膏0.03-0.07％，余量為水，再滴加0.5-1.5％原油至水溶液中，即得培養(yǎng)液；b、將培養(yǎng)液加至瓶體中后密封，110-130℃下滅菌10-20min，即得菌數(shù)測(cè)試瓶。具體的，步驟a所述培養(yǎng)液的配制過(guò)程中，將氯化鈉、硝酸銨、磷酸氫二鉀、硫酸鎂和酵母膏依次加入到蒸餾水中，充分溶解，再滴加原油。更加具體的，步驟a所得培養(yǎng)液采用0.5mol/L的NaOH或0.5mol/L的HCl調(diào)節(jié)pH至7.2-7.5。最佳的pH值有利于產(chǎn)表面活性劑菌的特異性生長(zhǎng)。本專利技術(shù)第四方面提供了采用上述菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液的菌數(shù)測(cè)試方法，其步驟包括：將待測(cè)樣品注入到菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液內(nèi)，根據(jù)原油分散乳化、振蕩后培養(yǎng)液變黑色來(lái)判斷微生物存在情況，采用絕跡稀釋法計(jì)算菌數(shù)。以絕跡稀釋法為基本原理的產(chǎn)表面活性劑菌的菌數(shù)測(cè)試方法,在充分吸收絕跡稀釋法優(yōu)點(diǎn)的基礎(chǔ)上,操作極為簡(jiǎn)單,生長(zhǎng)指示明顯,結(jié)果準(zhǔn)確可靠,操作不需專業(yè)人員即可掌握,從而大大地改善了微生物的測(cè)定方法。下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本專利技術(shù)提供的一種菌數(shù)測(cè)試瓶及其制備方法、菌數(shù)測(cè)試方法予以進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例一在常溫下(以配制1L培養(yǎng)液為例，以此類推)，分別稱取氯化鈉5.0g、硝酸銨2.0g、磷酸氫二鉀1.0g、硫酸鎂0.2g和酵母膏0.5g，依次用蒸餾水溶解，并加入到1L容量瓶中混合，測(cè)定其酸堿度，并用0.5mol/L的氫氧化鈉或0.5mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)其pH值到7.2-7.5，再用蒸餾水定容本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液，其特征在于：所述培養(yǎng)液組分包括：氯化鈉、硝酸銨、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、酵母膏、水、原油。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液，其特征在于：所述培養(yǎng)液組分包括：氯化鈉、硝
酸銨、磷酸氫二鉀、硫酸鎂、酵母膏、水、原油。
2.如權(quán)利要求1所述的菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液，其特征在于：以占培養(yǎng)液的重量
百分比計(jì)，所述氯化鈉含量為0.3-0.6％，所述硝酸銨含量為0.1-0.3％，所述磷酸
氫二鉀含量為0.05-0.15％，所述硫酸鎂含量為0.01-0.03％，所述酵母膏含量為
0.03-0.07％，所述原油含量為0.5-1.5％。
3.如權(quán)利要求2所述的菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液，其特征在于：所述培養(yǎng)液的pH
值為7.2-7.5。
4.如權(quán)利要求1所述的菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)液，其特征在于：所述菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)
液用于測(cè)定產(chǎn)表面活性劑的微生物。
5.一種菌數(shù)測(cè)試瓶，其特征在于：包括如權(quán)利要求1所述的菌數(shù)測(cè)試培養(yǎng)
液及瓶體。
6.如權(quán)利要求5所述菌數(shù)測(cè)試瓶的制備方法，其步驟包括：
a、配制培養(yǎng)液：以重量百分比計(jì)，氯化鈉0.3-0.6％，...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：易紹金，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：長(zhǎng)江大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：湖北;42