一種含不同來源脂肪酶的飼料添加劑及其在黃羽肉雞飼料中的應用制造技術

一種含不同來源脂肪酶的飼料添加劑及其在黃羽肉雞飼料中的應用，其中，該飼料添加劑由下述重量百分比的組分組成：雞胰脂肪酶40%?60%，黑曲霉脂肪酶40%?60%。因此，本發明專利技術具有能夠明顯增加黃羽肉雞回腸內微生物種類的多樣性、增強黃羽肉雞對油脂的消化率、從而達到減輕肉雞營養性腹瀉的優點。

Feed additive containing lipase from different sources and its application in yellow feather broiler feed

A feed additive containing different sources of lipase and its application in yellow feathered broilers in which the feed additive comprises the following components in weight percentage: 40% to 60% chicken pancreatic lipase, lipase from Aspergillus niger 40% 60%. Therefore, the invention has the advantages of obviously increasing the diversity of the microbial species in the ileum of yellow feather broiler and enhancing the digestibility of the Yellow Feather Broiler to the grease, thereby reducing the nutritive diarrhea of the broiler.

【技術實現步驟摘要】
一種含不同來源脂肪酶的飼料添加劑及其在黃羽肉雞飼料中的應用
本專利技術涉及飼料添加劑領域,尤其是涉及一種含不同來源脂肪酶的飼料添加劑及這種飼料添加劑在黃羽肉雞飼料中的應用。
技術介紹
油脂飼料具有代謝能值高的特點，其能值是碳水化合物和蛋白質的2.25倍，是養雞專業戶進行肉雞標準化生產飼養時日糧中不可缺少的重要原料之一，因此，養殖戶都會在肉雞飼料中添加一定比例的油脂，以滿足肉雞的生長需要，畜禽日糧中添加油脂已成為提高高能營養的技術途徑之一。然而，近幾年來，能量飼料原料尤其是油脂的價格在不斷攀升，如何提高飼料中能量的利用率，減少油脂添加量，降低飼料成本，提高養殖效益，同時減少高油脂對畜禽帶來的一系列的影響和危害日益成為養殖企業關注的熱點。脂肪酶，作為代謝脂肪最基本的酶，若缺乏將會造成脂肪消化不良機體紊亂等現象危及機體健康。單胃動物自身能夠分泌淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等內源性消化酶，但幼齡動物消化機制尚未發育健全，內源脂肪酶分泌不足。當內源胰脂肪酶和膽汁酸分泌量不足時，脂肪則不能被畜禽機體充分利用，從而導致脂肪的浪費和損失，同時，脂肪的不完全利用也會帶來多種不良癥狀，如營養性腹瀉和脂肪肝，影響肉雞的健康生長及養殖綜合效益。為解決上述問題，有學者嘗試將脂肪酶作為飼料添加劑添加到肉雞日糧中，補充幼齡動物內源脂肪酶分泌不足，以達到提高肉雞對油脂利用率的目的。但是，在反復試驗過程中效果不甚理想，回腸內微生物的種類并沒有明顯增加，肉禽營養性腹瀉并沒有明顯改善，分析可能的原因之一是飼喂肉雞的脂肪酶來源單一，不能完全分解利用不同類型的油脂，導致無法滿足肉雞對脂肪酸的需求。如何添加不同來源脂肪酶以達到提高油脂利用率，降低養殖成本，提高養殖綜合效益的目的，成為人們普遍關注的熱點之一。
技術實現思路
為解決上述問題，本專利技術向社會提供一種能夠明顯增加黃羽肉雞回腸內微生物種類的多樣性，提高黃羽肉雞對油脂的消化率，從而達到減輕肉雞營養性腹瀉的含不同來源脂肪酶的飼料添加劑。本專利技術還提供一種能夠明顯增加黃羽肉雞回腸內微生物種類的多樣性的、增強黃羽肉雞對油脂的消化率、從而達到減輕肉雞營養性腹瀉的肉雞飼料。本專利技術的技術方案是：提供一種含不同來源脂肪酶的飼料添加劑，由下述重量百分比的組分組成：雞胰脂肪酶40%-60%，黑曲霉脂肪酶40%-60%。作為對本專利技術的改進，由下述重量百分比的組分組成：雞胰脂肪酶45%-55%，黑曲霉脂肪酶45%-55%。作為對本專利技術的改進，所述雞胰脂肪酶是通過下述方法制備的：（1）粗雞胰脂肪酶的制備；（2）雞胰脂肪酶的分離純化；（21）硫酸銨沉淀；（22）超濾濃縮；（23）葡聚糖凝膠（SephadexG-100）分子過濾層析；（24）SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）檢測；作為對本專利技術的改進，所述粗雞胰脂肪酶的制備包括下述步驟：（11）將雞胰腺搗成胰漿，加入緩沖液，4℃條件下磁力攪拌2h；（12）過濾，取溶液，1500rpm-2000rpm離心去除第一沉淀，溶液加入丙酮，繼續磁力攪拌25min-40min，然后在4℃條件下，1500rpm-2000rpm離心15min-30min，第二沉淀用75%丙酮溶解攪拌，再離心，得第三沉淀；（13）干燥第三沉淀，得固體粉末；（14）將所述固體粉末加入到4℃的氯仿-甲醇（氯仿與甲醇的體積比為2:1）中，磁力攪拌15min-30min，然后在4℃條件下、1500rpm-2000rpm離心，得第四沉淀，第四沉淀溶于乙醚中，再在4℃條件下、1500rpm-2000rpm離心，得第五沉淀，第五沉淀溶于丙酮中，再將第五沉淀干燥，得粗酶粉。作為對本專利技術的改進，所述步驟（21）硫酸銨沉淀包括下述步驟：（211）、將上述粗酶粉溶于50mL去離子水中制成粗酶液，將裝有50mL粗酶液的小燒杯放在另一個裝有少量冰水的大燒杯內，并置于磁力攪拌器上緩慢攪拌；（212）、一邊緩慢攪拌，一邊緩慢加入10.00g、15.00g、20.00g、25.00g、30.00g、35.00g硫酸銨至終濃度為20%、30%、40%、50%、60%、70%（w/v），該步驟應在10min內完成；然后繼續攪拌15min-20min；（214）、接著10000rpm離心8-12min；棄去上清液，將沉淀懸浮于1~2倍沉淀物體積的0.05mol/LpH為7.5磷酸緩沖液，10000rpm離心出去殘留的不溶性物質；（216）、測定上清液中的酶活力與蛋白質含量，計算濃縮酶液的比活力和純化倍數；其中，比活力=酶活力單位/毫克蛋白質；純化倍數=每步比活力/第一步比活力。本專利技術還提供一種肉雞飼料，該肉雞飼料含有上述的任意一種含不同來源脂肪酶的飼料添加劑，飼料添加劑為0.01%-0.02%，基料為99.8%-99.9%。作為對本專利技術的改進，所述基料是基礎日糧或低能日糧。作為對本專利技術的改進，其中，所述基礎日糧由下述重量百分比的組分組成：玉米50%-65%，豆粕15%-30%，玉米蛋白粉3%-6%，酒糟蛋白飼料(DDGS)4%-6%,四級大豆油2%-6%，次粉0.1%-5%，石粉1.3%-1.6%，磷酸氫鈣0.6%-1.5%，食鹽0.3%-0.4%，賴氨酸0.3%-0.5%，固體蛋氨酸0.4%-1.2%，蘇氨酸0.2%-0.8%，第一預混料1%。本專利技術還提供含不同來源脂肪酶的飼料添加劑在黃羽肉雞飼料中的應用。本專利技術還提供含有不同來源脂肪酶的飼料對黃羽肉雞回腸微生物多樣性方面影響的應用。本專利技術提供一種含不同來源脂肪酶的飼料添加劑，所述飼料添加劑中不同來源脂肪酶由下述重量百分比的組分組成：雞胰脂肪酶40%-60%，黑曲霉脂肪酶40%-60%。當將由所述雞胰脂肪酶和黑曲霉脂肪酶按照上述比例配制后作為飼料添加劑添加到黃羽肉雞日糧中，可達到補充肉雞體內內源脂肪酶分泌不足，提高粗脂肪利用率，且相對于現有技術，由于飼料添加劑中新添加了雞脂肪酶是雞胰脂肪酶和黑曲霉脂肪酶的組合，雞胰組合脂肪酶在黃羽肉雞體內發揮的作用更穩定、持久，活性更高；同時，不同來源的雞胰脂肪酶和黑曲霉脂肪酶可協同作用由于雞胰脂肪酶和黑曲霉脂肪酶來源不一樣，兩者可協同作用，可分解利用肉雞日糧中不同類型的油脂，提高不同類型脂肪利用率，明顯增加黃羽肉雞回腸內微生物種類的多樣性，減少黃羽肉雞的脂肪肝和營養性腹瀉。因此，本專利技術具有能夠明顯增加黃羽肉雞回腸內微生物種類的多樣性，提高黃羽肉雞日糧中脂肪利用率，從而達到減輕肉雞營養性腹瀉的目的。附圖說明圖1是葡聚糖凝膠（SephadexG-100）過濾層析洗脫曲線圖。圖2是純化步驟的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）檢測圖。圖3是微生物16SrDNA基因V3區基因片段的聚合酶鏈反應（PCR）圖。圖4是微生物16SrDNA基因V3區基因片段的聚合酶鏈反應（PCR）圖。圖5是微生物16SrDNA基因V3區基因片段變性梯度凝膠電泳（DGGE）指紋圖譜。具體實施方式本專利技術中，特別說明的是，所述“不同來源”指的是脂肪酶的來源不同，其中，雞胰脂肪酶來自雞胰腺，黑曲霉脂肪酶來自黑曲霉。本專利技術中，飼料中的基礎日糧由下述重量百分比的組分組成，具體實施例如下：實施例1玉米50%，豆粕20%，玉米蛋白粉6%，酒糟蛋白飼料(DDGS)6%,四級大豆油6%本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種含不同來源脂肪酶的飼料添加劑，其特征在于，由下述重量百分比的組分組成：雞胰脂肪酶40%?60%，黑曲霉脂肪酶40%?60%。

【技術特征摘要】
1.一種含不同來源脂肪酶的飼料添加劑，其特征在于，由下述重量百分比的組分組成：雞胰脂肪酶40%-60%，黑曲霉脂肪酶40%-60%。2.根據權利要求1所述的含不同來源脂肪酶的飼料添加劑，其特征在于：由下述重量百分比的組分組成：雞胰脂肪酶45%-55%，黑曲霉脂肪酶45%-55%。3.根據權利要求1或2所述的含不同來源脂肪酶的飼料添加劑，其特征在于：所述雞胰脂肪酶是通過下述方法制備的：粗雞胰脂肪酶的制備；雞胰脂肪酶的分離純化；（21）硫酸銨沉淀；（22）超濾濃縮；（23）葡聚糖凝膠（SephadexG-100）分子過濾層析；（24）SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）檢測。4.根據權利要求3所述的含不同來源脂肪酶的飼料添加劑，其特征在于：所述粗雞胰脂肪酶的制備包括下述步驟：（11）將雞胰腺搗成胰漿，加入緩沖液，4℃條件下磁力攪拌2h；（12）過濾，取溶液，1500rpm-2000rpm離心去除第一沉淀物，溶液加入丙酮，繼續磁力攪拌25min-40min，然后在4℃條件下，1500rpm-2000rpm離心15min-30min，第二沉淀物用75%丙酮溶解攪拌，再離心，得第三沉淀物；（13）干燥第三沉淀物，得固體粉末；（14）將所述固體粉末加入到4℃的氯仿-甲醇（氯仿與甲醇的體積比為2:1）中，磁力攪拌15min-30min，然后在4℃條件下、1500rpm-2000rpm離心，得第四沉淀物，第四沉淀物溶于乙醚中，再在4℃條件下、1500rpm-2000rpm離心，得第五沉淀物，第五沉淀物溶于丙酮中，再將第五沉淀物干燥，得粗酶粉。5.根據權利要求3所述的含不同來源脂肪酶的飼料添加劑，其特征在于：所述步驟（21）硫酸銨沉淀包括下述步驟：（211）、將上述粗酶粉溶于50m...

【專利技術屬性】
技術研發人員：吳廣兵，左建軍，龔俊勇，袁琨，
申請(專利權)人：吳廣兵，左建軍，龔俊勇，袁琨，
類型：發明
國別省市：廣東,44