兩親性mPEG修飾的石膽酸制造技術

本發明專利技術涉及藥用高分子材料技術領域和藥物制劑領域，提供一種兩親性mPEG修飾的石膽酸及其制備方法，以及作為藥物載體的應用。它是在石膽酸的羧基上接上親水性單甲氧基聚乙二醇(mPEG)而形成的，具有兩親性，在水中自組裝形成聚合物膠束，可包裹難溶性藥物制成載藥納米粒。具有臨界膠束濃度低，制得的納米粒穩定性好，載藥量高，制備工藝簡單等特點。

Two Pro mPEG modified cholic acid

The invention relates to the technical field of medicinal polymer materials and the field of pharmaceutical preparation, provides a two parent mPEG modified cholic acid, a preparation method thereof, and an application as a drug carrier. It is formed on hydrophilic group of hydrophilic methoxy polyethylene glycol (mPEG) on the carboxyl group of cholic acid and has two affinity. It can form polymer micelles in water itself, and can be coated with insoluble drugs to make drug loaded nanoparticles. With low critical micelle concentration, the prepared nanoparticles have good stability, high drug loading capacity and simple preparation process.

【技術實現步驟摘要】
兩親性mPEG修飾的石膽酸
本專利技術涉及高分子材料
或是藥物制劑領域，特別涉及一種mPEG修飾的石膽酸和制備方法以及作為藥物載體的應用。
技術介紹
當代藥物學研究表明，藥物發揮其療效，除了與藥物本身的化學性質、分子結構緊密相關外，還與藥物的物理狀態如粒徑大小、表面電荷等相關。聚合物的親水和親油片段在水溶液中通過分子自組裝原理可以形成納米膠束。其表面親水、內部親油，因此難溶性藥物通過這種膠束在傳送與控釋領域具有很多的優點：提高難溶性藥物在溶液中的溶解度、減少易降解藥物在達到作用靶點的過程中發生降解、提高藥物的生物利用度、延長體內循環時間、增強對細胞膜的粘附能力，同時還可以通過對膠束表面進行化學修飾，使其靶向進入疾病細胞減少藥物在使用時對正常組織的副作用。其中聚乙二醇(PEG)是最廣泛的表面修飾材料。聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)系列產品包括單甲氧基聚乙二醇(mPEG)，無毒、無刺激性，并與許多有機物組份有良好的相溶性。其優異的生物相容性，在體內能溶于組織液中，分子量4000以下的PEG能被機體迅速排除體外而不產生任何毒副作用，其安全性已經得到了美國FDA的認證。石膽酸(Lithocholicacid，LCA)是膽汁酸之一，不溶于水，它不是由膽甾醇在肝中直接生物合成的，而是由鵝脫氧膽酸在腸內通過細菌代謝產生的物質，石膽酸(LCA)具有剛性分子結構，作為膽甾衍生物存在于哺乳動物膽汁中，具有一定的抗癌作用。鬼臼毒素(Podophyllotoxin)是一種天然存在的木脂素類化合物，具有抑制細胞微管蛋白聚合破壞微管形成的特性，產生顯著的抗癌和抗病毒活性。但是它難溶于水且毒副作用大，影響臨床應用。其它抗癌藥如紫衫醇、多西紫杉醇和喜樹堿也有類似的問題。本專利技術提供并公開兩親性mPEG修飾的石膽酸，它是在石膽酸上接親水性的mPEG鏈，改善石膽酸的親水性，成為一種兩親性聚合物膠束納米材料，易包裹難溶性藥物，提高難溶性藥物水溶性，便于制劑制備和使用，同時膠束納米粒外殼mPEG鏈有利于減少體內巨噬細胞吞噬，延長體內循環時間，再者納米粒能提高藥物腫瘤靶向性，增加藥物療效，減少藥物毒副作用，另外石膽酸本身具有一定抗腫瘤活性，是一種潛在的抗腫瘤藥物，且無毒、生物相容性好。
技術實現思路
本專利技術描述并要求一種兩親性mPEG修飾的石膽酸、制備方法和其作為藥物膠束載體材料的應用。它是一種安全性好，生物可降解、臨界膠束濃度低的兩親性聚合物，可在水中自組裝形成聚合物膠束，作為納米藥物傳遞系統，同時材料本身具有抑制腫瘤生長的作用。本專利技術的目的在于提供一種兩親性mPEG修飾的石膽酸及其制備方法。本專利技術的目的在于提供一種兩親性mPEG修飾的石膽酸作為藥物載體在藥物制劑學領域的應用。本專利技術涉及的mPEG修飾的石膽酸，是指在石膽酸上羧基上接親水鏈mPEG，改善其兩親性，可在水中自組裝形成聚合物膠束。本專利技術的目的在于提供一種兩親性mPEG修飾的石膽酸，其中單甲氧基聚乙二醇(mPEG)分子量為300～10000。本專利技術所述的兩親性mPEG修飾的石膽酸，其制備過程如下：mPEG溶于無水二氯甲烷，加入氧化銀、碘化鉀、對甲苯磺酰氯(TsCl)，室溫下磁力攪拌2～4h，反應液經硅藻土過濾，過量二氯甲烷洗滌，旋轉蒸發除掉溶劑即得到mPEG-OTs粗品；將上述合成的mPEG-OTs溶于濃氨水，加入氯化銨，40℃恒溫油浴磁力攪拌3d，反應液用二氯甲烷萃取，收集有機層，有機層用無水硫酸鎂脫水，旋轉蒸發濃縮后，滴加過量冰乙醚，沉淀，過濾，收集沉淀，真空干燥12h，得mPEG-NH2；稱取石膽酸(LCA)，置于含有二氯甲烷的三口圓底燒瓶中，攪拌下滴加N，N’-二甲基甲酰胺(DMF)，至石膽酸全部溶解，置于冰浴中，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDAC)，攪拌兩小時后，緩慢加入溶于二氯甲烷中的mPEG-NH2，在室溫下攪拌24h，反應液用飽和食鹽水稀釋，分層后，收集有機層，水層用二氯甲烷萃取(5×100ml)，收集合并有機層，用無水硫酸鎂干燥脫水，旋轉蒸發濃縮后，滴加過量冰乙醚，沉淀，過濾，收集沉淀，真空干燥12h，得mPEG-LCA。本專利技術的目的還在于提供一種載藥聚合物膠束納米粒，其特征在于用本專利技術所述的兩親性mPEG修飾的石膽酸，包載難溶性藥物，制成載藥聚合物膠束納米粒，其制備方法包括以下過程：將mPEG修飾的石膽酸溶于雙蒸水中，自組裝形成濃度1～4mg/ml的空白膠束溶液，將難溶性藥物溶于有機溶劑后，逐滴加入到上述的空白膠束溶液中，經超聲處理后，置于雙蒸水中透析除去有機溶劑，透析液經離心，過濾后，必要時凍干，制得150～300nm的聚合物載藥膠束。本專利技術所述的mPEG修飾的石膽酸，具有膠束臨界膠束濃度低，生物相容性好，延長體循環時間，靶向到癌細胞能力強等特點。本專利技術所述的mPEG修飾的石膽酸，具有易形成載藥聚合物納米粒，制備納米粒工藝簡便，納米粒膠束穩定性好，載藥量高等特點。附圖說明圖1：mPEG-LCA的1H-NMR圖圖2：mPEG-LCA的熒光發射光譜I1/I3與聚合物對數濃度關系圖圖3：PPT溶液和PPT-mPEG-LCANPs的體外釋放曲線圖4：PPT溶液、PPT-mPEG-LCANPs和mPEG-LCANPs對細胞抑制作用圖具體實施方式下面將結合實施例來進一步說明本專利技術所涉及的兩親性mPEG修飾的石膽酸、制備方法以及載藥應用。但是，下述實施例不應當被看作是以任意方式限制本專利技術。實施例1mPEG-OTs的制備稱取干燥處理后的mPEG(1900Da，4g)于50mL圓底燒瓶中，加入30mL無水二氯甲烷溶解。分別加入氧化銀(Ag2O，0.92g)、碘化鉀(KI，0.66g)、對甲苯磺酰氯(TsCl，0.76g)，室溫下磁力攪拌2～4h，反應液經硅藻土過濾，30℃減壓旋轉蒸發濃縮，滴加冰乙醚，混勻，冰箱中沉淀十分鐘后，過濾沉淀，真空干燥12h，得mPEG-Ots(3.96g)。實施例2mPEG-NH2制備將實施例1合成的mPEG-OTs溶于50mL濃氨水，加入氯化銨(NH4Cl，1.35g)，40℃恒溫油浴磁力攪拌3d。反應液用二氯甲烷萃取，收集有機層，有機層用無水硫酸鎂脫水，旋轉蒸發濃縮后，滴加過量冰乙醚，冰箱中沉淀十分鐘后，過濾，收集沉淀，真空干燥12h，得mPEG-NH2(3.32g)。實施例3mPEG-LCA制備方法：稱取石膽酸(112.95mg，0.3mmol)，置于含有12ml二氯甲烷的三口圓底燒瓶中，滴加DMF，至石膽酸(LCA)全部溶解，置于冰浴中攪拌，加入EDAC(172.53mg，0.9mmol)，攪拌兩小時后，緩慢加入溶于3ml二氯甲烷mPEG-NH2(380mg，0.2mmol)，在室溫下攪拌24h，反應液用36ml的飽和食鹽水稀釋，分層后，收集有機層，水層用二氯甲烷萃取(5×100ml)。收集合并有機層，用無水硫酸鎂干燥脫水，旋轉蒸發濃縮后，滴加過量冰乙醚，沉淀，過濾，收集沉淀，真空干燥12h，得mPEG-LCA(306.1mg)，經1H-NMR(如圖1)確認。實施例4mPEG-LCA的臨界膠束濃度的測定精密稱取1.011mg的芘，置于10ml容量瓶中，用丙酮稀釋，至刻度線，定溶，配本文檔來自技高網...

【技術保護點】
兩親性mPEG修飾的石膽酸，其特征在于它是在石膽酸的羧基上引入親水的單甲氧基聚乙二醇(mPEG)而形成的，具有兩親性；在水中能自組裝形成聚合物膠束，可以作為難溶性藥物的納米載體。

【技術特征摘要】
1.兩親性mPEG修飾的石膽酸，其特征在于它是在石膽酸的羧基上引入親水的單甲氧基聚乙二醇(mPEG)而形成的，具有兩親性；在水中能自組裝形成聚合物膠束，可以作為難溶性藥物的納米載體。2.根據權利要求1所述的兩親性mPEG修飾的石膽酸，其中mPEG的分子量為300～10000Da。3.根據權利要求1所述的兩親性mPEG修飾的石膽酸，其制備過程如下：mPEG溶于無水二氯甲烷，加入氧化銀、碘化鉀、對甲苯磺酰氯(TsCl)，室溫下磁力攪拌2～4h，反應液經硅藻土過濾，過量二氯甲烷洗滌，旋轉蒸發除掉溶劑即得到mPEG-OTs粗品；將上述合成的mPEG-OTs溶于濃氨水，加入氯化銨，40℃恒溫油浴磁力攪拌3d，反應液用二氯甲烷萃取，收集有機層，有機層用無水硫酸鎂脫水，旋轉蒸發濃縮后，滴加過量冰乙醚，沉淀，過濾，收集沉淀，真空干燥12h得mPEG-NH2；稱取石膽酸(LCA)，置于含有二氯甲烷的三口圓底燒瓶中，攪拌下滴加N，...

【專利技術屬性】
技術研發人員：欒立標，王翠，
申請(專利權)人：中國藥科大學，
類型：發明
國別省市：江蘇,32